衣原体沙眼,一种衣原体,对人类健康的影响最大,是细菌性传播疾病的主要原因,并且在所有Chamydia spp中都可以预防失明。物种。胸部寄生虫的强制性细胞内寄生虫和独特的双相发育周期是开发遗传操作工具的主要障碍。过去十年见证了对气管梭菌的遗传操纵,包括化学诱变,基于II组内含子的靶向基因敲除,荧光报告的等位基因交换诱变(FRAEM),CRISPR干扰(CRISPRI)和最近开发的转载体诱变。在这篇综述中,我们讨论了沙眼梭状芽孢杆菌的遗传操纵的当前状态,并突出了衣原体遗传学新生田中的新挑战。
癌症基因组测序已鉴定出数十个突变,在淋巴作用和白血病发生中起作用。验证负责B细胞肿瘤的驱动突变的验证是值得研究的突变体积以及由B细胞发育不同阶段引起的多个突变的复杂方式而变得复杂的。小鼠的正向和反向遗传策略可以提供对人类驱动基因的互补验证,在某些情况下,这些模型的人肿瘤的比较基因组学指导了对人类恶性肿瘤中新驱动因素的鉴定。我们回顾了使用插入诱变,化学诱变和外显子组测序进行的前向遗传筛选的集合,并讨论如何使用人类肿瘤基因组识别插入性诱变筛查中插入性诱变筛查中的高渗透覆盖范围如何鉴定在无法使用人类肿瘤基因组的速度下进行合作的突变。我们还比较了一组从PAX5突变小鼠中进行的独立进行的筛选,该筛网会在人类急性淋巴细胞性白血病(ALL)中观察到的一组常见突变集合。我们还讨论了使用CRISPR-CAS,ORF和SHRNA的反向遗传模型和筛选,以提供高吞吐量的体内证据,以实现致癌功能,重点是使用经体培养细胞的收养转移模型。最后,我们总结了在体内环境中提供候选基因的时间调节的小鼠模型,以证明其编码蛋白作为治疗靶标的潜力。
摘要冬季油菜的两个突变体(甘蓝纳普斯L. var。oleifera)通过化学诱变(HOR3-M10453和HOR4-M10464)培养种子中含有含油酸的量。突变植物的整体性能远低于野生型品种。具有高收益的双低(“ 00”)品种和具有有价值的农艺性状的繁殖品种的多个回合,然后需要选择高油酸基因型,以获得新的“ 00”种类的新“ 00”品种,具有高油酸含量的种子中的高油酸含量。要执行此类选择,使用了特定的裂解扩增的多态性序列(CAPS)标记。该标记旨在检测去饱和酶基因BNAA.FAD2中两个相关点突变的存在,并且先前已对其进行了描述和专利。使用FSP BI限制酶消化了特定的聚合酶链反应产物(732 bp),该酶识别5'-C↓TAG -3'序列,这是两个突变等位基因共有的,从而对这些等位基因特异性产生带模式。重新设计了该专利中提出的方法,调整为特定的实验室条件并进行了彻底的测试。测试了不同的DNA提取方案以优化过程。CAPS方法的两个变体(带有和不使用放大产品的净化)被认为选择最佳选择。此外,还测试了研究标记检测BNAA.FAD2基因座中杂合性的能力。最后,我们还提供了一些在繁殖计划中使用标记辅助选择(MAS)中使用新帽标记的示例。建议使用CAPS标记的DNA提取的标准CTAB方法和简化的两步(放大/消化)程序。标记物被发现可用于检测研究的BNAA.FAD2去饱和酶基因的两个突变等位基因,并有可能确保育种者的霍尔线纯度。然而,还表明它无法检测到任何其他揭示的等位基因或基因在油酸水平的调节中起作用。