补充方法 DNA 分离 使用自动 DNA 提取仪按照其协议(chemagic MSM I,PerkinElmer,美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)从血液样本中分离 DNA。 使用试剂盒“EZ1&2 DNA Tissue”(Qiagen,德国希尔登)按照协议使用自动 DNA 提取仪 EZ1 Advanced XL(Qiagen)从羊膜细胞和绒毛中分离 DNA。 染色体微阵列(CMA) 使用 SureTaq DNA 标记试剂盒(Agilent,美国加利福尼亚州圣克拉拉)标记 DNA,并根据制造商的说明在 GenetiSure Cyto 4x180K CGH 微阵列(Agilent)上进行杂交。使用 InnoScan 910 AL 扫描仪(Innopsys,Carbonne,法国)扫描载玻片,并使用分析程序 Mapix(Innopsys)和 CytoGenomics 版本 5.1.2.1 和 5.3.0.14(Agilent)进行处理。使用参考基因组 GRCh38 评估数据。染色体分析和荧光原位杂交使用标准方法从肝素血样以及绒毛和羊膜细胞培养物中进行中期制备。简而言之,将来自肝素血样的细胞培养在含有植物血凝素作为有丝分裂原的 LymphoGrow 培养基(CytoGen,Sinn,德国)中,羊膜细胞培养在 Amniogrow plus 培养基(Cytogen,Sinn,德国)中,CVS 细胞培养在 Chang 培养基 D(Fujifilm,Minato,日本)中。固定后,将中期细胞滴到载玻片上,然后在 60 °C 下干燥过夜。使用核型分析系统 Ikaros(MetaSystems,德国阿尔特鲁斯海姆)通过 GTG 显带评估中期染色体的扩散情况。对于 FISH 分析,使用 Empire Genomics(美国纽约州布法罗)的探针 RP11-213E22-green 和 RP11-577D9-orange(7 号染色体)以及 RP11-358H10-green 和 RP11-241M19-orange(16 号染色体)。所有探针均按照制造商的说明使用。使用 Isis 数字成像系统(Metasystem Inc.,德国阿尔特鲁斯海姆)分析图像。 PCR 和测序 在适用的情况下,确认并进一步指定 OGM 分析中的断点,方法是使用 MinION 测序仪(Oxford Nanopore,英国牛津)进行第三代长距离测序,或使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher Scientific,美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)进行 Sanger 测序。引物是根据 Dremsek et al., 2021 中描述的策略设计的。为了将引物定位得尽可能靠近预期的断点,OGM 数据和 CMA 数据都融入了其设计中。为了分析P1,进行了长距离PCR(连接点B/D*的扩增子:正向引物:5'-ggaggacaattttatcccccaggg-3'和反向引物:5'-gtgagccgtgagtttgccactat-3';连接点D*/B*的扩增子:正向引物:5'-tcgttgacggtgaaatgctacgt-3'和反向引物:5'-gcagataacggagtgaggaaggc-3')。PCR扩增后,使用引物 5' -acagctcactatagcagataggtgt- 3'、5' - ttgcatcaggaacatgtggacct- 3'、5' -ctggtcacaggcgcaaatcaaag- 3'、5' -gtcagcaaaggagagaagcagct- 3' 和 5' - gcaggttggctctttcccaagta- 3' 制备连接点 B/D* 的扩增子(大小为 4 kbp)进行 Sanger 测序。使用引物 5' -agggaaaagagatgtgtaaaatactgt- 3', 5' -agatgaggaagggcatctgac- 3', 5' -tcaagttgtcattgtggtgaatt- 3', 5' - cagatgccagcgctaagacgat- 3', 5' -aggttattacacacccctcct- 3', 5' -tgttcattatcactggccatcaga- 3', 5' -aaggggaaacctcctgctactct- 3', 5' - tgcacccactaacgtgtcatcta- 3', 5' -gggttggttccaagtctttgcta- 3', 5' -gctgaaactggatcccttcctta- 制备连接点 D*/B* 的扩增子(大小为 13 kbp),进行 Sanger 测序。 3'、5' -tgtagggacatggatgaaattgg- 3' 和 5' -ccaaacaccgcatattctcactc- 3'。为了分析 P3,进行了长距离 PCR(正向引物:5' -ttaccacgaaagagcaaacggtga- 3' 和反向引物:5' - aacgttattccttccagtcacccac- 3')。PCR 扩增后,根据制造商的方案(SQK -LSK109,Oxford Nanopore),制备 9 kbp 大小的扩增子以在 MinION 106D 流动槽上进行测序。对于家族检测,建立了 PCR,使用倒位特异性引物 5' -tgcctctgcttaataggaagttttgg- 3' 和 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3'(产生 1247 bp 扩增子),以及野生型引物 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3' 和 5' -ctgttgaaggacacaagctctggc- 3'(产生 778 bp 扩增子)(见 S.3)。MLPA 分析进行多重连接依赖性探针扩增 (MLPA) 以验证在 CMA 中检测到的增益并测试亲属的携带者状态。对于 MLPA,将 DNA 与探针杂交并根据制造商的说明进行扩增。使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher)对扩增的 DNA 进行片段分析,并使用 SeqPilot(JSI,德国埃滕海姆)分析程序处理数据。用于所呈现的临床病例的 MLPA 探针组是 P034-B2、P035-B1(P1)和 P216-C1(P3)(MRC-Holland,荷兰阿姆斯特丹)。5' -tgtagggacatggatgaaattgg- 3' 和 5' -ccaaacaccgcatattctcactc- 3'。为了分析 P3,进行了长距离 PCR(正向引物:5' -ttaccacgaaagagcaaacggtga- 3' 和反向引物:5' - aacgttattccttccagtcacccac- 3')。PCR 扩增后,根据制造商的方案(SQK -LSK109,Oxford Nanopore),制备 9 kbp 大小的扩增子以在 MinION 106D 流动池上进行测序。对于家族检测,建立了 PCR,使用倒位特异性引物 5' -tgcctctgcttaataggaagttttgg- 3' 和 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3'(产生 1247 bp 扩增子),以及野生型引物 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3' 和 5' -ctgttgaaggacacaagctctggc- 3'(产生 778 bp 扩增子)(见 S.3)。MLPA 分析进行多重连接依赖性探针扩增 (MLPA) 以验证在 CMA 中检测到的增益并测试亲属的携带者状态。对于 MLPA,将 DNA 与探针杂交并根据制造商的说明进行扩增。使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher)对扩增的 DNA 进行片段分析,并使用 SeqPilot(JSI,德国埃滕海姆)分析程序处理数据。用于所呈现的临床病例的 MLPA 探针组是 P034-B2、P035-B1(P1)和 P216-C1(P3)(MRC-Holland,荷兰阿姆斯特丹)。5' -tgtagggacatggatgaaattgg- 3' 和 5' -ccaaacaccgcatattctcactc- 3'。为了分析 P3,进行了长距离 PCR(正向引物:5' -ttaccacgaaagagcaaacggtga- 3' 和反向引物:5' - aacgttattccttccagtcacccac- 3')。PCR 扩增后,根据制造商的方案(SQK -LSK109,Oxford Nanopore),制备 9 kbp 大小的扩增子以在 MinION 106D 流动池上进行测序。对于家族检测,建立了 PCR,使用倒位特异性引物 5' -tgcctctgcttaataggaagttttgg- 3' 和 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3'(产生 1247 bp 扩增子),以及野生型引物 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3' 和 5' -ctgttgaaggacacaagctctggc- 3'(产生 778 bp 扩增子)(见 S.3)。MLPA 分析进行多重连接依赖性探针扩增 (MLPA) 以验证在 CMA 中检测到的增益并测试亲属的携带者状态。对于 MLPA,将 DNA 与探针杂交并根据制造商的说明进行扩增。使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher)对扩增的 DNA 进行片段分析,并使用 SeqPilot(JSI,德国埃滕海姆)分析程序处理数据。用于所呈现的临床病例的 MLPA 探针组是 P034-B2、P035-B1(P1)和 P216-C1(P3)(MRC-Holland,荷兰阿姆斯特丹)。
在立法中使用“漏洞”来保护其资产;成为联合国/自我雇员,以避免配偶抚养/子女抚养;尽管拥有财务资源,但仍拒绝支付子女抚养费;隐藏/拒绝披露实际收入;税收欺诈以避免财务义务;错误地向她报告好欺诈。
我们解决了在应用程序中捕获的图像(相机)捕获到云的应用程序中的隐私问题,以推断出诸如分类之类的实用程序任务。将原始图像发送到云中,使它们暴露于数据嗅探,并被不受信任的第三方服务提供商滥用,超出了用户的预期任务。我们提出了一个编码方案,该方案不仅可以直接远程视觉检查到图像或图像重建,还可以防止确定敏感信息。与常用的对抗性学习方法不同,所提出的方法是两个方面:首先,它使用衍射光学神经网络将与光学域中传感器平面上不同任务相对应的空间分开。然后只读取与实用程序任务区域相对应的像素。此编码可确保绝不会将私人功能存储在边缘设备上,从而防止隐私泄漏。所提出的方法成功地减少了二进制任务中的隐私检索,其准确性损失最小(约2%),同时将私人任务准确性降低了约35%,并防止SSIM得分为0的重建攻击。43。
摘要:由植物的叶子、花朵、种子或茎组成的食品调味品/香料是食品添加剂,可为食品增添特殊的香气和风味,从而增加其口感,但可能藏有多种微生物。因此,本文的目的是使用各种标准微生物技术分离、鉴定和表征尼日利亚夸拉州伊洛林市常见的食品调味品(大蒜、生姜、胡椒和姜黄)中的细菌分离物。地点 A 的样品中异养菌总数 (THC) 最高,为 21.52 ± 5.31 Cfu/ml。地点 B 的大蒜样品中大肠菌群总数 (TCC) 最高,为 6.67 ± 4.93 Cfu/ml。地点 C 的大蒜样品中葡萄球菌总数 (TSC) 最高,为 4.00 ± 1.00 Cfu/ml。地点 C 的大蒜样品中沙门氏菌-志贺氏菌总数最高,为 4.67 ± 3.06
。CC-BY 4.0 国际许可下可用(未经同行评审认证)是作者/资助者,他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是此预印本的版权持有者此版本于 2024 年 10 月 19 日发布。;https://doi.org/10.1101/2024.10.18.619037 doi:bioRxiv 预印本
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我在此提交道格拉斯·保罗·尤罗维奇撰写的论文,题为“武器分离特性的光度分析”。我已经检查了这篇论文的最终电子版形式和内容,并建议接受它作为部分满足理学硕士学位的要求,主修航空系统。