摘要:小鼠尿液中含有人尿中未发现的主要尿蛋白(MUP)。因此,即使健康的小鼠也表现出蛋白尿,与健康的人不同,将小鼠用作人类疾病的模型变得具有挑战性。也未知尿液分析的量子是否可以精确地测量含有MUP的尿液中的蛋白质浓度。为了解决这些问题,我们通过使用Cas9蛋白和两个指导RNA去除MUP基因簇来产生MUP敲除(MUP-KO)小鼠,并表征了这些小鼠中的尿蛋白。,我们使用蛋白质定量试剂盒和量油盒测量了MUP-KO和野生型小鼠中的尿蛋白浓度。我们还使用SDS-PAGE和二维电泳(2DE)检查了尿蛋白组成。MUP-KO小鼠(17.9±1.8 mg/dl,平均值±SD,n = 3)的尿蛋白浓度明显低(P <0.001)(p <0.001)(p <0.001)。这种差异并未反映在量强壮的值中,这可能是由于对MUP的敏感性低。这表明用量油量有限,可以精确地测量MUP的变化。SDS-PAGE和2DE证实,像人类一样,MUP-KO小鼠的尿液中没有MUP,而野生型小鼠的尿液中有大量的MUP。MUP在2DE中的掩蔽效果将使尿蛋白,尤其是低分子量蛋白的明确比较。因此,MUP-KO小鼠可以为人类尿液分析提供有用的模型。关键词:基因组编辑,敲除模型,主要尿蛋白,尿液分析
亚洲柑橘溃疡的病因,革兰氏阴性细菌xanthomonas citri subsp。citri(XAC)比Xanthomonas fuscans亚种产生更严重的症状并发作更多的cit宿主。aurantifolii Xaub和Xauc,肿瘤的病因,疾病的温和形式。在这里,我们报告了XAC和XAUB的富含周质的蛋白质组学分析XAM-M中的XAC和XAUB(一种致病性 - 诱导培养基),用于鉴定差异蛋白。蛋白质通过二维电泳与液相色谱 - 质量光谱法相结合。Among the 12 proteins identified from the 4 unique spots from XAC in XAM-M (p < 0.05) were phosphoglucomutase (PGM), enolase, xylose isomerase (XI), transglycosylase, NAD(P)H- dependent glycerol 3-phosphate dehydrogenase, succinyl-CoA synthetase β subunit, 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶,以及保守的假设蛋白XAC0901和XAC0223;当两种细菌在NB培养基中生长,这是一种致病性的非诱导培养基时,它们中的大多数都没有被视为XAC的差异。XAUB与XAM-M中的XAC显示出截然不同的特征,其中呈现了29个独特的斑点,其中包含与各种代谢途径相关的蛋白质。通过蛋白质印迹分析在两种细菌的富含周质含量的馏分中,PGM和XI在XAC中的占主导地位得到了验证。