N-MYC基因被认为在细胞生长或分化过程中具有潜在的作用,但尚未阐明其特定功能。N-MYC基因是细胞癌基因的MYC家庭成员,其中还包括C-MYC和L-MYC基因(1)。所有这三个基因都具有共同的特征,例如相似的组织,蛋白质编码序列中的广泛同源性块,能够与活化的Ras癌基因(4、14、20、26、28)一起转化原代大鼠胚胎成纤维细胞,以及编码蛋白质的核定位(8、17、23、23、26)。另一方面,每个MYC基因在发育阶段或组织指定性方面和某些高度不同的蛋白质编码区域都有不同的表达模式,这表明具有独特的功能作用(7,10,30)。c-myc的表达,而n-myc和l-myc的表达更为限制(30)。在产前发育期间,N-MYC在许多组织中表达,脑和肾脏水平最高。从大多数成年组织中表达戏剧性下降(10,30)。MYC基因表达已针对B淋巴细胞分化进行了详细研究(15、30)。C-MYC和N-MYC的表达发生在正常和转化的precur- sor(PRE)-B细胞中,但是N-MYC表达停止了,而当Pre-B细胞获得表面受体并分化为B细胞时,C-MYC表达仍在继续。这些发现表明,MYC家族基因的差异表达对于通过其分化途径的B淋巴样细胞的进展可能很重要(15、30)。研究MYC基因功能的一种方法是产生对表达失调的转基因动物。当征服主导性免疫球蛋白重链型三型增强子序列(E> i)时,所有MYC基因都会引起淋巴恶性肿瘤。代表表面免疫球蛋白阳性B细胞的转基因EP.-N-MYC肿瘤表达一些B级基因;这种不适当的基因表达可能是由于N-MYC表达放松的(6,15)引起的。 作为研究N-MYC功能的一种替代和互补方法,我们应用了方法的最新进展来恢复培养的哺乳动物细胞,其中内源基因已与转染的同型>重新组合。代表表面免疫球蛋白阳性B细胞的转基因EP.-N-MYC肿瘤表达一些B级基因;这种不适当的基因表达可能是由于N-MYC表达放松的(6,15)引起的。作为研究N-MYC功能的一种替代和互补方法,我们应用了方法的最新进展来恢复培养的哺乳动物细胞,其中内源基因已与转染的同型>重新组合。
抽象的嘌呤能受体在中枢神经系统(CNS)中起重要作用。这些受体参与调节神经元,小胶质细胞和星形胶质细胞功能的细胞神经燃料反应。基于其内源配体,将嘌呤能受体分类为P1或腺苷,P2X和P2Y受体。在脑损伤或病理条件下,细胞外三磷酸腺苷(ATP)或尿苷三磷酸(UTP)从受损细胞中快速扩散,促进小胶质细胞的激活,从而导致这些受体在大脑中表达的变化。具有选择性正电子发射断层扫描(PET)放射性体的嘌呤能受体的成像,使我们对这些受体中某些受体在健康和患病的大脑中的功能作用有了我们的理解。在这篇综述中,我们已确保了当前可用的果虾能受体的PET放射线列表,这些PET受体用于阐明受体功能和参与中枢神经系统疾病。我们还审查了缺乏放射性示意剂的受体,为未来的新型PET放射性物体奠定了基础,以揭示这些受体在中枢神经系统疾病中的作用。
抽象的低度全身性炎症是动脉粥样硬化心血管疾病(CVD)的关键病理生理成分,髓样细胞的长期激活被认为对这些作用至关重要。肥胖和相关的代谢并发症,包括高血糖和血脂异常血症可诱导先天免疫细胞及其骨髓祖细胞的持久性重新编程,从而导致动脉粥样硬化。在这篇综述中,我们讨论了先天免疫细胞在其功能,表观遗传和代谢特征上发生长期变化的机制,即使短期暴露于内源配体,这一过程也称为“受过训练的免疫力”。对受过训练的免疫力的不当诱导导致单核细胞和巨噬细胞中长期持久的高弹性和促进性变化的发展,这是动脉粥样硬化和CVD的发展的重要因素。对特定免疫细胞的知识以及参与训练免疫的涉及的独特细胞内分子途径将揭示可用于预防或治疗CVD的新型药理靶标。- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - Keywords Atherosclerosis • Obesity • In fl ammation • Monocytes • Trained immunity
摘要 尽管检测蛋白质合成的方法取得了进展,但目前还无法测量整个脊椎动物大脑中的内源性蛋白质合成水平。我们开发了一种转基因斑马鱼系,可以对整个动物的新生蛋白质进行细胞类型特异性标记和成像。通过在斑马鱼 MetRS 结合口袋 (MetRS-L270G) 中用甘氨酸替换亮氨酸,我们能够在蛋白质合成过程中以细胞类型特异性的方式掺入含叠氮化物的非典型氨基酸叠氮亮氨酸 (ANL)。然后通过“点击化学”标记新合成的蛋白质。使用 Gal4-UAS-ELAV3 系在神经元中表达 MetRS-L270G,我们测量了整个神经系统的蛋白质合成强度。我们可视化了内源性蛋白质合成,并证明癫痫发作引起的神经活动会导致神经元的翻译水平增强。该方法可以以细胞类型特异性的方式在单细胞分辨率下对体内内源蛋白质合成进行稳健分析。
摘要肌萎缩性侧硬化症会影响上和下运动神经元,从而导致进行性神经病理学,从而在症状发展前很久就会导致受影响神经网络的结构和功能改变。某些遗传突变,例如C9ORF72中的扩张,使运动神经元群体诱发病理功能障碍。但是,尚不清楚潜在的病理倾向如何影响脆弱网络内的结构和功能动力学。在这里,我们研究了ALS患者衍生的运动神经元网络的微观和中尺度动力学。我们首次表明,ALS患者衍生出具有内源遗传易感性的运动神经元,以细胞质TDP-43夹杂物的形式发展出经典的ALS细胞病理学,并自组织为计算效率高效的网络,尽管具有与健康的对照组相比具有更高的代谢成本的功能标志。这些标志包括微观障碍和中尺度补偿,包括功能集中度增加。此外,我们表明这些网络通过表现出诱导的多动症而极易受到短暂扰动的影响。
我们的主要模型是世界石油市场的最先进的5变量结构VAR模型,它通过拆卸供应决定因素而不是集体建模供应冲击,从而允许世界石油市场的供应方面分解。该模型的唯一识别方案取决于两国构造的石油供应指数的可用性,该指数允许将石油价格确定的供应决定因素沿其组成部分驱动和投机需求驱动的供应冲击,从而由地缘政治发作明确驱动(即外源驱动的)以及由石油生产商的输出决策明确产生的(即内源驱动)。最近已经表明,这种区别至关重要,因为石油供应冲击与石油价格的相对重要性大大不同,具体取决于供应冲击的基本性质。此外,世界石油市场的这种结构性VAR框架具有卓越的预测性能,促进了对预测基础动态的强大经济解释,并可以对场景和影响分析进行严格的评估。
摘要 微小RNA(miRNA)是一类内源表达的基因组非编码调节子,能够介导多种生物和病理过程。越来越多的证据表明,癌细胞中微小RNA经常失调,这与肿瘤的发生、发展、迁移、侵袭、抵抗细胞死亡和耐药性有关。研究表明,由于这些小RNA对多种细胞过程有广泛的影响,调节它们是一种治疗多种疾病(尤其是癌症)的新型且有前途的治疗工具。然而,由于适当的miRNA不能最优化地递送至癌症部位、在血液循环中被核酸酶快速降解以及脱靶效应限制了它们的研究和临床应用。因此,迫切需要提高miRNA调节剂的治疗效果,同时降低其毒性。多种miRNA调节剂的递送载体已被证明在体内和体外均有效。在本综述中,我们将讨论 miRNA 在癌症中的作用和重要性,并提供关于目前可用于 miRNA 调节的载体的观点。我们还将总结基于 miRNA 的治疗策略临床转化的挑战和前景。关键词 MiRNA;失调;递送系统;癌症治疗;临床转化
在细菌中,天然转座子动员可以驱动自适应基因组重排。在这里,我们以这种能力为基础,并开发了一个可诱导的,自传播的转座子平台,用于整个基因组诱变和细菌中基因网络的动态重新布线。我们首先使用该平台研究转座子功能对平行大肠杆菌种群进化对各种碳源利用和抗生素耐药性表型的影响。然后,我们开发了一个模块化,组合装配管道,用于用合成或内源基因调节元素(例如,诱导型启动子)以及DNA条形码的转座子功能化。我们可以在交替的碳源上进行平行的发展,并证明了诱导性,多基因表型的出现,并且可以持续地跟踪条形码的转座子的易于性,以识别基因网络的致病性重新旋转。这项工作建立了一个合成的转座子平台,可用于优化工业和治疗应用的菌株,例如,通过重新布置基因网络来改善各种原料的增长,并有助于解决有关已雕刻出了极端基因网络的动态过程的基本问题。
摘要:最近的研究概念化了与供应链破坏和重新介绍有关网络复杂性的黑暗和明亮视角的潜力。几乎没有关于供应链网络复杂性,供应链中断和供应链弹性之间关系的经验研究。但是,先前的研究尚未研究网络复杂性的不同度量与弹性策略和破坏之间的关系。cur租赁研究使用供应链中断(SCD)和三种供应链弹性(SCR)策略(协作,灵活性和冗余)作为内源变量,研究了供应链网络复杂性维度的黑暗和明亮的一面。本研究中使用的供应链网络复杂性的尺寸是 - 供应复杂性(SNC),客户复杂性(CNC)和物流com com plexitity(LNC),而所考虑的三种SCR策略包括;协作,灵活性和冗余。该研究使用PLS-SEM和Accra Metropolis的690家制造商公司的样本。结果表明,供应复杂性与破坏和弹性策略都有正相关关系,而客户复杂的ITY仅与破坏有关,而物流复杂性与所有弹性策略有关。该研究提供了理论,实用和政治意义。
图 1 实验设计 A) 对于每个外显子,在 5' 和 3' 端设计两个独立的 sgRNA 和相关的 HDR 变体文库。B) 将 sgRNA 和 HDR 变体文库一起转染到表达 LIG4 -KO Cas9 的 HAP1 细胞中。sgRNA 指导 Cas9 介导的双链 DNA 切割到目标外显子。HDR 利用质粒文库作为修复模板,将单个感兴趣的 DDX3X 变体整合到每个细胞的内源位点中。每个供体模板还携带 1-3 个 NGG PAM 位点和原型间隔物的同义变化,防止重新切割。由于 DDX3X 是必需的,消除基因功能的变体会导致这些细胞死亡。我们在第 4、7、11、15 和 21 天对细胞进行取样,并对基因组 DNA 进行深度测序以量化变体的丰度。我们预计功能性错义(紫色)和同义变体(Syn,蓝色)仍然丰富,而功能丧失变体(LOF,红色)和有害错义(黄色)变体将从培养物中耗尽。