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描述:PRMT1 化学发光检测试剂盒旨在测量 PRMT1 活性,用于筛选和分析应用。PRMT1 化学发光检测试剂盒采用方便的形式,8 孔试纸条预涂有组蛋白 H4 肽底物、针对组蛋白 H4 甲基化精氨酸残基的抗体、HRP 标记的二抗、S-腺苷甲硫氨酸、甲基转移酶检测缓冲液和纯化的 PRMT1 酶,可进行 96 种酶反应。PRMT1 化学发光检测试剂盒的关键是一种高度特异性的抗体,可识别组蛋白 H4 甲基化的 R3 残基。使用此试剂盒,只需三个简单的步骤即可检测甲基转移酶。首先,将 S-腺苷甲硫氨酸与含有检测缓冲液和甲基转移酶的样品一起孵育。接下来,添加一抗。最后,用 HRP 标记的二抗处理试纸条,然后添加 ELISA ECL 底物以产生化学发光,然后可以使用化学发光读数仪进行测量。组件:
作者:M Poplová · 2023 · 被引用 5 次 — (7) Ghaemi Kerahrodi, J.;Michal, M. 恐惧防御系统、情绪和氧化应激。Redox Biology 2020, 37, 101588。(8) Van Wijk, ...
摘要。介绍了一种用于快速精确测量臭氧 (O 3 ) 的商用干式化学发光 (CI) 仪器。灵敏度为每 ppbv 臭氧 ∼ 9000 计数 s − 1。其精度完全取决于到达检测器 (光电倍增器) 的光子数量,即受量子噪声限制。因此,相对精度 (� O 3 /O 3 以 %) 遵循泊松统计,并与测量频率 f 的平方根和 O 3 混合比的倒数成比例:� O 3 /O 3 ∝ f 0 。5 · O − 0 。5 3 。在典型的 O 3 混合比介于 10 和 100 ppbv(和 1 bar)之间时,精度为 0.3–1.0 %,f = 10 Hz。最大测量频率为 50 Hz。描述了机械和电子设置以及仪器性能。给出了关于适当的入口管配置(入口管长度、采样流量)以及在固定地面平台和机载飞机上校准方式的建议。
腺苷到肌苷 (A-to-I) 编辑是一种保守的真核 RNA 修饰,有助于发育、免疫反应和整体细胞功能。RNA 编辑模式在不同细胞和组织类型之间可能存在显著差异,而过度活跃的 A-to-I 特征则表明存在多种疾病,包括癌症和自身免疫性疾病。由于这些差异具有生物学和临床重要性,因此迫切需要有效的方法来测量细胞 RNA 中的整体 A-to-I 编辑水平。当前的标准方法依赖于 RNA-seq 来间接检测编辑位点,这需要大量时间和材料投入以及大量的计算分析。在这里,我们利用核酸内切酶 V (EndoV)(它特异性地与 RNA 中的肌苷结合)来开发基于蛋白质的化学发光生物测定法,以直接分析 A-to-I RNA 编辑活性。我们之前展示了 EndoV 可以在 RNA 测序之前结合并丰富 A-to-I 编辑的转录本,现在我们利用这一活性构建 EndoV 连接免疫吸附测定 (EndoVLISA),作为一种快速的、基于板的化学发光方法,用于测量细胞 RNA 中的全局 A-to-I 编辑特征。我们首先使用化学合成的寡核苷酸优化和验证我们的测定方法,说明对 RNA 中的肌苷具有高度选择性和灵敏度的检测。然后,我们展示了对处理过的细胞系中肌苷含量的快速检测,证明了与当前标准 RNA 测序方法相当的性能。最后,我们部署了 EndoVLISA 来分析正常和患病人体组织中的差异 A-to-I RNA 编辑特征,说明了我们的平台作为诊断生物测定的实用性。总之,EndoVLISA 方法经济高效、简单易用,并且使用常见的实验室设备,为研究 A-to-I 编辑提供了一种高度可用的新方法。此外,多孔板格式使其成为第一个适用于直接高通量量化 A-to-I 编辑的检测方法,可用于疾病检测和药物开发。
摘要:过氧化氢(H 2 O 2 )是体内产生的一种重要产物,与许多病理生理过程有关,而葡萄糖代谢紊乱可导致生物体许多致命的疾病。因此,传感H 2 O 2 和葡萄糖在疾病诊断和治疗中具有重要意义。荧光碳点(CD)是一类新的H 2 O 2 和葡萄糖纳米探针。然而,基于CD的传感器通常基于其荧光响应,而荧光响应容易受到自发荧光干扰的影响。本研究采用一锅溶剂热法合成了高效的荧光碳点,在草酸二甲酯和 H 2 O 2 溶液中碳点呈现明亮而持久的深红色(DR)化学发光(CL),其化学发光量子产率为(8.22 ± 0.30)× 10 −3,是迄今为止报道的用于化学分析的纳米材料中最高值之一。利用碳点作为化学发光纳米探针,实现了对 H 2 O 2 的灵敏传感,检测限为 11.7 μ M,并进一步用于葡萄糖检测,检测限为
图 5. 使用 AzureRed 和化学发光 Western Blot 同时检测总蛋白。通过 SDS-PAGE 分离 2 倍连续稀释的 HeLa 裂解物并转移到 PVDF 膜上。半干转移完成后,用 AzureRed 总蛋白染料对膜进行染色。然后用 Azure 化学发光印迹封闭缓冲液封闭印迹,然后与小鼠抗 GAPDH 孵育。用 Azure 印迹洗涤缓冲液洗涤印迹 3 次,然后用 Azure 山羊抗小鼠 HRP 二抗孵育。用 Radiance ECL 底物检测化学发光信号。底物孵育后,对印迹进行成像以产生总蛋白染色和 GAPDH 蛋白的叠加。AzureRed 显示为绿色,GAPDH 显示为灰色。
材料与方法 使用 Lightning-Link 试剂盒 (ab201807, Abcam plc., 英国剑桥) 将 HRP 与白蛋白结合,并通过蛋白质印迹法确定结合是否成功。在 DMEM 中使用 316L 不锈钢和纯镁圆盘进行浸没实验。成像是通过将圆盘从培养基中取出并在空气中干燥圆盘,然后将增强化学发光 (ECL) 底物直接添加到金属表面来进行的。通过使用 Azure 600 (Azure Biosystems Inc., 都柏林 CA) 在表面进行化学发光成像,ECL 和吸附的结合蛋白的反应可以指示吸附的蛋白质量。随后清洗表面以去除剩余的底物并返回浸没溶液以在多个时间点继续研究动态表面。
384 采用微孔板化学发光信号放大体外核酸杂交试验定性检测宫颈和阴道样本中的 13 种高危人乳头瘤病毒 (HPV) DNA 类型