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World File Search System免疫荧光
Amani Wehbi，Eric J. Kremer，IriaGonzálezDopesoReyes。成人
Coxsackievievirus和腺病毒受体（CAR）是单个跨膜细胞粘附分子（CAM）。汽车在包括大脑，心脏，肺和睾丸在内的许多哺乳动物组织中表达。在上皮细胞中，CAR函数是众多CAM的典型作用的典型代表。然而，在大脑中，汽车的多个角色了解不足。更好地了解汽车在成人大脑中的生理作用，表征其位置是提高我们对其功能知识的原始步骤。此外，CAR还负责犬腺病毒2（CAV-2）载体的附着，内部化和逆行运输，这些载体在神经元电路的映射和基因转移中发现了一个细分市场，以治疗和对神经退行性疾病进行建模。在这项研究中，我们使用免疫组织化学和免疫荧光来记录汽车在健康的年轻小鼠大脑中的全球位置。在全球范围内，我们发现汽车是通过脑实质中的成熟和成熟的神经元表达的，位于躯体和投影上。虽然CAR偶尔与神经胶质酸性蛋白共定位，但该重叠仅限于与成人神经发生相关的区域。
肽介导的靶向输送系统朝着三重阴性乳腺癌治疗
2018年估计妇女中约有210万名新诊断的乳腺癌病例。三重阴性乳腺癌（TNBC），其特征是缺乏激素受体（雌激素和孕激素），缺乏表皮生长因子受体2和预后不良的表达，代表所有乳腺癌的10-20％。因此，这种类型的乳腺癌的新生物标志物的鉴定与早期诊断高度相关。此外，TNBC肽配体可用于设计专门针对这种乳腺癌的强大药物输送系统。因此，以下研究旨在选择和表征新型肽的新肽，用于乳腺癌鼠类乳腺癌细胞系-4T1。使用噬菌体显示，将7和12个氨基酸随机肽库筛选在4T1细胞系上。进行了四轮，加上使用3T3鼠成纤维细胞系的反选择。表征了富集的选择性肽，并通过免疫荧光和流式细胞仪分析证实了其与4T1组织样品的结合能力。所选肽（4T1PEP1 - CPTASNTSC和4T1PEP2 -EVQSSKFPAHVS）在几轮选择中富集，并表现出特定的与4T1细胞系的结合。
DNA修复的全基因组分析标识更高 -
（a）实验设置和集成的概述。（b）1p染色体上的信号。左：在 +DSB条件下的单细胞热图（RPKM），其顶部为 +DSB（有色）和–DSB（灰色）条件的单细胞聚集体。右：带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi主题用黑线注释，红色三角形表示经常裂解（或“顶部”）位点。（c）所有修复频率≥10％的ASISI位点的条形图，每个位点的修复频率（目标蛋白质和方法）颜色为颜色。通过增加绝对修复频率（即任何数据集中的最高频率）来订购（在X轴上）。每个站点，通过增加每个数据集的维修频率（前后；即未堆叠栏）来排序条。底部水平条表示先前的（缺乏）注释作为顶部位点。（d）一个代表性核的共聚焦图像显示DAPI，RAD51 DAMID M6 A-TRACER和内源性γH2AX免疫荧光染色。（e）信号共定位（Manders的A和B每个核）的定量，n = 33核。
通过使用纳米抗体识别的表位标签实现果蝇蛋白质的可视化和操控
摘要 扩大可用于蛋白质可视化和操作的试剂库将有助于了解其功能。与目标蛋白质相连并被现有结合剂（如纳米抗体）识别的短表位标签有助于进行蛋白质研究，因为无需分离针对它们的新抗体。纳米抗体比传统抗体有几个优势，因为它们可以表达并用作体内蛋白质可视化和操作的工具。在这里，我们描述了两个短（<15aa）纳米标签表位 127D01 和 VHH05，以及它们相应的高亲和力纳米抗体。我们展示了它们在果蝇体内蛋白质检测和重新定位、直接和间接免疫荧光、免疫印迹和免疫沉淀中的应用。我们进一步表明，CRISPR 介导的基因靶向提供了一种用纳米标签标记内源性蛋白质的直接方法。纳米标签的单个副本，无论其位置如何，都足以进行检测。这种多功能且经过验证的标签和纳米抗体工具箱将作为广泛应用的资源，包括果蝇及其他物种的功能研究。
全基因组的DNA修复蛋白分析鉴定单细胞中的高阶配位
a，实验设置和集成的概述。b，染色体1p上的信号。左：在 +DSB条件下的单细胞热图（RPKM），其顶部为 +DSB（有色）和–DSB（灰色）条件的单细胞聚集体。右：带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi图案，用黑线注释，红色三角形表示经常裂解（或“顶部”）位点。c，所有ASISI位点的条形图≥10％，每个位点的修复蛋白频率（靶蛋白和方法）都有颜色。通过增加绝对修复蛋白频率（即，任何数据集中的最高频率）。每个站点，通过增加每个数据集的修复蛋白频率（即前后；即未堆叠）来排序条。底部水平条表示先前的（缺乏）注释作为顶部位点。d，一个代表性核的共聚焦图像，显示DAPI，RAD51 DAMID M6A-Tracer和内源性γH2AX免疫荧光染色。e，信号共定位的定量（manders的a和a和b每个核），n = 33核。
全基因组的DNA修复蛋白分析鉴定单细胞中的高阶配位
a，实验设置和集成的概述。b，染色体1p上的信号。左：在 +DSB条件下的单细胞热图（RPKM），其顶部为 +DSB（有色）和–DSB（灰色）条件的单细胞聚集体。右：带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi图案，用黑线注释，红色三角形表示经常裂解（或“顶部”）位点。c，所有ASISI位点的条形图≥10％，每个位点的修复蛋白频率（靶蛋白和方法）都有颜色。通过增加绝对修复蛋白频率（即，任何数据集中的最高频率）。每个站点，通过增加每个数据集的修复蛋白频率（即前后；即未堆叠）来排序条。底部水平条表示先前的（缺乏）注释作为顶部位点。d，一个代表性核的共聚焦图像，显示DAPI，RAD51 DAMID M6A-Tracer和内源性γH2AX免疫荧光染色。e，信号共定位的定量（manders的a和a和b每个核），n = 33核。
全基因组的DNA修复蛋白分析鉴定单细胞中的高阶配位
（a）实验设置和集成的概述。（b）1p染色体上的信号。左：在 +DSB条件下的单细胞热图（RPKM），其顶部为 +DSB（有色）和–DSB（灰色）条件的单细胞聚集体。右：带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi主题用黑线注释，红色三角形表示经常裂解（或“顶部”）位点。（c）所有修复频率≥10％的ASISI位点的条形图，每个位点的修复频率（目标蛋白质和方法）颜色为颜色。通过增加绝对修复频率（即任何数据集中的最高频率）来订购（在X轴上）。每个站点，通过增加每个数据集的维修频率（前后；即未堆叠栏）来排序条。底部水平条表示先前的（缺乏）注释作为顶部位点。（d）一个代表性核的共聚焦图像显示DAPI，RAD51 DAMID M6 A-TRACER和内源性γH2AX免疫荧光染色。（e）信号共定位（Manders的A和B每个核）的定量，n = 33核。
荣誉与硕士项目2025
无结核分枝杆菌感染的发生率一直在全球范围内稳步增加。脓肿（M.腹部）可能引起看似健康的个体和慢性肺部疾病患者的肺部感染，例如囊性纤维化，支气管扩张和肺气肿。这是令人关注的，因为由于抗生素耐药性，对这些感染的治疗很困难。迫切需要了解肺中脓肿感染的发病机理。肺上皮是针对吸入病原体的第一道防线。然而，迄今为止，关于超级脓肿如何感染这些细胞的细胞几乎没有理解。该项目将使用新颖的诱导性型干细胞（IPSC）衍生的肺上皮细胞平台来解决这一知识差距。该项目将首次建立IPSC衍生的肺上皮细胞的脚菌感染模型，并表征细胞对感染的反应。这将包括确定细菌载荷（例如，菌落形成测定，免疫荧光细菌的成像），并阐明宿主对感染的先天反应（例如，细胞因子阵列，单细胞RNA-SEQ）以识别针对Lung lung的新型治疗靶标。
全基因组的DNA修复蛋白分析鉴定单细胞中的高阶配位
a，实验设置和集成的概述。b，染色体1p上的信号。左：在 +DSB条件下的单细胞热图（RPKM），其顶部为 +DSB（有色）和–DSB（灰色）条件的单细胞聚集体。右：带有覆盖MSR调用的单细胞线图。asisi图案，用黑线注释，红色三角形表示经常裂解（或“顶部”）位点。c，所有ASISI位点的条形图≥10％，每个位点的修复蛋白频率（靶蛋白和方法）都有颜色。通过增加绝对修复蛋白频率（即，任何数据集中的最高频率）。每个站点，通过增加每个数据集的修复蛋白频率（即前后；即未堆叠）来排序条。底部水平条表示先前的（缺乏）注释作为顶部位点。d，一个代表性核的共聚焦图像，显示DAPI，RAD51 DAMID M6A-Tracer和内源性γH2AX免疫荧光染色。e，信号共定位的定量（manders的a和a和b每个核），n = 33核。
赖氨酸乙酰转移酶Kat8
摘要：KAT8是一种赖氨酸乙酰转移酶，主要催化组蛋白H4（H4K16）的Lys16的乙酰化。KAT8失调与许多癌症类型的发展和转移有关，包括非小细胞肺癌（NSCLC）和急性髓样白血病（AML）。到目前为止，很少有KAT8抑制剂报道，其中没有一个显示选择性活动。基于KAT3B/KDAC抑制剂C646，我们开发了一系列N-苯基-5-吡唑酮衍生物，并将化合物19和34鉴定为低微摩尔KAT8抑制剂在KAT和KDAC面板上选择性的低微球Kat8抑制剂。Western印迹，免疫荧光和CETSA实验表明，这两种抑制剂均选择性地靶向细胞中的Kat8。19和34在包括NSCLC和AML在内的不同癌细胞系中表现出Microl摩尔抗增生活性，而不会影响非转化细胞的生存能力。总体而言，这些化合物是阐明Kat8生物学的宝贵工具，它们的简单结构使它们成为有希望的未来优化研究的候选人。