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SARS-CoV-2 前导序列和 NSP1 的关键特征是病毒逃避 NSP1 介导的抑制所必需的
SARS-CoV-2 是当前全球大流行的罪魁祸首，它必须克服所有病毒都面临的难题。为了实现自身的复制和传播，它同时依赖和破坏细胞机制。在感染的早期阶段，SARS-CoV-2 表达病毒非结构蛋白 1 (NSP1)，它通过阻断核糖体上的 mRNA 进入通道来抑制宿主翻译；这会干扰细胞 mRNA 与核糖体的结合。另一方面，病毒 mRNA 克服了这种阻断。我们表明 NSP1 增强了含有 SARS-CoV-2 前导序列的 mRNA 的表达。病毒前导序列中的第一个茎环 (SL1) 对于这种增强机制既必要又充分。我们的分析确定了 SL1 内的特定残基（位置 15、19 和 20 处的三个胞嘧啶残基）和 NSP1 内的另一个残基（R124），它们是病毒逃避所必需的，因此可能成为有希望的药物靶点。我们利用反义寡核苷酸 (ASO) 靶向 SL1，以有效且特异性地下调 SARS-CoV-2 mRNA。此外，我们使用 BioID 对 NSP1 的功能性相互作用组进行了分析，并确定了抗病毒防御途径的组成部分。因此，我们的分析表明 NSP1 抑制宿主基因表达同时增强病毒 RNA 表达的机制。该分析有助于调和文献中关于病毒避免 NSP1 沉默的机制的相互矛盾的报道。
TutorTube：DNA 复制
最后我们要介绍的是 DNA 复制在更大规模上是怎样的。由于 DNA 聚合酶 III 只能将 DNA 从 5' 复制到 3'，因此存在一条前导链和一条滞后链，导致每条链被合成。前导链的合成方向与 DNA 被进一步打开的方向相同。滞后链的合成方向相反，因此每次当解旋酶解开更多 DNA 时，它都必须设置一个新的引物。这意味着前导链只有一个引物，而滞后链有多个引物。在滞后链上形成的这些新 DNA 片段称为冈崎片段。
额肌 - NSF-PAR - 国家科学基金会
242 图 5：组蛋白 H2B 的 NLS 序列将厌氧荧光报告基因定位到真菌细胞的细胞核 243。A) 厌氧真菌在组蛋白 H2B 上具有独特的 5' 前导序列，与模型真菌谱系的前导序列不同。B) 保守厌氧真菌组蛋白 245 2B 前导序列或假定 NLS 的一致序列。C) 用含有潮霉素抗性和 iRFP 的构建体转化的真菌细胞的共聚焦显微镜检查能够选择和可视化 iRFP 表达。有关这些构建体的完整描述，请参阅表 2。248 249
前导链和滞后链模板中的 DNA 缺口均可引发断裂诱导的复制
。CC-BY 4.0 国际许可下可用（未经同行评审认证）是作者/资助者，他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是此预印本的版权持有者此版本于 2023 年 12 月 22 日发布。；https://doi.org/10.1101/2023.12.22.573028 doi：bioRxiv 预印本
蛋白质工程方法增强酿酒酵母真菌漆酶的产量
摘要：腐生担子菌分泌的漆酶是一种多功能生物催化剂，仅需氧气即可氧化多种芳香族化合物。酿酒酵母是真菌漆酶工程的首选宿主。为了帮助酵母分泌活性酶，天然信号肽通常被酿酒酵母α交配因子（MF α 1）的前原前导序列取代。然而，在大多数情况下，只能获得基础酶水平。在酿酒酵母中与α因子前原前导序列融合的漆酶的定向进化过程中，我们证明了信号肽中积累的突变显著提高了酶的分泌。在这里，我们描述了为增强在酿酒酵母培养物液体提取物中检测到的漆酶活性而实施的不同蛋白质工程方法。我们通过使用实验室中连续进行的漆酶进化活动获得的适应性最强的突变 α 因子前导序列，证明了天然和工程漆酶的分泌得到改善。我们还特别关注了蛋白质 N-糖基化在漆酶生产和特性中的作用，以及通过共识设计引入保守氨基酸，从而能够表达酵母原本不会产生的某些漆酶。最后，我们修改了在之前的定向进化活动中积累的漆酶编码序列 (CDS) 突变的贡献，这些突变促进了酶的生产。
驾驶事件导致心理负荷增加后电生理和性能变化
本研究旨在调查如何利用驾驶表现以及电生理和主观数据来评估驾驶员在驾驶过程中的心理工作负荷。参与者必须在驾驶模拟器上的两个会话（基线和实验）内以安全且恒定的距离跟随前导车辆并处理两个特定驾驶事件（超车和行人事件）。在实验会话中，增加了交通密度和时间压力（超车事件）以及时间压力（行人事件），以引起更高的工作负荷。参与者在每次驾驶会话后填写 NASA TLX 问卷。每次事件后在两个时间窗口（30 秒和 5 分钟）内分析电生理参数（SCL、ECG）、驾驶表现（SDLP 和对前导车辆速度变化的响应：连贯性、延迟和增益）。结果表明，表现和生理变量均因交通状况和时间压力而不同。此外，虽然在很长一段时间内（事件发生后 5 分钟）系统地观察到了性能变化，但实验过程中获得的平均 SCL 数据的影响与事件发生后 30 秒内的基线值明显不同。从心理负荷的角度讨论了结果，并提出了有关可以监控驾驶员心理状态的安全系统的建议。
用于集成路径差分吸收激光雷达的双激光磷化铟光子集成电路
摘要 — 演示了一种用于大气二氧化碳 (CO 2 ) 集成路径差分吸收激光雷达的磷化铟光子集成电路 (PIC)。PIC 由两个宽调谐采样光栅分布布拉格反射器 (SGDBR) 激光器、定向耦合器、相位调制器、光电二极管和半导体光放大器 (SOA) 组成。一个 SGDBR 激光器（前导）使用片上相位调制器和台式 CO 2 Herriott 参考单元锁定在 1572.335 nm 处的吸收线中心。另一个 SGDBR 激光器（跟随器）在 1572.335 nm 附近以 ± 15 GHz 的频率步进，以扫描目标 CO 2 吸收线。跟随器激光器通过光学锁相环偏移锁定到前导激光器。跟随器激光器后的 SOA 在每个频率步进处产生一个脉冲，以创建对目标 CO 2 吸收线进行采样的脉冲序列。根据目标性能要求对 PIC 组件和子系统进行特性描述和评估。与自由运行相比，引导激光器在锁定状态下的频率稳定性标准偏差提高了 236 倍，而与引导激光器相比，在 2 GHz 编程偏移下，跟随激光器的频率稳定性标准偏差为 37.6 KHz。
中央教条DNA→RNA→蛋白质
您可能会遇到的事情：1。DNA复制只会在5'→3'方向上发生；也就是说，只有当我们添加到自由3'-OH时，才会发生DNA复制。因此，5'末端不会改变，但3'端会延长。2。如果DNA-Pol具有数量，则是细菌聚合酶；如果有希腊字母，那就是真核。3。当您考虑前导与滞后链时，请始终记住复制发生在5'→3'方向上；因此，充当模板的链必须沿3'→5'方向（进入复制叉进入复制叉），才能连续复制。如果模板为5'→3'，则将其复制在该链上，则将是不连续的。_______________________________________________________________________________