腺苷到肌苷 (A-to-I) 编辑是一种保守的真核 RNA 修饰,有助于发育、免疫反应和整体细胞功能。RNA 编辑模式在不同细胞和组织类型之间可能存在显著差异,而过度活跃的 A-to-I 特征则表明存在多种疾病,包括癌症和自身免疫性疾病。由于这些差异具有生物学和临床重要性,因此迫切需要有效的方法来测量细胞 RNA 中的整体 A-to-I 编辑水平。当前的标准方法依赖于 RNA-seq 来间接检测编辑位点,这需要大量时间和材料投入以及大量的计算分析。在这里,我们利用核酸内切酶 V (EndoV)(它特异性地与 RNA 中的肌苷结合)来开发基于蛋白质的化学发光生物测定法,以直接分析 A-to-I RNA 编辑活性。我们之前展示了 EndoV 可以在 RNA 测序之前结合并丰富 A-to-I 编辑的转录本,现在我们利用这一活性构建 EndoV 连接免疫吸附测定 (EndoVLISA),作为一种快速的、基于板的化学发光方法,用于测量细胞 RNA 中的全局 A-to-I 编辑特征。我们首先使用化学合成的寡核苷酸优化和验证我们的测定方法,说明对 RNA 中的肌苷具有高度选择性和灵敏度的检测。然后,我们展示了对处理过的细胞系中肌苷含量的快速检测,证明了与当前标准 RNA 测序方法相当的性能。最后,我们部署了 EndoVLISA 来分析正常和患病人体组织中的差异 A-to-I RNA 编辑特征,说明了我们的平台作为诊断生物测定的实用性。总之,EndoVLISA 方法经济高效、简单易用,并且使用常见的实验室设备,为研究 A-to-I 编辑提供了一种高度可用的新方法。此外,多孔板格式使其成为第一个适用于直接高通量量化 A-to-I 编辑的检测方法,可用于疾病检测和药物开发。
B. 血清学检测:常规接种疫苗后,无需进行接种后血清学免疫检测。对于后续临床管理取决于了解其免疫状态的人以及可能需要重新接种疫苗的人,例如 HIV 感染者和其他免疫功能低下的人(例如,HCT 和实体器官移植接受者和接受化疗的人),建议在接种疫苗后至少一个月检测抗 HAV 抗体的存在。
癌症是一种由基因突变,表观遗传变化以及与免疫微环境不断发展的相互作用驱动的多方面疾病(1)。肿瘤细胞通常会发展出逃避免疫检测并促进免疫抑制的机制(2)。尽管最近在癌症免疫疗法方面取得了突破,但可以预测治疗结果并提供更多靶向治疗的新型生物标志物和机制的鉴定仍然是一个显着的挑战(3)。肿瘤免疫联系封装了肿瘤细胞与各种免疫细胞之间的相互作用,包括T细胞,巨噬细胞,树突状细胞和天然杀伤细胞(4)。这些相互作用对于确定免疫系统识别和消除肿瘤细胞的能力至关重要。这个复杂的生态系统提供了治疗机会和挑战。
• Lumit 免疫测定细胞系统是一种均质生物发光免疫测定,它将免疫检测与酶亚基互补相结合,可直接在细胞裂解物中测量目标分析物 • 蛋白质磷酸化检测:Lumit 免疫测定能够快速、无需清洗地检测激酶信号通路(如 RAS-MAPK/ERK)中的磷酸化,以进行抑制剂评估和分析 • 靶向蛋白质降解 (TPD):Lumit 免疫测定能够有效分析多种细胞系中 PROTAC 介导的蛋白质降解,支持靶向激酶降解 • 高通量筛选 (HTS):Lumit 免疫测定针对可扩展的 HTS 进行了优化,能够有效筛选 384 孔和 1536 孔格式的激酶途径调节剂
结果:在亲戚中,21个祖细胞[43.7岁(IQR:38.1 - 47.7)]和27个兄弟姐妹[7.6岁(IQR:5.8 - 16.1)]具有阳性的自身抗体。在5年的中位数为54.2%(95%CI:39.2% - 68.6%)的中位数为5年(IQR:3.6 - 8.7;范围为0.9至22.6岁)。与更快的T1D发展相关的风险因素是多次自身免疫性,自身免疫检测时<20年。具有多种自身抗体的年轻亲戚(<20年)的累积风险为5年,患糖尿病为52.9%(95%CI:22.1% - 71.6%),20年风险为91.2%(95%CI:50.5% - 98.4%)。如果仅满足一个危险因素,而20年的风险降至59.9%(95%CI:21.9% - 79.5%),如果相对年龄在20岁以上,则只有一个自身抗体。
. 乙肝:初级疫苗接种系列(3 种疫苗,间隔 0、1 和 6 个月),加上初级系列完成后≥ 1 个月的血清免疫证明(抗 HBs ≥ 10 IU/L)。如果两种疫苗接种完成,并且第 3 种疫苗的血清免疫检测符合标准免疫计划,则疫苗系列可以在 MWF 150 入学年进行。在进入 MWF 121 之前,应提交疫苗#3 和血清免疫证明的证据,并提交安置要求。如果在完成两个初级系列后仍无免疫证明,学生应确认对无反应状态的认识和教育。. 麻疹、腮腺炎、风疹和水痘:12 个月大后至少间隔四周接种两次疫苗(一种风疹疫苗是可以接受的) - 或 - 血清免疫证明(IgG 抗体)。3. 结核病 (TB) :
医生提供疫苗接种或实验室确认疾病/免疫力证明。对于 1957 年之前出生且未接种疫苗的个人,对于那些没有实验室疾病证据或对麻疹和/或腮腺炎免疫力的人,应考虑接种 2 剂 MMR 疫苗。对于那些同样没有实验室疾病证据或对风疹免疫力的人,应考虑接种一剂 MMR 疫苗。c. 如果我拥有上述疫苗接种证明,是否需要滴度来确定免疫力?不建议进行血清学免疫检测,但如果检测结果对麻疹、腮腺炎和/或风疹呈阴性或不明确,则应被视为具有对麻疹、腮腺炎和/或风疹免疫力的推定证据,不需要额外的 MMR 剂量。d. 我得过麻疹(或腮腺炎或风疹),但从未接种过疫苗。我该怎么办?你应该
病原体被定义为一种传染性微生物或病原体,其中病毒和细菌是临床上最常见的(Casadevall and Pirofski,2002)。这些病原体具有高度可进化性、致病性和迅速传播性,对人类健康构成严重威胁。微生物控制计划越来越多地被全社会采用,以降低消费者感染的风险。细菌培养法因其在常见实验室实验中的稳健性而被广泛认为是病原体检测的“金标准”。然而,它具有耗时、费力和检测效率低等缺点,这严重阻碍了其在临床上的广泛使用。另一种方法是免疫检测,它基于特异性抗体对抗原的识别和结合(Kohl and Ascoli,2017)。虽然它在检测病原微生物方面具有速度快、简单、特异性强等优势,但需要较长的抗体制备时间,检测灵敏度也较低。核酸检测技术与上述方法不同,能够同时满足病原体检测的准确性、快速性和灵敏度的要求,在保障人类安全方面更显优越性。
生物药物免疫疗法的出现彻底改变了癌症和自身免疫性疾病的治疗。然而,在某些患者中,抗药抗体 (ADA) 的产生会阻碍药物的疗效。ADA 的浓度通常在 1-10 pm 范围内;因此它们的免疫检测具有挑战性。针对用于治疗类风湿性关节炎和其他自身免疫性疾病的药物英夫利昔单抗 (IFX) 的 ADA 是焦点。报道了一种双极电解质门控晶体管 (EGT) 免疫传感器,该传感器基于还原氧化石墨烯 (rGO) 通道和与栅极结合的 IFX 作为特定探针。rGO-EGT 易于制造并具有低电压操作(≤ 0.3 V)、15 分钟内稳健的响应和超高灵敏度(检测限为 10 am)。提出了基于 I 型广义极值分布的整个 rGO-EGT 传递曲线的多参数分析。结果表明,即使在拮抗剂肿瘤坏死因子 α (TNF- 휶 )(IFX 的天然循环靶点)同时存在的情况下,该方法也可以选择性地量化 ADA。
DNA 梳理和 DNA 扩散是研究全基因组 DNA 复制叉动态的两种主要方法,它们将标记的基因组 DNA 分布在盖玻片或载玻片上进行免疫检测。DNA 复制叉动态的扰动会对前导链或滞后链的合成产生不同的影响,例如,在复制被两条链中的一条上的病变或障碍物阻断的情况下。因此,我们试图研究 DNA 梳理和/或扩散方法是否适合在 DNA 复制过程中分辨相邻的姐妹染色单体,从而能够检测单个新生链内的 DNA 复制动态。为此,我们开发了一种胸苷标记方案来区分这两种可能性。我们的数据表明,DNA 梳理可以分辨姐妹染色单体,从而可以检测链特异性改变,而 DNA 扩散通常不能。这些发现在从这两种常用技术获得的数据解释 DNA 复制动态时具有重要意义。