抽象的干细胞,特别诱导的多能干细胞(IPSC),对再生医学和治疗治疗的未来有希望。最近,使用Talens和CRISPR来实现基因组工程目的和疾病模型的产生,已经实现了干细胞和祖细胞的操纵。但是,缺乏先进的技术一直在阻碍目前的研究和发现速度。改善的分娩可以帮助加速研究新疗法,并有助于理解疾病途径和机制。我们已经证明了lipofectamine®3000是改进的DNA递送试剂,可以实现胚胎干细胞(ESC)和IPSC中各种质粒DNA的最佳转染效率,这些质粒DNA和IPSC在传统上很难转发。替代DNA,mRNA的转染要求货物仅进入细胞质,而不是细胞核,因此降低了整合的风险,更重要的是大大提高了转染效率。在最近的一项研究中,我们在胚胎干细胞和IPSC中使用了一种特异性递送试剂Lipofectamine Messengermax™,并在Cas9-MRNA和GRNA复合物中显示了成功的遗传裂解。与质粒CAS9方法相比,CAS9 RNA方法的核酸酶介导的百分比率提高了。最近,我们已经表明,提高的indel速率直接改善了多路复用的靶向并减少脱靶效应。CAS9 RNP复合物可以在细胞进入时立即起作用,因为不需要转录和翻译。新开发的工作流程,由cas9-核糖核蛋白和专门开发的转染试剂Lipofectamine crisprmax™组成,可在Jurkat T细胞和IPSC中产生超过80%的Indel率。此外,该复合物可以从细胞中迅速清除,从而最大程度地减少了脱靶裂解事件的机会。将这些进步综合起来大大改善了下游工作流程,可以更轻松地进行干细胞操作,并增强敲入或敲除细胞模型和转基因小动物模型的产生。引言患者衍生的IPSC通过使能够进入活体供体无法获得的细胞群体,从而在细胞疗法和体外疾病建模中提供了令人兴奋的潜力。随着最近发现特定基因编辑的发现,这种真正的力量即将快到。除了特定于站点的编辑外,具有开发两个具有等基因背景的细胞模型的能力,使研究人员具有研究途径或综合征中单个突变的真实影响的潜力,进而开发了先进的疗法和治疗方法。
摘要。目标。癌症干细胞(CSLC)与肿瘤复发,转移和耐药性密切相关。PHD指域蛋白5A(PHF5A)与非小细胞肺癌(NSCLC)的肿瘤发生和发展有关。PHF5A在NSCLC CSLC中的作用和调节机制尚不清楚。这项研究旨在确定CSLC的生物学特征以及PHF5A在维持NSCLC中的作用。方法。H1299-SPHERES和A549-SPHERE通过流式细胞仪通过肿瘤组形成测定和CSLC获得。使用免疫荧光染色,qRT-PCR和Western印刷物测试了CD133,E-钙粘蛋白1,E-钙粘蛋白,波形蛋白,PHF5A和组蛋白脱乙酰基酶8(HDAC8)的表达。CCK-8和Transwell分析来确定NSCLC中CSLC和粘附单层细胞的增殖,迁移和侵袭能力。我们调节CSLC中的PHF5A表达和HDAC活性,以探索NSCLC组织中靶蛋白的PHF5A在Stemness维持中的机理。结果。与单层细胞相比,CSLCs对顺铂介导的抑制,迁移和侵袭的抑制作用以及pHF5A和HDAC8的高表达降低,并伴有EMT标记的改变。NSCLC CSLC中PHF5A的靶向敲低导致茎表型和HDAC8表达降低,而HDAC活性的抑制会影响Stemness的维持。此外,靶蛋白的表达在NSCLC组织中显示出一致的变化。结论。与单层细胞相比,NSCLC的癌症样表型特性发生了变化,PHF5A参与了CSLC的干性维持,并且此过程可能与HDAC8的激活有关。
Harisu Abdullahi Shehu 1,(研究生成员,IEEE),医学博士。Haidar Sharif 2,(成员,IEEE),医学博士。 HARIS UDDIN SHARIF 3 , (Graduate Student Member, IEEE), RIPON DATTA 3 , (Graduate Student Member, IEEE), SEZAI TOKAT 4 , SAHIN UYAVER 5 , HUSEYIN KUSETOGULLARI 6 , (Member, IEEE), AND RABIE A. RAMADAN 7 , (Member, IEEE) 1 School of Engineering and Computer Science, Victoria University of Wellington, Wellington 6012,新西兰2 2440年,新西兰2计算机科学与工程学院,沙特阿拉伯2440年,沙特阿拉伯3国际研究生服务系,坎伯兰郡威廉斯堡大学,肯塔基州威廉斯堡,40769 Blekinge理工学院计算机科学,37141 Karlskrona,瑞典7计算机工程系,开罗大学,开罗大学,开罗12613,埃及Haidar Sharif 2,(成员,IEEE),医学博士。HARIS UDDIN SHARIF 3 , (Graduate Student Member, IEEE), RIPON DATTA 3 , (Graduate Student Member, IEEE), SEZAI TOKAT 4 , SAHIN UYAVER 5 , HUSEYIN KUSETOGULLARI 6 , (Member, IEEE), AND RABIE A. RAMADAN 7 , (Member, IEEE) 1 School of Engineering and Computer Science, Victoria University of Wellington, Wellington 6012,新西兰2 2440年,新西兰2计算机科学与工程学院,沙特阿拉伯2440年,沙特阿拉伯3国际研究生服务系,坎伯兰郡威廉斯堡大学,肯塔基州威廉斯堡,40769 Blekinge理工学院计算机科学,37141 Karlskrona,瑞典7计算机工程系,开罗大学,开罗大学,开罗12613,埃及
背景和目标:基因表达,形态和电生理组合对于评估人类诱导的多能干细胞衍生的心房和心室样性心肌细胞(IPS-AM和IPS-AM和IPS-VM)的动态发展至关重要。方法:对于IPS-AM/VM分化,我们对视黄酸和骨形态发生蛋白信号通路进行了基于小分子的时间调节。我们使用免疫荧光,实时聚合酶链反应,流式细胞仪和透射电子显微镜以及注册的电生理逻辑函数在第20、30天和60天后进行了注册的电生理逻辑函数研究了基因表达和形态。结果:泛胞肌细胞标记物,包括肌钙蛋白T2(TNNT2)和α-Actinin-2(ACTN2),在IPS-AMS和IPS-VMS中的表达都在增加。Similarly, the mRNA expression of both iPS-AM-specific markers, ie, natriuretic peptide A ( NPPA ), myosin light chain 7 ( MYL7 ), and K+ channel Kir3.4 ( KCNJ5 ), and iPS-VM-specific markers, ie, gap junction α-1 ( GJA1 ), myosin light chain 2 ( MYL2 ), and电压依赖性L型钙通道(CACNA1C)的α-1亚基从0增加到20天,然后从30天减少到60天。关于形态学,心脏肌钙蛋白-T(CTNT)的排列逐渐组织起来,并从IPS-AMS和IPS-VMS中的有组织的肌动物模式逐渐组织起来。线粒体数逐渐增加,而在动态发育过程中,脂质液滴的数量也降低。关于生理功能,在两种细胞类型中,静息和动作电位幅度在统计上保持统计漠不关,并且在发育过程中延长了动作电位持续时间。结论:IPS-AMS/VM显示了有关其基因表达,形态和电生理功能的动态发展。这项研究的发现可以为心脏发展提供新的见解,并鼓励进一步的研究。关键字:心肌细胞,诱导多能干细胞,动态发育,基因表达,形态,动作电位
米兰,2024年11月27日 - 从欧洲对胚胎干细胞的研究到帕金森氏疗法人的临床实验的第一阶段。这是从2008年开始进行的研究的关键结果 - 在欧盟的三个研究联盟中进行的研究(均由欧盟资助的三个研究财团(带有第七框架计划和地平线2020年的呼吁),由“由生物学家及其神经疾病的生物学生物学的生物学和药理学实验室协调”。卡塔诺。目前正在进行的临床实验是欧洲的第一个实验,其中包括从帕金森患者中的人类胚胎干细胞开始在实验室中产生的神经元的移植,以取代由于疾病引起的受损神经元。如果这些测试的结果是积极的,那么新观点将开放,以治疗包括亨廷顿在内的其他神经退行性疾病,始终是卡塔内奥教授研究活动的中心。
。cc-by-nc-nd 4.0国际许可证未通过同行评审获得证明)是作者/资助者,他已授予Biorxiv授予Biorxiv的许可,以永久显示预印本。它是此预印本的版权持有人(该版本发布于2024年7月10日。; https://doi.org/10.1101/2024.01.01.06.574465 doi:biorxiv preprint
大多数被子植物的茎尖分生组织 (SAM) 呈圆锥形,由高度组织化的细胞层和功能域组成(111)(图 1)。最外层(L1)产生表皮组织,下一层(L2)产生表皮下组织和配子。L1 和 L2 都通过垂周细胞分裂保持为离散的细胞层,由此形成垂直于分生组织表面的新细胞壁,而子细胞则留在其原始层中。因此,从遗传学上讲,L1 和 L2 是克隆。体细胞突变由子细胞遗传,子细胞将保留在同一细胞层中,从而产生嵌合植物组织。分生组织较深区域的细胞形成第三层(L3)。在这里,细胞分裂的方向性较差,L3 产生大部分植物茎组织、维管系统和植物叶片的内层。包括花分生组织在内的新器官原基的生成发生在外周区 (PZ) 中分生组织的侧面,而分生组织的中心由中心区 (CZ) 中未分化且很少分裂的干细胞组成。SAM 和花分生组织 (FM) 具有相同的一般结构,但有一个重要区别:FM 中的干细胞用于
f Eline间充质干细胞(MSC;有时称为间充质基质细胞)在2002年的文献中首次提到。1对MSC和相关动物细胞和基于组织的产品(ACTP)的潜力提出了重大兴趣,以满足兽医和人类医学中未满足的治疗需求。尽管有这种紧迫的需求和兴趣,但在美国仍然没有可用于使用的兽医干细胞产品,并且使用再生疗法的未经证实和不安全的做法导致了负面结果和错误信息。因此,兽医需要了解有关这些产品的当前信息,政策和调节。2–7干细胞。它们是通过分化为专业细胞和自我更新的能力来定义的。干细胞有几种类型,包括MSC。MSC主要源自成人tiss,其中包括出生相关组织,例如
对间充质干细胞(MSC)和相关的动物细胞和基于组织的产品(ACTP)的稳定兴趣, smainiake的兴趣已被放置在兽医和人类医学中未满足的治疗需求。 尽管有希望,并且有未经效果治疗的猫科疾病的数量很大,但目前尚无批准的兽医干细胞产品可在美国使用。 本文的同伴评论指出,已发表的文献仅包括有关迄今为止使用MSC和MSC产品处理的215只猫的信息。 1只有26个(46.2%)中的12个发表的研究描述了对猫的MSC产品的给药,其中包括对照组,这些实验 - TAL和临床试验使用了7个细胞来源,9条管理途径,12辆送货车辆,12辆送货车辆,以及在健康的猫和猫中进行300倍范围的剂量,用于自然和诱导的猫的驾驶员研究。 1尽管有关猫科学家的出版物在过去的10年中有所增加,但使用MSC和MSC 的大量研究和少量研究smainiake的兴趣已被放置在兽医和人类医学中未满足的治疗需求。尽管有希望,并且有未经效果治疗的猫科疾病的数量很大,但目前尚无批准的兽医干细胞产品可在美国使用。本文的同伴评论指出,已发表的文献仅包括有关迄今为止使用MSC和MSC产品处理的215只猫的信息。1只有26个(46.2%)中的12个发表的研究描述了对猫的MSC产品的给药,其中包括对照组,这些实验 - TAL和临床试验使用了7个细胞来源,9条管理途径,12辆送货车辆,12辆送货车辆,以及在健康的猫和猫中进行300倍范围的剂量,用于自然和诱导的猫的驾驶员研究。 1尽管有关猫科学家的出版物在过去的10年中有所增加,但使用MSC和MSC 的大量研究和少量研究1只有26个(46.2%)中的12个发表的研究描述了对猫的MSC产品的给药,其中包括对照组,这些实验 - TAL和临床试验使用了7个细胞来源,9条管理途径,12辆送货车辆,12辆送货车辆,以及在健康的猫和猫中进行300倍范围的剂量,用于自然和诱导的猫的驾驶员研究。1尽管有关猫科学家的出版物在过去的10年中有所增加,但使用MSC和MSC