样品制备可以在单个粒子冷冻电子显微镜(Cryoem)内提出一个明显的障碍,从而导致可重复性,数据质量或无法可视化样品的问题。有几个因素可以影响这一点,包括样品或缓冲液组成,网格类型,样品制备途径以及与空气 - 水接口(AWI)的相互作用。在这里,我们回顾了一些当前的样本准备和相关挑战的路线。我们讨论了克服这些挑战的一系列方法,例如最大程度地减少网格制备时间,表面活性剂,网格类型和生化方法,例如纳米磁珠。最后,我们讨论了如何将一组市售的蛋白质样品用作未来技术的基准套件。这是比较技术能力的途径,不仅是为了产生高分辨率结构,而且还要克服传统上与冷冻的挑战。作为领域的持续进行样品制备方法,我们开始更好地理解蛋白质在薄膜内的行为背后的基本原理,并响应于不同的环境(尤其是网格组成),希望可以提供更普遍的解决方案,以使可行的系统可弥补,可以使系统易于解决,并确定当前的数据,并迅速提高数据,并迅速收集,并逐步提高数据。
在临床环境和研究实验室中,对免疫细胞应用的需求不断增长,强调了对T细胞的冷冻保存(银行)方法的关键需求。虽然诸如用液氮冷冻等传统技术仍然普遍存在,但它们构成了重大挑战,包括高设备成本,安全考虑和运输的后勤障碍。我们的冷冻保存介质C80EZ®代表了一种新颖的方法,利用生物相容性多糖作为冷冻保护剂,可以在-80°C下进行安全存储。本文提出了一系列全面的测试,评估了C80EZ®在屏蔽T细胞中免受冷冻保存的不利影响的有效性。重要的是,我们的发现表明,C80EZ®不仅确保T细胞的存活,特别强调保留CD8 +子集,而且还保持其在靶向和消除癌细胞中的关键功能。
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人工智能(AI)有望创造和适当的业务价值的各种新机会。但是,许多组织,尤其是那些在传统行业中的组织 - 努力抓住这些机会。要解开根本原因,我们研究了更多传统行业如何实施预测性维护,这是AI在制造组织中的有希望的应用。为了进行分析,我们采用了多案例设计,并采用了关键的现实主义观点来确定AI实施的生成机制。总体而言,我们发现五种相互依存的机制:实验;知识建设和融合;数据;焦虑;和灵感。使用因果循环图表,我们充实了这些机制的社会技术动态,并探索实施AI的组织要求。生成机制的最终拓扑构成了对AI管理的研究,通过对塑造实施过程的因果关系的丰富见解。此外,它证明了因果环图如何改善生成机制的建模和分析。
。cc-by-nc-nd 4.0国际许可证未通过同行评审获得证明)是作者/资助者,他已授予Biorxiv授予Biorxiv的许可,以永久显示预印本。它是此预印本的版权持有人(该版本发布于2024年5月28日。; https://doi.org/10.1101/2024.04.04.04.04.04.04.04.04.02.587507 doi:Biorxiv Preprint
基于人类自然杀伤 (NK) 细胞的疗法正在接受用于治疗各种癌症的评估,但冷冻保存会降低 NK 细胞的恢复率和功能,从而限制了其治疗可行性。使用针对 T 细胞优化的冷冻保存方案,我们发现约 75% 的 NK 细胞在解冻后 24 小时内死亡,其余细胞的细胞毒性降低。使用 CRISPR-Cas9 基因编辑和共聚焦显微镜,我们发现冷冻保存的 NK 细胞大部分通过由细胞毒性囊泡中颗粒酶 B 泄漏引发的细胞凋亡而死亡。在冷冻保存之前用白细胞介素 15 (IL-15) 和 IL-18 的组合对 NK 细胞进行预处理可将 NK 细胞恢复率提高到约 90-100%,并且与未冷冻保存的 NK 细胞相比,在播散性 Raji 细胞淋巴瘤异种移植模型中实现相同的肿瘤控制率。 IL-15 和 IL-18 诱导的保护机制包括两种机制:通过脱颗粒暂时降低细胞内颗粒酶 B 水平,以及诱导抗凋亡基因。
引言卵巢是维持卵泡不断增长和退化的女性生育能力的必不可少的器官。1抗癌疗法通常会导致卵巢衰竭和不育,因为卵巢卵泡储存易受放疗和化学疗法的影响。2,3化疗会损害卵巢的血管网络和基质细胞。它通过破坏静止维持和增加凋亡涉及的信号通路来减少原发性卵泡的储备。4由癌症治疗引起的不育症会引起许多癌症幸存者的焦虑和困扰。有很多方法可以维持生育能力,包括卵形或卵巢换座,胚胎冷冻保存,卵母细胞冷冻保存以及卵巢组织冷冻保存和移植(OTC/T)。5 Oophoropexy或卵巢换位是一种手术方式,主要是通过腹腔镜手术进行的,用于卵巢组织保存和放射治疗患者的生育能力。3,6-9胚胎冷冻保存需要促性腺激素刺激,这在雌激素敏感肿瘤治疗中具有相反作用的雌二醇水平增强。10但是,这种方法不适合需要立即开始化学疗法的患者,因为要获得卵母细胞,这些卵母细胞需要伴侣或供体精子,并且在青春期之前患者不当。11,12卵母细胞冷冻保存更容易受到损害细胞内冰形成的风险,因为表面积与体积比较大和水的渗透率低。13,14 OTC/T作为维持生育能力的新技术正在迅速发展。玻璃化,慢