脚注1。跟踪A - HVAC分级应使用ANSI / RESNET / ACCA / ICC 310,包括所有附录和规范性附录,并根据HCO定义的HCO计划实施了新的版本和附录,该计划已获得了房屋的认证。2。应为每个经过认证的房屋验证所有项目,并且不得使用采样协议。“评估者”一词是指完成认证所需的第三方验证的人。人应:a)为ANSI / Resnet / ICC 301定义的认证评估者或已批准的检查员,或由HCO确定的同等指定;并且,b)参加并成功完成了EPA公认的培训课程。请参阅www.energystar.gov/newhomestring。3。标题为“ n/a”的列,该列表示“不适用”的项目,应在房屋中不存在清单项目或与本地要求发生冲突时使用。4。评估者只需要一次记录建筑商的合作状态,以便评估者为他们认证的第一个房屋。5。评估者只需要一次记录其公司的合伙状态,以便评估者为他们认证的第一个房屋。6。对于除National V3.2和National v3.3以外的所有版本,2009年IECC气候区域名称均适用,如《法规》的R301节中的定义和说明。对于国家v3.2和国家v3.3,2021年的IECC气候区域名称适用,如《法规》第R301节中的定义和说明。7。请参见脚注8。8。请注意,与先前的版本相比,某些位置已转移到2021 IECC的不同气候区域。除了国家v3.2和国家v3.3以外的所有版本,建筑物的总建筑物封装UA(即,对天花板,墙壁,地板,楼板和窗帘的核算会计)应小于或等于或等于2009年IECC桌子402.1.3的UA所产生的UA,并与同一组件相同,并与其进行了认证。对于国家v3.2,总建筑物信封UA应小于或等于2021 IECC表402.1.2在2021 IECC表402.1.2乘以与要认证的房屋相同的组装区域所产生的UA。例外情况下,在01/01/2025之前允许的房屋,并使用国家v3.2进行认证:总建筑物热包膜UA应小于或等于或等于2021 IECC表402.1.2在u-acture中产生的UA总ua的105%。对于国家v3.3,在气候区1-2中,总建筑物包络TC应小于或等于108%,气候区域3 8在TC总TC中,由于使用2024 IECC表R402.1.2和该代码的方程4-1所产生的TC的总TC。UA计算应使用与ASHRAE基本原理手册一致的方法进行,并应包括框架材料的热桥接效应。钢制框架组件的计算应使用ASHRAE区方法或提供等效结果的方法,而不是串联的并行路径计算方法。请注意,U-Factor的要求适用于所有Fenestration,而SHGC仅适用于釉面部分。由法典官员指定为具有非常严重的白蚁侵扰的司法管辖区,应通过用额定房屋中规定的板绝缘R值和底部替换代码要求的R-VALUE和DEPTH来计算总UA或TC限制。如果在窗口或产品文献中未注明NFRC评级(例如,对于现场式插曲),请从表4和表10中分别从表4和10中选择U-Factor和SHGC值,2013年Ashrae基本面,第15章。在已知窗口特征列出的值(例如,框架类型,窗格数,玻璃颜色和低-E涂层的存在)中选择最高的U因子和SHGC值。以下例外适用:
过早的婴儿应在适当的年代年龄进行免疫接种。这对于乙型肝炎感染母亲所生的婴儿至关重要,因为延迟会增加感染的机会。但是,疫苗接种后呼吸暂停的发生量特别高于出生的婴儿。因此,在医院住院的非常过早的婴儿(出生≤28周的妊娠≤28周)应在接受第一次免疫时进行48-72小时的呼吸监测,尤其是那些先前具有呼吸道不成熟史的免疫。如果婴儿在第一次免疫后患有呼吸暂停,心动过缓或去饱和,则第二次免疫也应在医院中进行,呼吸道监测48-72小时。由于这组婴儿的疫苗接种益处很高,因此不应扣留或延迟疫苗。
方法在补充了10%FCS,1%谷歌补充剂(Gibco),100 U/ml青霉素和100μg/ml链霉菌素的IMDM(Gibco)中培养了衍生成近单倍型HAP1细胞的细胞培养。siRNA转染是根据制造商的指南使用Rnaimax(Invitrogen)进行的。在这项研究中使用了以下siRNA:Sinon-targetable(Dharmacon),Sipolg2(地平线,TargetPlus,SmartPool),SIMRPL23(Horizon,Targetplus,TargetPlus,Smartpool)。将所有药物(Aphidicolin,Hu,Olaparib,Rad51i(B02),DNA-PKI(NU74441)和寡霉素A)溶解在DMSO中,并以指示浓度使用。细胞使用具有137CS源的γ提取器(最佳疗法)进行γ辐射。生长测定HAP1细胞以1500个细胞/孔的密度将HAP1细胞铺在96孔板中,并被视为5天。5天后,使用100%甲醇固定细胞,并在室温下使用Crystal Violet染色2H。随后,将晶体紫溶解在10%乙酸中,并使用Biotek Epoch Epoch分光光度计在595 nm处测量强度。使用非线性拟合,sigmoidal,4pl,x是log(浓度),将这些测量值用于棱镜中的IC50计算。在9mm玻璃盖上生长免疫荧光细胞,并在室温下以4%甲醛和0.2%Triton X-100固定10分钟。使用了以下抗体:人类抗克雷斯特(Cortex Biochem,CS1058),兔抗PH3SER10(Campro,#07-081),小鼠抗ERCC6L(PICH)(ABNOVA,ABNOVA,000548421-B01P)。所有初级抗体在4°C的夜间孵育。使用固定缓冲液I(BD生物科学)固定细胞。细胞。二级抗体(分子探针,Invitrogen)和DAPI在室温下孵育2小时。使用延长金(Invitrogen)安装盖玻片。使用具有60倍1.40 Na油目标的Deltavision Deonvolution显微镜(Applied Precision)获取图像。SoftWorx(应用精度),ImageJ,Adobe Photoshop和Illustrator CS6用于处理获得的图像。单倍体插入诱变筛选基因对用APH或HU处理的HAP1细胞的存活至关重要,如先前所述35,使用单倍体插入诱变筛查鉴定。诱变的HAP1细胞是从Brummelkamp实验室获得的。简短地,获得HAP1细胞的诱变如下:在HEK293T细胞中产生了基因陷阱逆转录病毒。每天两次收获逆转录病毒至少三天,并通过离心(使用SW28转子进行2小时,21,000 rpm,4°C,4°C)进行沉淀。在8μg/ml硫酸素硫酸素的存在下,在T175烧瓶中至少连续两天,在8μg/ml硫酸素的存在下,将大约4000万个HAP1细胞通过浓缩基因陷阱病毒的转导而被诱变。在包含10%DMSO和10%FCS的IMDM培养基中冷冻诱变细胞。解冻后,在存在27.5 nm adphidicolin或100μmHu的情况下,将诱变的HAP1细胞转移了10天。传递后,通过胰蛋白酶-EDTA收集细胞,然后进行沉淀。为了最大程度地减少潜在地含有杂合突变的二倍体细胞的混杂,用DAPI染色固定的细胞,以允许使用Astrios Moflo对G1单倍体DNA含量进行分类。将3000万个排序的细胞在56°C下裂解过夜,以使使用DNA迷你试剂盒(QIAGEN)进行基因组DNA分离。插入位点映射基因陷阱插入位点通过LAM-PCR放大,然后进行捕获,ssDNA接头连接和指数放大,并在测序之前使用含有Illumina适配器的引物,如前所述,如前所述35。映射和插入位点的分析以前描述了78。简短地,在对HISEQ 2000或HISEQ 2500(Illumina)进行测序之后,将插入位点映射到人类基因组(H19),允许一个不匹配,并与RefSeq坐标相交,以将插入位点分配给基因。基因区域在相对链上重叠的基因区域没有考虑进行分析,而对于在相同链基因名称上重叠的基因是串联的。对于每种复制和两种药物治疗(APH或HU)基因的必要性都是通过二项式检验确定的。合成致死性。一个基因通过所有Fisher的测试,其p值截止为0.05,效应大小至少为0.12(减法比率wt sense比率 - 复制应力条件感官比率)。