海军建设有潜力成为真正的顶级部门。很多国家都是发展中国家,想要保护自己的利益,看看很多亚洲、非洲、南美国家。为此,他们需要荷兰海军工业可以提供的海军舰艇,并且许多荷兰人可以通过这些舰艇过上美好的生活。政府政策科学委员会最近得出的结论是,荷兰作为一个航海国家,可以进一步加强其海军,从而推动海事部门的发展。达门海军造船厂建造了这些船只,但它们配备了许多其他荷兰公司的设备,例如阅读本期有关 Sycamore 的文章。这艘澳大利亚海军训练舰实际上是荷兰海军建设 400 年来的产物,这个行业必须不断地进行自我改造和更新。但正如经常发生的那样,海军建设再次面临陷入深谷的危险,大量知识和经验正在流失。直到婴儿和洗澡水一起被倒掉,这个行业必须以大量学费为代价来重建,因为事实证明世界和荷兰都离不开海军舰艇。新建造的投资已被大幅减少和推迟,以至于现在在某些领域的知识和经验太少,无法独立建造某些船舶。如果没有国外的专业知识,就不可能再建造新的潜艇。如果不及时投资皇家海军的其他舰艇,例如护卫舰、护卫舰和反水雷舰,在某些时候,我们在海军建设中所剩下的知识和经验将会流失。所以需要投资。现在经济再次表现良好,额外的资金正在流入政府的金库。同时投资海军建设,使该部门也有机会成长为顶级部门。
1. 将 5 ml 血液收集到含有 EDTA 的真空采血管 (Becton Dickinson) 中并混合。2. 用溶液 1 (10 mM Tris pH 7.6;10 mM KCl;10 mM MgCl2) 定容至 10 ml。3. 加入 120 μl Nonidet P40 (BDH) 以裂解细胞。颠倒几次以充分混合。4. 以 2000 rpm 的速度旋转核沉淀 10 分钟。5. 倒出上清液,不要移出沉淀。沉淀可以冷冻保存。6. 将沉淀轻轻地重新悬浮在 800 μl 溶液 2 (10 mM Tris pH 7.6;10 mM KCl;10 mM MgCl2;0.5 M NaCl;0.5% SDS;2 mM EDTA) 中。溶液 2 会裂解细胞核,所以要小心不要剪切 DNA。转移到 1.5 ml 的微量离心管中。7. 加入 400 μl 蒸馏苯酚(饱和于 1 M Tris pH 8.0)并混匀。8. 以 12000 rpm 的速度离心 1 分钟。将上层相转移到干净的微量离心管中。不要担心转移少量界面。9. 加入 200 μl 苯酚和 200 μl 氯仿:异戊醇(24:1)。颠倒混匀。10. 以 12000 rpm 的速度旋转 1 分钟。将上层相转移到干净的微量离心管中。11. 加入 700 μl 氯仿:异戊醇并按上述方法提取。12. 将上层水相转移到一个小的干净容器中。避免去除界面。加入 2 倍体积的冰冷乙醇并混合以沉淀 DNA*。 13. 使用密封的吸液管尖端将 DNA 纤维转移到含有 1 ml 70% 乙醇的微量离心管中。充分混合以清洗 DNA。14. 全速旋转 5 分钟。倒掉乙醇并在真空吸尘器中干燥沉淀物。在 65°C 的无菌水中重新悬浮 DNA。不要过度干燥基因组 DNA,否则将很难重新悬浮。