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服务表免疫肿瘤学：癌症免疫疗法革命刚刚开始
HBV小鼠模型：通过AAV载体转导HBV的免疫胜任动物，随着时间的推移，通过针对特定应用（直接抗病毒药或宿主靶向剂）定制的治疗方案，导致持续的病毒产物。疾病相关的终点包括：通过RT-PCR确定循环和肝脏病毒DNA和RNA；通过DDPCR和Southern印迹进行CCCDNA定量；分析病毒抗原HBEAG/ HBSAG；免疫浸润和细胞因子释放的分析；肝组织和AST/ALT评估的免疫历史学。
人类神经束膜细胞基因组 DNA
数量：5 µg 产品描述 人类神经束膜细胞基因组 DNA (HPNC gDNA) 是使用 Qiagen Allprep DNA/RNA Mini Kit 从早期传代人类神经束膜细胞中制备的。通过分光光度计和凝胶电泳测试基因组 DNA 的质量和纯度。基因组 DNA 可立即用于各种分析，包括：SNP 分析、DNA 甲基化分析、Southern 印迹和 PCR。ScienCell Research Laboratories 的基因组 DNA 对研究人员来说既方便又经济，因为它无需获取昂贵的组织来分离 DNA。质量控制
大型外泌体生产搅拌坦克生物反应器
挑战这项研究的目的是分析外泌体在体外将细胞毒性阿霉素（DOX）递送到乳腺癌细胞系的能力。外泌体，分别表达了一两个肿瘤的肽。这些肽显示在外泌体表面。研究包括：>通过蛋白质印迹，电子显微镜和尺寸分布分析对纯化的外泌体的表征>用DOX>功能测定的外泌体负荷优化，以比较不同乳腺癌细胞系和DOX负载oposomes的细胞毒性效应的不同外泌体类型的摄取。
人类神经束膜细胞基因组 DNA
数量：5 µg 产品描述 人类神经束膜细胞基因组 DNA (HPNC gDNA) 是使用 Qiagen Allprep DNA/RNA Mini Kit 从早期传代人类神经束膜细胞中制备的。通过分光光度计和凝胶电泳测试基因组 DNA 的质量和纯度。基因组 DNA 可随时用于各种分析，包括：SNP 分析、DNA 甲基化分析、Southern 印迹和 PCR。ScienCell Research Laboratories 的基因组 DNA 对研究人员来说既方便又经济，因为它无需获取昂贵的组织来分离 DNA。质量控制
博士后研究助理（B级） - Telethon Kids Institute
实验室研究，包括但不限于：o蛋白分析，例如。免疫印迹，免疫沉淀O组织学，例如。组织加工，切片（石蜡，冷冻），染色，免疫组织化学o体外细胞培养，例如细胞系，小鼠或人类原代细胞o动物的工作，例如。颅内植入，福利监测，组织收获，通过多种途径（IP，IV，SC，口服粘液）对动物的物质给药，动物成像O分子分析，例如。DNA/RNA提取和QC（定量，可视化），基因分型，序列分析，测定设计，Q-PCR
2024; 15(7): 1983-1993. doi: 10.7150/jca.92823 研究论文 HKDC1 增强胰腺腺癌的增殖、迁移和糖酵解
背景：了解胰腺腺癌 (PAAD) 发展的分子机制对于治疗这种疾病至关重要，因为目前的预后和治疗选择都令人非常沮丧。目的：本研究旨在研究己糖激酶结构域 1 (HKDC1) 在 PAAD 进展中的作用。方法：本研究利用生物信息学技术评估 HKDC1 的表达与临床特征之间的关系。通过体外实验研究 HKDC1 在 PAAD 中的分子机制和生物学功能。结果：本研究的结果表明，HKDC1 在各种类型的人类癌症中表达增加，并且 PAAD 中 HKDC1 表达升高与不良预后之间存在显著相关性。根据单变量和多变量 Cox 回归分析的结果，HKDC1 可以作为诊断患有 PAAD 的个体的独立预后指标。经过计算，我们发现HKDC1高表达组表现出较低的免疫学评分和较高的ESTIMATE评分，这表明免疫浸润评分存在差异。为了验证HKDC1在PAAD细胞系中的表达，我们通过qPCR和蛋白印迹分析了PAAD细胞系。还通过蛋白质印迹检测了人PAAD组织中HKDC1的表达。此外，我们通过菌落形成、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EdU）、transwell和划痕愈合试验等实验探索了HKDC1在PAAD中的作用。在我们的研究中，我们发现在PAAD细胞类型中HKDC1表达的中断导致细胞生长速度降低并抑制细胞运动和侵袭。结论：总之，我们的研究结果表明HKDC1对PAAD的肿瘤微环境（TME）有显著影响，可能成为PAAD治疗的一个有希望的靶点，为PAAD的管理提供了新的视角。
punicalagin通过调节细胞增殖，凋亡和侵袭
摘要目的：这项研究的目的是探索punicalagin的抗癌作用，Punicalagin是一种从Punica Granatum L.分离出的丰富的生物活性单宁化合物，在三种结肠癌细胞系上，即HCT 116，HT-29和LOVO。研究设计：在不同时期内用不同浓度的Punicalagin处理正常和结肠癌细胞。数据收集和分析：用CCK-8测定法测量细胞活力。使用膜联蛋白V和细胞死亡试剂盒和细胞入侵分析试剂盒分析了程序性细胞死亡和侵袭。通过蛋白质印迹测量了活性caspase-3，MMP-2，MMP-9，蜗牛和slug的表达。结果：细胞活力分析的结果表明，punicalagin对结肠癌细胞是细胞毒性的，但这不是以剂量和时间依赖性方式对正常细胞的细胞。此外，Punicalagin诱导结肠癌细胞的凋亡（如早期和晚期凋亡中结直肠癌细胞的累积百分比所示）。发现caspase-3治疗后caspase-3活性增加。Western印迹结果还表明，Punicalagin增加了激活的caspase-3的表现。相反，Punicalagin抑制了结肠癌细胞的侵袭。 此外，用Punicalagin治疗结肠癌细胞抑制了MMP-2，MMP-9，蜗牛和SLUG的表达。 结论：这些结果表明，caspase-3的激活以及MMP-2，MMP-9，Snail和Slug的抑制参与了Punicalagin对结肠癌细胞的影响。相反，Punicalagin抑制了结肠癌细胞的侵袭。此外，用Punicalagin治疗结肠癌细胞抑制了MMP-2，MMP-9，蜗牛和SLUG的表达。结论：这些结果表明，caspase-3的激活以及MMP-2，MMP-9，Snail和Slug的抑制参与了Punicalagin对结肠癌细胞的影响。
ik-595，一种最佳的MEK-RAF复合物，在RAS/RAF驱动的肿瘤中驱动广泛而有效的抗肿瘤活性
图1。a）IK-595的晶体结构与BRAF和MEK复合在一起。IK-595在BRAF蛋白中诱导A C螺旋“ OUT”无活性构象。 b）用IK-595，Trametinib，avutometinib或Trametiglue处理的HCT-116（KRAS G13D）细胞中MEK-CRAF共免疫沉淀的蛋白质印迹4小时。 c）MEK免疫沉淀物的质谱法证明了用DMSO，IK-595，Trametinib或Avutometinib处理的ASPC-1（KRAS G12D）细胞中的MEK-ARAF相互作用。 d）在HCT-116（BRAF WILD-TYPE），HT-29（BRAF V600E），NCI-H1755（NCI-H1755（BRAF STALS II）（BRAF STALS II）和NCI-H1666（NCI-H1666（NCI-H1666（BRAF Class III）），IK-595治疗4小时后，MEK-BRAF共免疫沉积量化了MEK-BRAF共免疫沉积。 所有化合物均以各自的IC 90浓度处理。IK-595在BRAF蛋白中诱导A C螺旋“ OUT”无活性构象。b）用IK-595，Trametinib，avutometinib或Trametiglue处理的HCT-116（KRAS G13D）细胞中MEK-CRAF共免疫沉淀的蛋白质印迹4小时。c）MEK免疫沉淀物的质谱法证明了用DMSO，IK-595，Trametinib或Avutometinib处理的ASPC-1（KRAS G12D）细胞中的MEK-ARAF相互作用。d）在HCT-116（BRAF WILD-TYPE），HT-29（BRAF V600E），NCI-H1755（NCI-H1755（BRAF STALS II）（BRAF STALS II）和NCI-H1666（NCI-H1666（NCI-H1666（BRAF Class III）），IK-595治疗4小时后，MEK-BRAF共免疫沉积量化了MEK-BRAF共免疫沉积。所有化合物均以各自的IC 90浓度处理。
加速 PROTAC 药物研发
PROTAC 已成为一类新型药物，它可以通过劫持泛素蛋白酶体系统来靶向“不可成药”的蛋白质组。尽管 PROTAC 取得了成功，但目前大多数 PROTAC 都与有限数量的 E3 连接酶相互作用，阻碍了它们扩展到许多具有挑战性的治疗用途。目前，PROTAC 药物发现严重依赖于传统的蛋白质印迹和报告基因检测，这两种方法分别不敏感且容易出现伪影。无需外部标签即可监测 PROTAC 的真实功能（即靶标在生理表达水平上的泛素化和随后的降解）的新型可靠方法对于加速 PROTAC 发现过程和解决许多未满足的治疗领域至关重要。在本研究中，我们开发了一种新的高通量筛选技术，使用“TUBE”作为泛素结合实体，以出色的灵敏度监测 PROTAC 介导的天然靶蛋白多泛素化。作为概念验证，包括 BRD3、Aurora A 激酶和 KRAS 在内的靶标被用于证明泛素化动力学可以可靠地确定具有可变配体和接头的 PROTAC 的等级效力。PROTAC 处理的细胞裂解物具有最高水平的内源性靶蛋白泛素化 - 称为“Ub Max” - 与从传统蛋白质印迹获得的 DC 50 值显示出极好的相关性，并具有高通量、提供更高的灵敏度和减少技术错误的额外优势。© 2022 作者。由 Elsevier Inc. 出版。这是一篇根据 CC BY-NC-ND 许可开放获取的文章（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）。