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通过将 CRISPR/Cas9 系统电穿孔到体外受精的受精卵中有效生成 GGTA1 缺陷猪
背景：异种抗原是种间异种移植成功的主要问题。GGTA1 编码 α 1,3-半乳糖基转移酶，该酶对半乳糖基-α 1,3-半乳糖的生物合成至关重要，而半乳糖是导致超急性排斥的主要异种抗原。因此，GGTA1 修饰猪是猪对人异种移植的有希望的供体。在本研究中，我们开发了一种通过电穿孔将 CRISPR/Cas9 系统引入体外受精猪受精卵以生成 GGTA1 修饰猪的方法。结果：我们设计了五种针对 GGTA1 中不同位点的向导 RNA (gRNA)。通过电穿孔将 Cas9 蛋白与每一种 gRNA 一起引入后，评估了受精卵发育成的囊胚中的基因编辑效率。使用基因编辑效率最高的 gRNA 生成 GGTA1 编辑猪。在用 Cas9/gRNA 复合物转移电穿孔受精卵后，两头受体母猪产下六头仔猪。深度测序分析显示，六头仔猪中有五头在 GGTA1 的目标区域携带双等位基因突变，没有脱靶事件。此外，用异凝集素 B4 染色证实了 GGTA1 双等位基因突变猪的 GGTA1 功能缺陷。
缺乏 RpoS 和二级信使 c-di-GMP 的 DIVA 疫苗株可用于预防猪沙门氏菌病
摘要 沙门氏菌病是欧盟第二大常见的食源性人畜共患病，猪是这种病原体的主要宿主。养猪生产中的沙门氏菌控制需要采取多种措施，其中可通过接种疫苗来减少流行血清型（如鼠伤寒沙门氏菌血清型）的亚临床携带和脱落。减毒活疫苗株在增强细胞介导免疫和允许通过口服途径接种方面具有优势。然而，这些疫苗的主要缺点是对异源血清型的交叉保护作用有限，并且会干扰感染的血清学监测。我们最近表明，减毒沙门氏菌菌株 (ΔXIII) 在鼠感染模型中对鼠伤寒沙门氏菌具有保护作用。ΔXIII 菌株含有 13 条染色体缺失，这使得它无法产生 sigma 因子 RpoS 和合成环二鸟苷酸 (c-di-GMP)。在本研究中，我们的目标是测试 ΔXIII 菌株对猪的保护作用，并研究使用 ΔXIII 是否可以区分已接种疫苗的猪和已感染的猪。结果表明，在断奶前仔猪口服 ΔXIII 疫苗可减少断奶和屠宰时的粪便脱落和回盲淋巴结定植，从而交叉保护仔猪免受鼠伤寒沙门氏菌的攻击。接种疫苗的猪在断奶时既没有粪便脱落，也没有疫苗菌株的组织持续存在，从而确保屠宰时不存在 ΔXIII 菌株。此外，ΔXIII 菌株中缺乏 SEN4316 蛋白，这使得开发血清学测试成为可能，从而区分感染动物和接种疫苗的动物 (DIVA)。
猪繁殖与呼吸综合征疫苗接种的经济效应建模：疫苗接种效果、疫苗价格和疫苗接种覆盖率的影响
猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS) 给养猪场造成巨大的经济损失，给全世界的社会带来经济损失。接种 PRRS 病毒 (PRRSV) 疫苗是受影响农场的常见干预措施。本研究旨在评估潜在的新型 PRRS 疫苗在动物、畜群和国家层面的经济影响和盈利能力，这些疫苗的效力有所提高。模拟了两种疫苗接种策略：(i) 仅对母猪进行大规模疫苗接种 (MS) 和 (ii) 对母猪和仔猪进行大规模疫苗接种 (MSP)，包括疫苗有效性、疫苗价格和疫苗接种覆盖率的不同方案。以德国一个养猪密集地区拥有 1,000 头母猪的从分娩到育肥的农场为例。财务收益是从毛利率分析中获得的，定义为未接种疫苗（基线）和接种疫苗（干预）的 PRRSV 感染农场之间的毛利率差异。如果母猪和仔猪都接种疫苗（MSP），经济效益最高。在这些情况下，每头工作母猪的年净效益中位数在 e 170 到 e 340 之间。如果只对母猪接种疫苗（MS），估计疫苗接种带来的效益在 e 148 到 e 270 之间。估计国家层面效益的决定性变量是从现有疫苗转向保护性更强的疫苗的农民数量、采用新疫苗的以前未接种疫苗的牛群数量以及新疫苗相对于已有疫苗的有效性。当以前未接种疫苗的牛群采用新疫苗时，效益最大。分析表明，在所有模拟情景中，接种 PRRS 疫苗都是有益的。疫苗接种带来的效益大小更容易受到疫苗有效性变化的影响，而不是疫苗价格变化的影响。这项研究为支持未来的疫苗开发提供了证据。估计表明，引入更有效的疫苗可能会带来巨大的经济效益，具有社会经济重要性，而且新疫苗可能对减轻疾病负担做出重大贡献。
发情人工智能系统的评估……
摘要：对人工智能系统用于母猪发情检测的评估 Steven Verhoeven 1,5、Ilias Chantziaras 2、Elise Bernaerdt 1、Michel Loicq 3、Ludo Verhoeven 4 和 Dominiek Maes 1 1 比利时根特大学兽医学院猪健康管理系；2 比利时根特大学兽医学院内科系；3 noHow，比利时；4 荷兰埃因霍温；5 现地址：荷兰 Lintjeshof 要点： 安装了人工智能 (AI) 系统的三个比利时母猪养殖场（A、B 和 C）被用于研究这种 AI 系统是否有助于优化授精时机。 在农场 A，实施人工授精系统后，所有评估参数都显著改善（分娩率 + 4.3%、重复配种率 - 3.75%、首次授精后分娩率 + 6.2%、每窝产仔数 + 1.06 头）。 在农场 B，实施人工授精系统前后唯一具有统计学意义的差异是每窝产仔数（-0.48 头），而在农场 C，这一参数显著增加了 0.45 头。 简介 母猪发情检测对于预测最佳授精时机至关重要。在商业养殖场，农民通常根据母猪的行为迹象通过视觉检测发情。然而，这些迹象在母猪之间差异很大，而且发情持续时间很难提前预测。因此，每次发情进行多次授精以优化生育结果是一种方法。这种策略既费时又会产生额外成本。如今，已经开发出使用连接传感器和摄像头来持续监测行为数据的技术创新来检测母猪的发情。随后，人工智能（AI）系统对收集到的行为数据进行分析。这项研究调查了这种人工智能系统是否可以帮助生产者优化授精时机和繁殖性能。材料和方法安装了人工智能系统（SmaRt Sow Breeding (SSB)）的三个比利时商业母猪农场（A、B 和 C）参与了这项研究。SSB 系统通过安装在母猪上方箱子上的摄像头持续收集繁殖单元中每头母猪的行为数据。该算法使用收集到的母猪活动模式来预测每头母猪的最佳授精时机，并在用户界面上显示授精请求。建议使用该系统的农民：1）每天用诱捕公猪进行一次发情检测，并指明进行发情检测的时间； 2）每天最多给母猪喂食两次，并在固定的时间喂食，使系统能够区分与进食相关的行为和与发情相关的行为；3）尽可能保持授精装置安静，以将母猪表现出与发情无关的任何异常行为的风险降到最低，并使系统更容易检测到发情信号。该系统设计用于断奶母猪，而不是母猪，因为它们的行为变化太大，难以可靠地评估。因此，本研究未包括母猪的表现。在参与研究的三个农场中，包括了实施该系统之前 1.5 年和之后 1.5 年的生殖周期（n = 6717）。参数包括：（1）分娩率（FR），（2）重复繁殖者百分比（RB），（3）第一次授精后的分娩率（FRFI）和（4）每窝总产仔数（NTBP）。此外，还分析了系统收集的数据以描述断奶至发情间隔 (WEI)、发情持续时间 (ED) 和每次发情的授精次数。该数据集包括在农场 B 和 C 收集的 2261 个周期。结果与讨论在农场 A，所有参数均显著改善，即 FR + 4.3%、RB - 3.75%、FRFI + 6.2% 和 NTBP + 1.06 头仔猪。在农场 B，NTBP 显著下降，为 0.48 头仔猪，但该农场的授精剂量较低（每剂 0.8 × 10 9 个精子）。在农场 C，实施该系统后，只有 NTBP 显著增加，为 0.45 头仔猪。系统确定的 WEI 在 78 到 90 小时（h）之间变化，比农民确定的 WEI 短 10-20 小时。系统确定的 ED 范围为 48 至 60 小时，与农民评估的 ED 相比变化较小。在农场 B，只有 NTBP 的差异具有统计学意义，即 - 0.48 头仔猪。FR 和 FRFI 有所改善，而 RB 有所增加（p > 0.05）。农场 B 每次发情的平均授精次数随时间保持相似，而农场 C 每次发情的平均授精次数随时间从大约 1.6-1.2 减少。这项研究表明，用于母猪发情检测的实时人工智能系统可以帮助农民确定最佳授精时机，如果使用得当，可以提高农场的繁殖性能。繁殖性能的总体结果是积极的，但由于农场管理的差异，每个农场的结果各不相同。除了正确的发情检测外，管理、遗传、饲料、健康状况和精子质量等其他因素对于增加成功受孕的机会也非常重要。这些因素可能在某种程度上影响了结果，例如，由于基因改良，产仔数增加。结论 AI 系统可以帮助农民提高繁殖性能、评估发情特征并减少每次发情的授精次数。由于农场管理、遗传学和授精剂量等许多其他变量也会影响繁殖性能，因此不同农场的结果可能有所不同。完整出版物可在 https://doi.org/10.1186/s40813‐023‐00303‐3 上找到。
Hemicell XT产品手册
参考：1。Song，W.，Wang，G.，Chen，L。等。1995。“一种由水稻疾病抗性基因xa21编码的受体激酶样蛋白。”科学。270：1804-1806。2。Beutler，B.，Jiang，Z.，Georgel，P。等。2006。“宿主电阻的遗传分析：通行器样受体信号传导和免疫力。”安努。修订版免疫。24：353-389。3。Ausubel，F。2005。“植物和动物的先天免疫信号通路是否保守？”自然免疫。6（10）：973-979。4。Didierlaurent，A.，Simonet，M。和Sirard，J-C。 2005。“先天和获得肠道免疫系统的可塑性。”细胞和分子生命科学。62：1285-1287。5。Stahl，P。和Ezekowitz，R。1998。“甘露糖受体是涉及宿主防御的模式识别受体。” Curr。opin。免疫。10（1）：50-55。6。Spurlock，M.，1997年。“在免疫挑战期间的代谢和生长调节：细胞因子功能的概述。” J. Anim。SCI。 75：1773-1783。 7。 Gabler，N。和Spurlock，M.2008。 “将免疫系统与增长和效率的调节整合在一起。” J. Anim。 SCI。 86：E64-E74。 8。 Korver，D。2006。 “消化系统的免疫动力学概述。” J. Appl。 家禽res。 15：123-135。 9。 Klasing，K.2007。 poult。SCI。75：1773-1783。7。Gabler，N。和Spurlock，M.2008。“将免疫系统与增长和效率的调节整合在一起。” J. Anim。SCI。 86：E64-E74。 8。 Korver，D。2006。 “消化系统的免疫动力学概述。” J. Appl。 家禽res。 15：123-135。 9。 Klasing，K.2007。 poult。SCI。86：E64-E74。 8。 Korver，D。2006。 “消化系统的免疫动力学概述。” J. Appl。 家禽res。 15：123-135。 9。 Klasing，K.2007。 poult。86：E64-E74。8。Korver，D。2006。“消化系统的免疫动力学概述。” J. Appl。家禽res。15：123-135。9。Klasing，K.2007。poult。“营养和免疫系统。” br。SCI。 48（5）：525-537。 10。 Daskiran，M.，Teeter，R.，Fodge，D。和Hsiao，H.2004。 “对β-d-甘露酶Hemicell™的评估对β-甘露含量不同的饮食中肉鸡性能和能量使用的影响。”家禽科学。 83：662-668。 11。 Poulsen，K。Hemicell对44种经验分析的肉鸡中肠道健康的影响。 文件中的数据。 12。 Vangroenweghe，F.，Poulsen，K。＆Thas，O。补充β-甘露酶酶在替代饮食中降低了在仔猪中使用后腹泻和抗生素的使用，并使用额外的大豆粉减少。 PORC Health Manag 7，8（2021）。 https://doi.org/10.1186/s40813-021-00191-5（ref-13331）13。 H.-Y.，Anderson，D.M。，Jin，F.L。和Mathis，G.F。 2004。 “β-甘露酶（Hemicell®）在感染坏死肠炎的肉鸡中的功效。 国际家禽科学论坛，摘要120，南部鸟类疾病会议。 14。 Vangroenweghe，F。＆Poulsen，K。2020。 在有挑战性的蛋白质来源的情况下，β-甘露酶酶的Hemicell HT（一种β-甘露酶）的应用恢复了断奶后的仔猪的性能。 文件中的数据。 15。 Elanco试用号Elade140114。 2014。 在德国肉鸡整合中，在商业条件下对Hemicell-L的结果分析。 文件中的数据。 16。 Lee，J。，Bailey，C。和Cartwright，A。 2003。 82：1925-1931。 17。 ©2023 Elanco或其分支机构。SCI。48（5）：525-537。10。Daskiran，M.，Teeter，R.，Fodge，D。和Hsiao，H.2004。“对β-d-甘露酶Hemicell™的评估对β-甘露含量不同的饮食中肉鸡性能和能量使用的影响。”家禽科学。83：662-668。11。Poulsen，K。Hemicell对44种经验分析的肉鸡中肠道健康的影响。文件中的数据。12。Vangroenweghe，F.，Poulsen，K。＆Thas，O。补充β-甘露酶酶在替代饮食中降低了在仔猪中使用后腹泻和抗生素的使用，并使用额外的大豆粉减少。PORC Health Manag 7，8（2021）。https://doi.org/10.1186/s40813-021-00191-5（ref-13331）13。H.-Y.，Anderson，D.M。，Jin，F.L。和Mathis，G.F。 2004。 “β-甘露酶（Hemicell®）在感染坏死肠炎的肉鸡中的功效。 国际家禽科学论坛，摘要120，南部鸟类疾病会议。 14。 Vangroenweghe，F。＆Poulsen，K。2020。 在有挑战性的蛋白质来源的情况下，β-甘露酶酶的Hemicell HT（一种β-甘露酶）的应用恢复了断奶后的仔猪的性能。 文件中的数据。 15。 Elanco试用号Elade140114。 2014。 在德国肉鸡整合中，在商业条件下对Hemicell-L的结果分析。 文件中的数据。 16。 Lee，J。，Bailey，C。和Cartwright，A。 2003。 82：1925-1931。 17。 ©2023 Elanco或其分支机构。H.-Y.，Anderson，D.M。，Jin，F.L。和Mathis，G.F。 2004。“β-甘露酶（Hemicell®）在感染坏死肠炎的肉鸡中的功效。国际家禽科学论坛，摘要120，南部鸟类疾病会议。14。Vangroenweghe，F。＆Poulsen，K。2020。在有挑战性的蛋白质来源的情况下，β-甘露酶酶的Hemicell HT（一种β-甘露酶）的应用恢复了断奶后的仔猪的性能。文件中的数据。15。Elanco试用号Elade140114。2014。在德国肉鸡整合中，在商业条件下对Hemicell-L的结果分析。文件中的数据。16。Lee，J。，Bailey，C。和Cartwright，A。 2003。 82：1925-1931。 17。 ©2023 Elanco或其分支机构。Lee，J。，Bailey，C。和Cartwright，A。2003。82：1925-1931。17。©2023 Elanco或其分支机构。“β-甘露酶可以改善饲喂瓜尔菌和船体级分的肉鸡生长抑郁症。”家禽科学。Hemicell Emea Field Experience Elanco UK AH Limited，一楼，表格2，Bartley Way，Bartley Wood商业公园，Hook RG27 9XA。电话：01256 353131电子邮件：elancouk@elanco.com Hemicell，Elanco和对角线徽标是Elanco或其分支机构的商标。准备日期：04/2023 PM--UK-21-0567
细小病毒（感染）
据报道，家养野猪群中存在由 PPV1 引起的生殖障碍（例如流产、死胎）。在家养猪中，该病毒会导致猪出现生殖疾病，其特征是死产、木乃伊胎、胚胎死亡和不育（SMEDI）。一窝中可能生出活胎和木乃伊胎。这些生殖障碍在母猪中比在母猪中更常见。成年猪通常不会出现临床症状。它们很少出现皮肤病变和腹泻。PPV1 在扁桃体和口鼻腔中复制，然后进入淋巴系统。大约 15 天后，病毒穿过胎盘感染胎儿。然而，尚未发现 PPV1 会感染胎盘本身。感染 PPV1 的未接种疫苗的猪群可能会经历流产风暴。初乳中的母体抗体赋予仔猪免疫力。成年猪必须血清阴性才能传播病毒。还有其他猪细小病毒（例如 PPV2-7）不会引起临床症状。
美国猪肉的基因编辑和免疫去势
动物农业行业正在通过创新技术和衡量动物福利的新方法来满足消费者对改善农场动物福利条件日益增长的兴趣。在猪肉行业，消费者对动物福利的兴趣体现在最近密歇根州、佛罗里达州和加利福尼亚州的立法措施中，这些措施旨在消除母猪的圈养做法，以及其他运动（Videras，2006 年；Tonsor、Wolf 和 Olynk，2009 年；Smithson 等人，2014 年；Ortega 和 Wolf，2018 年）。除了改善生活条件外，动物福利的改善还包括消除动物一生中可能带来痛苦的常规程序。虽然这些程序通常是为了工人和动物的安全或确保最终产品质量而必需的，但这些程序越来越多地被新生物技术所解决。美国猪肉行业对雄性仔猪的常规阉割就是一个例子。阉割是一种通常不使用麻醉剂进行的手术，可以防止雄性性成熟。这可以消除肉中雄烯酮和粪臭素化合物的自然沉积和累积，这些化合物会影响猪肉产品质量，并产生强烈、难闻的气味和异味，即所谓的“猪肉
近期关于减少公猪异味作为阉割替代方法的基因研究进展：综述
摘要 公猪异味是公猪肉中一种难闻的气味，主要由沉积在脂肪组织中的雄烯酮、粪臭素和吲哚引起。仔猪阉割是防止公猪异味的最常见做法。然而，出于动物福利方面的考虑，阉割很可能在几年内被禁止。人们已经评估了阉割的替代方法，例如基因选择。雄烯酮和粪臭素具有中等到高的遗传力，这使得选择这些化合物成为可能。本综述介绍了在防止公猪异味的基因选择、与其他性状的相关性、品种差异以及与公猪异味相关的候选基因方面获得的最新成果。据报道，雄烯酮和粪臭素的 QTL 主要位于 6、7 和 14 号染色体上。据报道，这些染色体含有负责雄烯酮和粪臭素合成和降解的基因。人们已经做了大量的工作来寻找可用于选择具有较低膻味的动物的标记或基因。选择膻味会降低某些繁殖性状的表现。然而，选择膻味对生产性状有良好的反应。选择结果表明，在几代中减少膻味是可能的。此外，饮食和环境条件的改变可能与减少膻味的基因选择有关。然而，测量和选择膻味的成本应该得到市场的奖励；否则，很难实施基因选择。
益生菌枯草芽孢杆菌MB40改善了李斯特氏病猪模型的免疫力
摘要：人类的益生菌和牲畜的直接喂养微生物是支持免疫力的越来越流行的饮食成分。这项研究的目的是确定饮食中枯草芽孢杆菌MB40（MB40）对饮食源性病原体单核细胞增生李斯特菌（LM）挑战的仔猪免疫的影响。三周大的小猪（n = 32）随机分配给四组：（1）基础饮食，（2）具有LM挑战的基础饮食，（3）MB40补充的饮食和（4）MB40供应LM挑战的MB40饮食。在整个14天（d）期间提供实验饮食。在D8上，第2和4组中的小猪在每只小猪的10 8 CFU/mL下用LM接种。血液样品，以进行生化和免疫反应培养。在D15上对动物进行安乐死，并在D15上进行肿瘤和脾脏的细菌计数和肠形态分析。在D15时，LM挑战与脾脏的体重增加（P = 0.017），中性粒细胞的循环种群更大（P = 0.001）和单核细胞（P = 0.008）以及与非接收器的对照组相比，卵形绒毛的高度与隐层深度比（P = 0.009）有关。MB40补充剂分别降低了肝脏和脾脏的LM细菌计数，分别降低了67％（P <0.001）和49％（P <0.001）（P <0.001）。MB40补充也与循环浓度的单核细胞降低有关（p = 0.007）。总的来说，这些数据表明补充MB40是一种安全且耐受性良好的方法，可增强全身性李斯特菌感染期间的免疫力。
Poria Cocos多糖对断奶小猪的生长性能，免疫和盲肠菌群组成的影响
摘要：本文旨在将Poria Cocos多糖（PCP）鉴定为用于猪生产的潜在饲料添加剂；因此，我们探讨了pcp的不同饮食纳入水平对断奶仔猪中生长性能，免疫力和盲肠微环形组成的影响。为此，将总共120天大的杜罗克×兰德拉斯×约克郡断奶小猪（8.51±0.19 kg; 28±1天）随机分配给五组，这些群体被喂食，并补充了基础饮食，并补充了0，0.025％，0.025％，0.05％，0.05％，0.1％，0.1％，0.2％和0.2％，相应地相应地相应地相应地相应地相应地相应地相应。结果表明，PCP治疗组的平均每日增益（ADG）和增益率高于对照组，具有线性效应。IgG，IgA，IL-2，IFN-γ，CD4 + T细胞的数量以及CD4 + -CD8 + T细胞比率（CD4 + /CD8 +）的血清浓度增加，而在PCP补充组中，IL-6和TNF-α的水平降低了。此外，细胞因子mRNA表达水平在脾中表现出相似的趋势。PCP补充还减少了大肠杆菌和沙门氏菌的丰度，并增强了塞库姆乳酸杆菌和双杆菌的丰富度。总而言之，饮食PCP纳入对小猪的生长性能，免疫力和盲肠菌群产生了积极的影响，并显示出用作提高断奶小猪健康状况的饲料添加剂的潜力，其中0.1％是最佳剂量。