Tomoya Kitajima博士是染色体隔离实验室的团队负责人。他的团队专注于哺乳动物卵母细胞减数分裂期间的染色体隔离机制,在受精的哺乳动物卵中的有丝分裂过程中,以及卵母细胞和受精卵中与年龄相关的误差。他的实验室使用了小鼠卵母细胞的高通量和高分辨率实时成像技术,并结合了微观渗透和基因工程方法。
• 辅助孵化 – 在实验室中将胚胎的外层透明带变薄或穿孔,以协助胚胎“孵化” • 配子输卵管内移植 (GIFT) – 将成熟的卵母细胞和精子直接放入女性的输卵管,以便体内(体内)进行受精。虽然这种程序曾经很流行,但现在只占 ART 周期的很小一部分。 • 植入前基因检测 (PGT) – 在胚胎移植前对卵母细胞或胚胎的 DNA 进行染色体异常或遗传疾病检测。 • 卵母细胞捐赠 – 女性患者将卵母细胞捐赠给他人。 • 卵母细胞/胚胎接受者 – 女性患者从另一个人/夫妇那里接受卵母细胞或胚胎。 • 冷冻保存和储存在初始新鲜治疗周期中未移植的胚胎。一旦解冻或加热,胚胎就可以在后续治疗周期中移植。冷冻保存技术包括传统的慢速冷冻法和玻璃化冷冻法。玻璃化冷冻法可用于冷冻保存配子和胚胎,并使用超快速温度变化并暴露于更高浓度的冷冻保护剂。• 冷冻保存和储存卵母细胞和胚胎,用于医疗和非医疗生育保存• 全冷冻周期,其中所有由 OPU 产生的卵母细胞或胚胎都被冷冻保存以备将来使用。• 代孕安排 - 一名女性患者(称为“妊娠载体”或“代孕者”)同意为另一个人或夫妇(称为“意向父母”)怀孕,并打算由意向父母抚养孩子。用于在周期中创造胚胎的卵母细胞和/或精子可以来自意向父母或捐赠者。除了 ART 之外,新西兰还开展其他生育治疗。人工授精是一种将精子放入女性生殖道(例如宫颈内或宫内)的治疗方法,可与控制性卵巢刺激或自然周期一起使用。人工授精可以使用伴侣的精子或捐赠的精子进行,也称为“捐献精子授精”(DI)。只有在 ART 部门进行的 DI 才会报告给 ANZARD。
在哺乳动物卵母细胞中建立适当的DNA甲基化景观对于母体的印记和胚胎发育很重要。de de dNA甲基化,该DNA甲基转移酶DNMT3A具有ATRX-DNMT3-DNMT3L(ADD)结构域,该域与组蛋白H3尾巴相互作用,在赖氨酸-4处未甲基化的组蛋白H3尾部(H3K4ME0)。该结构域通常通过分子内相互作用阻止甲基转移酶结构域,并与组蛋白H3K4me0结合释放自身抑制。然而,H3K4ME0在染色质中广泛存在,并且添加 - 固定相互作用的作用尚未在体内研究。我们在此表明,小鼠DNMT3A的添加域中的氨基酸取代会导致矮人。卵母细胞显示CG甲基化的镶嵌性丧失和几乎完全的非CG甲基化丧失。源自此类卵母细胞的胚胎在中胎妊娠中死亡,并在印记控制区域内具有随机,通常是全或无人类型的CG-甲基化损失,并且链接基因的misexpression。随机损失是一个两步的过程,在裂解阶段胚胎中发生损失,并在植入后重新恢复。这些结果突出了添加域在有效且可能是过程中,从头甲基化和构成一种模型,是生殖细胞中表观遗传扰动对下一代的随机遗传的模型。
背景:在动物中广泛实践生发囊泡完整卵母细胞的生发囊泡完整卵母细胞的体外成熟(IVM)。在人类辅助繁殖中,通常保留保存生育能力或禁忌卵巢刺激的地方。标准实践将血清和/或白蛋白形式的复杂蛋白质(CP)纳入IVM培养基中,以模仿卵巢卵泡环境。然而,CP的未固定性质,以及批处理变异和有关其起源的伦理问题,需要开发更明确的表述。卵泡流体的已知成分,褪黑激素具有多方面的作用,包括代谢调节剂和抗氧化剂。在某些情况下,它可以增强卵母细胞的成熟。在发育中,生发剂完整的卵母细胞容易出现非整倍和表观遗传失调。
研究设计,大小,持续时间:在小鼠模型中首先优化了CRISPR-CAS9对诱导靶向基因突变的效率。在B6D2F1菌株中比较了两种CRISPR-CAS9递送方法:S期注射(Zygote阶段)(N¼135)ver- SUS Sus-Sus II期(M相)注射(卵母细胞阶段)(卵母细胞阶段)(N¼23)。包括四个对照组:未注射的培养基控制Zygotes(N¼43)/卵母细胞(N¼48);伪造的Zygotes(n¼45)/卵母细胞(n¼47); Cas9-蛋白注射的Zygotes(n¼23);和CAS9蛋白和加扰引导RNA(GRNA)注射的Zygotes(n¼27)。在POU5F1靶向的Zygotes(N¼37),培养基控制Zygotes(N¼19)和假注射的Zygotes(n¼15)中进行了免疫荧光分析(N¼19)(n¼15)。评估POU5F1 -NULL胚胎进一步发展体外的能力,将其他组的POU5F1靶标合子(N¼29)和培养基对照合子(N¼30)培养为种植体后植入阶段(8.5 dpf)。旨在确定归因于菌株变化的POU5F1 null胚胎的发育能力差异,第二个小鼠菌株的Zygotes -B6CBA(n¼52)的目标是针对的。总体而言,在IVM(中期II期)(n¼101)之后,在人卵母细胞中应用了优化的方法。对照组由注射的精子(ICSI)IVM卵母细胞(N¼33)组成。在注入人类CRISPR(n¼10)和培养基对照(n¼9)人类胚胎中进行免疫荧光分析。
证据总结与分析:UpToDate 对“体外受精:临床问题和疑问概述”(Ho) 的评论指出,“体外受精 (IVF) 是指一种复杂的程序,旨在克服不孕症并通过干预直接产生活产;它是一种辅助生殖技术 (ART)。一般来说,IVF 包括使用多种生育药物刺激卵巢并从卵泡中取出卵母细胞。取出的卵母细胞可以冷冻保存以备将来使用,也可以在实验室中受精(即体外受精)以产生胚胎。将产生的胚胎移植到子宫腔中。这些步骤通常发生在大约两周的时间间隔内,这称为 IVF 周期。 ART 包括“所有干预措施,包括为了生殖目的而对人类卵母细胞和精子或胚胎进行体外处理。这包括但不限于体外受精 (IVF) 和胚胎移植 (ET)、卵胞浆内单精子注射 (ICSI)、胚胎活检、植入前基因检测 (PGT)、辅助孵化、配子输卵管内移植、合子输卵管内移植、配子和胚胎冷冻保存、精液、卵母细胞和胚胎捐赠以及妊娠载体周期。体外受精 (IVF) 是“涉及配子体外受精的一系列程序。它包括传统的体外受精和 ICSI”。IVF 涉及刺激女性卵巢产生卵母细胞、取卵、体外受精和将产生的胚胎移植到子宫。胞浆内单精子注射 (ICSI) 是“将单个精子注射到卵母细胞胞浆中的程序”。该程序通常用于严重的男性不育症。宫腔内授精 (IUI) 描述“将实验室处理的精子放入子宫以尝试怀孕的程序”。IVF,包括胞浆内单精子注射 (ICSI),适用于患有严重男性不育症的个体。
氧化石墨烯(GO)和Fe 3 O 4超级顺磁性物质是某些应用(例如药物输送)的良好候选者。已经表明,将Fe 3 O 4与石墨烯氧化物结合起来提高了GO的生物学效率。使用新颖的辅助生殖技术(例如促性腺激素注射)能够帮助不育人的生育能力,但是这些方法和高成本的副作用仍然是问题。本研究的目的是研究氧化石墨烯(MGO)对小鼠卵母细胞体内成熟的影响。三十六个星期至8周的女性海军医学研究所(NMRI)小鼠用腹膜内(I.P)注射MGO与激素混合。I.P. 12小时注射MGO与PMSG和HCG混合,在每组中计数从左输卵管获得的中期II(MII)卵母细胞的数量。此外,还研究了谷胱甘肽的免疫环化学染色和卵巢的形态分析。这项研究的结果表明,同时使用MGO,怀孕的母马血清促性腺激素(PMSG)和人类绒毛膜促性腺激素(HCG)会增加MII卵母细胞的数量,并有助于增加卵母细胞的成熟。可以得出结论,MGO可以提高由于血清激素和生长因子吸附的增加,因此可以提高超级排卵激素的效率。
放射治疗会破坏肿瘤细胞,但也会威胁到周围正常细胞的完整性和存活率。因此,接受放射治疗的妇女可能会出现永久性卵巢损伤,导致生育能力受损。本研究的目的是调查用于治疗人类卵巢癌的治疗剂量电离辐射 (IR) 对作为实验模型的牛卵丘-卵母细胞复合体 (COC) 的影响。牛卵巢分别暴露于 0.9 Gy、1.8 Gy、3.6 Gy 或 18.6 Gy IR,然后收集 COC 并用于评估:(a) 卵母细胞核成熟;(b) 磷酸化 H2A.X (γH2AX) 的存在,作为 DNA 双链断裂 (DSB) 的指标;以及 (c) 参与 DNA 修复 ( TP53BP1、RAD52、ATM、XRCC6 和 XRCC5 ) 和细胞凋亡 ( BAX ) 的基因表达。本研究中测试的辐射剂量对核成熟没有不利影响,也没有增加卵母细胞中的 γH2AX。然而,IR 处理改变了 RAD52 (RAD52 同源物,DNA 修复蛋白) 和 BAX (BCL2 相关 X 蛋白) 的 mRNA 丰度。我们得出结论,虽然 IR 剂量对卵母细胞核成熟和 DNA 损伤没有明显影响,但参与 DNA 修复和细胞凋亡的分子通路受到卵丘细胞中 IR 暴露的影响。
Annelid发育中的祖细胞:卵母细胞端粒细胞是Annelid胚胎中的大细胞,它们不对称地分裂以形成许多较小的爆炸细胞,然后将其增殖并分化为节段组织。这些细胞在Annelids的发展中起着至关重要的作用,在水ches和其他寡头中详细研究了细胞细胞。在第二轮后,五对卵母细胞是从d象限的大粒子中指定的。每对产生外胚层或中胚层组织,四对形成外胚层组织,一对形成中胚层组织。端粒具有两个不同的细胞质结构域:端质和叶片质。端质包含核,核糖体,线粒体和其他细胞器,而卵黄质主要由蛋黄血小板组成。在细胞分裂后,只有端质被传递到子干细胞上。O和P型蛋白细胞是从形成等效组的两个相同的前体中指定的。来自周围细胞的信号决定了雌胆母细胞的命运及其后代的命运,Q Bandlet与相邻的O/P Bandlet之间的相互作用引起了P命运。在某些物种中,例如helobdella triserialis,覆盖细胞的临时上皮在诱导命运中起作用。实验结果表明,在某些蠕虫中,O和p没有对等效组,而P谱系在其出生时从O/P Protelblast阶段开始。在水ech中,卵母细胞是引起爆炸细胞的细胞。在其他物种(例如helobdella ustensis)中,其他信号促进了P谱系分化,包括来自Q谱系细胞的骨形态蛋白分子信号传导。有四种类型的卵母细胞:N和Q,每个片段贡献了两个爆炸细胞; O,P和M,每个段覆盖一个分段边界的一个爆炸细胞。随着开发的进展,每个包含64个爆炸细胞的N和Q带子都滑过O,P和M带子,每个Bandlet都包含32个细胞。此动作允许在所有带子进入完整寄存器之前指定每个带子中的分段边界。卵母细胞负责产生水ech体的不同部分。N和Q型母细胞每段贡献两个爆炸细胞,一个用于前半部分,一个在后半部分。O,P和M型蛋白细胞贡献一个跨越节段边界的爆炸单元。水ches中的分割过程很复杂,涉及卵母细胞的运动和不同段的形成。对卵母细胞的研究为这组生物体的发展和进化机理提供了宝贵的见解。
背景:Future Fertility 的 Violet 是一种人工智能图像分析卵子评估工具,适用于寻求选择性卵母细胞保存的患者。该技术用于识别成熟卵子的相对活力,从而为每位患者量身定制个性化治疗计划。该软件检测卵母细胞中的模式,以便更好地了解卵子质量。对于已知存在与卵子质量相关的问题的老年患者,它可能特别有影响,特别是考虑到他们可能没有太多机会进行多个周期。虽然我们目前有评估精子质量和胚胎质量的方法,但确定成功卵母细胞的指导方针非常有限。Violet 是目前唯一用于预测卵子质量的客观评估工具。目前的研究表明,Violet 比训练有素的胚胎学家高出 20% 以上,可重复性为 100%。需要更多数据来评估 Violet 的可行性,以便更好地评估其在改善 IVF 结果方面提供的价值。