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(1990),Segerstrom等。 (1990),Grossman和Helpman(1991)以及Aghion和Howitt(1992)开发了基于R&D的增长模型,在这种模型中,新商品的发展或商品的质量改善驱动经济中的创新。 Peretto(1994)和Smulders(1994)随后的研究结合了新商品的开发以及商品的质量改进,以开发Schumpeterian增长模型与内源性市场结构。 3具有内源性市场结构的Schumpeter增长模型的优势在于,其含义得到了经验证据的支持。 4许多研究,例如Peretto(2003,2007,2011)和Ferraro等。 (2020),使用具有内源性市场结构的Schumpeter增长模型来探讨税收政策对创新驱动的增长的影响。 本研究通过使用具有内源性市场结构的Schumpeter增长模型来探索寻求租金的税收如何影响经济的内源性及其从停滞变为增长的过渡。 5(1990),Segerstrom等。(1990),Grossman和Helpman(1991)以及Aghion和Howitt(1992)开发了基于R&D的增长模型,在这种模型中,新商品的发展或商品的质量改善驱动经济中的创新。Peretto(1994)和Smulders(1994)随后的研究结合了新商品的开发以及商品的质量改进,以开发Schumpeterian增长模型与内源性市场结构。3具有内源性市场结构的Schumpeter增长模型的优势在于,其含义得到了经验证据的支持。4许多研究,例如Peretto(2003,2007,2011)和Ferraro等。(2020),使用具有内源性市场结构的Schumpeter增长模型来探讨税收政策对创新驱动的增长的影响。本研究通过使用具有内源性市场结构的Schumpeter增长模型来探索寻求租金的税收如何影响经济的内源性及其从停滞变为增长的过渡。5
开发用于修复临界骨缺损的脚手架的发展在很大程度上依赖于建立神经血管化的网络,以适当地渗透神经和血管。尽管在使用注入各种代理的人造骨状脚手架方面取得了重大进步,但仍然存在挑战。天然骨组织由一个多孔骨基质组成,该骨基质被神经血管化的骨膜包围,具有独特的压电特性,对骨骼生长必不可少。从该组件中汲取灵感,我们开发了一种模仿骨膜骨骨架的脚手架支架,具有压电特性,用于再生临界骨缺损。该支架的骨膜样层具有双网络水凝胶,由螯合的藻酸盐,明胶甲基丙烯酸酯和烧结的whitlockite纳米颗粒组成,模仿天然骨膜的粘弹性和压电性能。骨状层由壳聚糖和生物活性羟基磷灰石的多孔结构组成。与常规的骨状支架不同,这种生物启发的双层支架显着增强了成骨,血管生成和神经发生,结合了低强度脉冲超声辅助压电刺激。这样的方案增强了体内神经血管化的骨再生。结果表明,双层支架可以作为在动态物理刺激下加快骨再生的有效自动电刺激器。
摘要 CRISPR/Cas9 系统已用于在多种物种中通过同源定向修复生成荧光标记的融合蛋白。尽管它取得了革命性的成功,但仍然迫切需要提高研究生物中基因组编辑的简便性和效率。在这里,我们建立了一种简化、高效且精确的 CRISPR/Cas9 介导青鳉 (Oryzias latipes) 内源性蛋白质标记策略。我们使用一种无克隆方法,该方法依赖于 PCR 扩增的供体片段,该片段包含由短同源臂 (30-40 bp) 两侧的荧光报告序列、合成的单向导 RNA 和 Cas9 mRNA。我们生成了八个新的敲入系,具有高效的 F0 靶向和种系传递效率。全基因组测序结果显示仅在目标位点发生单拷贝整合事件。我们对这些融合蛋白系进行了初步表征,大大扩展了青鳉可用的遗传工具库。具体来说,我们表明 mScarlet-pcna 线具有作为增殖区的生物范围标签和内源性细胞周期报告基因的潜力。
致谢:本研究由 HHMI (SLZ) NIH BRAIN 计划奖 (1RF1MH117823-01) (SLZ 和 DEK) 和 R01MH114017 (DEK) 资助。我们要感谢 Mark Dombrovskiy、Alex Kim、Juyoun Yoo、Saumya Jain 和 Zipursky 实验室的其他成员就实验和抗体选择进行的有益讨论。
此预印本的版权所有者此版本于 2023 年 9 月 26 日发布。;https://doi.org/10.1101/2023.09.25.559376 doi:bioRxiv preprint
在生物体发育、体内平衡和疾病过程中,蓬乱 (Dvl) 蛋白是 β-catenin 依赖性和 β-catenin 非依赖性 Wnt 通路中的关键信号因子。尽管它们对信号传递的重要性已在许多生物体中得到遗传证实,但我们对其机制的理解仍然有限。先前使用过表达蛋白的研究表明,Dvl 定位到依赖于其 DIX 结构域的大型点状细胞质结构中。为了研究 Dvl 在 Wnt 信号传导中的作用,我们对内源表达的 Dvl2 蛋白进行了基因组工程改造,该蛋白带有 mEos3.2 荧光蛋白标记,用于超分辨率成像。首先,我们通过多个独立的检测方法展示了融合蛋白在 β-catenin 依赖性和 β-catenin 非依赖性信号传导中的功能性和特异性。我们对 Dvl2 进行了活细胞成像,以分析超分子胞质 Dvl2_mEos3.2 凝聚物的动态形成。虽然 Dvl2_mEos3.2 的过度表达模拟了之前报道的大量大“点状”的形成,但在生理蛋白质水平上,超分子凝聚物的形成仅在大约每个细胞一个的细胞亚群中观察到。我们发现,在这些凝聚物中,Dvl2 与 Wnt 通路成分在 γ-微管蛋白和 CEP164 阳性中心体结构处共定位,并且 Dvl2 对这些凝聚物的定位是 Wnt 依赖性的。使用光激活定位显微镜 (PALM) 结合 DNA-PAINT 的 mEos3.2 单分子定位显微镜展示了这些凝聚物以细胞周期依赖的方式的组织和重复模式。我们的结果表明,Dvl2 在超分子凝聚物中的定位是动态协调的,并且取决于细胞状态和 Wnt 信号水平。我们的研究以单分子分辨率突出了 Wnt 通路中内源性和生理调节的生物分子凝聚物的形成。
使用外源性向导 RNA 招募内源性腺苷脱氨酶来编辑细胞 RNA 是一种有前途的治疗策略,但使用当前的向导 RNA 设计,编辑效率和持久性仍然很低。我们设计了环状 ADAR 招募向导 RNA (cadRNA),以实现更高效的可编程 A-to-I RNA 编辑,而无需同时递送任何外源性蛋白质。使用这些 cadRNA,我们观察到在多个位点和细胞系中,在 RNA 的非翻译区和编码区中,都有稳健而持久的 RNA 编辑,并且具有高转录组特异性。此外,我们通过在反义域中整合散布的环路来增加靶腺苷的转录水平特异性,从而减少旁观者编辑。通过腺相关病毒在体内递送 cadRNA,可使 C57BL/6J 小鼠肝脏中的 mPCSK9 转录本实现 53% 的 RNA 编辑,并使 IDUA-W392X 小鼠 I 型黏多糖贮积症模型中的琥珀色无义突变实现 12% 的 UAG-UGG RNA 校正
1 法国国家科学研究院、IRIM 蒙彼利埃传染病研究所,34293 蒙彼利埃,法国 2 蒙彼利埃大学,34090 蒙彼利埃,法国 3 INSERM U1110 – 病毒和肝病研究所 (IVH) 4 斯特拉斯堡大学,67000 斯特拉斯堡,法国 5 斯特拉斯堡大学医院、大学医院研究所肝消化道中心,67000 斯特拉斯堡,法国
如果您的样本对疥螨的检测结果呈强阳性,则无需使用内源性对照来解释数据。如果您的样本检测结果为阴性,则内源性对照可用于解释结果。内源性对照的 Cq 值将根据样本中的 DNA 量而变化。晚期信号 (Cq>28) 表示样本中仅存在少量宿主来源的 DNA。您可能希望重复样本采集,然后重复测试以确认阴性结果。