确保为所有样品和 2 个标准品提供足够的工作停止位。 2. 将 190 µl 工作原液分装到 Qubit 管中,用于两个标准品。 3. 将 198 µl 工作原液分装到 Qubit 管中,用于每个样品。 4. 向每个标准品管中加入 10 µl 适当的标准品。加入后短暂涡旋。应在样品之前完成,以确保在室温下孵育至少 3 分钟 5. 将 2 µl 的每个样品加入每个样品管中。加入后短暂涡旋。 6. 在仪器上选择左下方的 home,然后选择 dsDNA BR 检测,然后选择“是”以读取新标准品。如果打算将数据传输到存储卡,最好先通过选择右下方的数据然后清除数据来清除数据。 7. 按照屏幕上的说明读取两个标准品和第一个样品。温度会影响检测,因此在将管放入仪器之前,请避免用手过度握住管子以使其变热,并在放入后迅速选择“读取”
8 程序 ................................................................................................................................................................................................................ 6 8.1 一般建议 ................................................................................................................................................................................ 6 8.2 菌株制备 ................................................................................................................................................................................ 6 8.2.1 总则 ................................................................................................................................................................................ 6 8.2.2 细菌和白色念珠菌悬浮液的制备 ............................................................................................................. 9 8.2.3 巴西曲霉孢子原液悬浮液的制备 ............................................................................................................. 9 8.2.4 校准悬浮液浓度的控制 ............................................................................................................................. 10 8.3 无微生物生长 ................................................................................................................................................................ 10 8.3.1 固体培养基 ................................................................................................................................................................ 10 8.3.2 液体培养基和稀释液 ................................................................................................................................................ 10 8.4 生长促进................................................................................................................................................................................ 10 8.4.1 固体培养基 ................................................................................................................................................................ 10 8.4.2 液体培养基 ................................................................................................................................................................ 11 8.5 选择性特性 ................................................................................................................................................................ 11 8.5.1 固体培养基 — 用于指示性特性 ............................................................................................. 11 8.5.2 固体培养基 — 用于抑制特性 ............................................................................................................. 11
由于单片石墨烯具有重量轻、机械强度高、电导率高等特性,石墨烯纤维引起了越来越多的关注。因此,石墨烯纤维被认为是一种很有前途的纤维电子电极材料。氧化石墨烯(GO)分散体的湿纺是目前合成石墨烯纤维最常用的方法。除了使用GO水分散体外,开发基于有机溶剂的GO分散体也很重要,因为这种分散体比水介质更能分散功能性纳米材料。在本期的ACS Central Science中,Kim和同事报道,在GO分散的有机溶剂中添加少量水可以有效地使GO片水合,1从而促进高度稳定的液晶GO相和电化学剥离石墨烯(EG)的形成(图1)。该方法可提供一种通用且有效的策略,从GO有机分散体中生产高性能混合石墨烯纤维。以前,GO纺丝原液是采用典型的湿纺工艺制备的,即将GO片材分散形成稳定的溶液,然后将其注入凝固浴中生产GO纤维。用还原剂或热处理还原GO片材后得到石墨烯纤维。为了赋予石墨烯纤维增强的机械强度和电导率,必须在GO纺丝原液中实现稳定的液晶相,以便将高度排列的GO片材有效地转移到石墨烯纤维中。2-4
材料和步骤 微量离心管 20g/l CTAB 研钵和研杵 1.4M NaCl 离心机 0.1M Tris-HCl pH 计 20mM Na2EDTA 称重天平 dH2O 移液器吸头 硼酸 刮铲 Tris 碱 称量皿/纸 EDTA 移液器 DNA 大小标准(Ladder DNA) 烧杯-烧瓶 样品(生菜叶) 6x 凝胶上样缓冲液 琼脂糖 溴化乙锭(0.5 ug /ml) 1X TBE 缓冲液 A. 制备 0.5 M EDTA 原液(500 ml) 称量 93.05 g EDTA 并将其溶解在 200 ml dH 2 O 中,同时用磁力搅拌。用 NaOH 将 pH 值调节至 8.4。用 dH 2 O 将体积调节至 500 ml。
不当处置潜在危险化学品是违法的,可能会产生严重后果。基恩州立学院坚定地致力于安全妥善地处置所有危险废物。本文件提供了正确处置危险和非危险废物流(酸/碱、化学品、生物废物、锐器等)的具体说明。在任何情况下,都不应为了“省钱”、为了“方便”或由于计划准备、操作或设计方面的粗心而将危险废物排放到环境中。环境健康与安全部门随时可以提供预防或解决此类问题的帮助。请记住给所有容器贴上标签,无论大小。给原液贴标签是必不可少的。所有标签都必须包括公认的名称(无化学式)、特殊警告、个人责任和制作日期。当科学家计划离开学院时,请联系 EHS 帮助您清理实验室,以便识别未知物。
图表列表 图 1.1:限制性酶的发现时间表及一般历史里程碑……………………………………………………………………………………………………… 2 图 1.2:中心法则图…………………………………………………………………… 4 图 1.3:不同类型的限制性酶;ZFN 和 TALEN 序列特异性分别与特定三联体或有限特定 bp 序列有关。粉红色高亮表示所示限制性酶或内切酶的结合位点。粗线表示切割位点………………………………………………………… 5 图 1.4:CRISPR-Cas9 系统的功能组件(Bortesi, L. 和 Fischer, R.,2014 年)。面板 (a) 显示了 Cas9 正常发挥功能所必需的各个 RNA 组件。图 (b) 显示 RNA 成分连接在一起形成 sgRNA 序列。……………………………………………………………………...… 8 图 3.1:设计引物的 Lambda DNA 凝胶电泳(目标大小 1000bp)。孔 1 显示大小标准(以“M 表示),孔 2 和 3 显示成功 PCR …………………………………………………………………………………..... 20 图 3.2:基于 Origene 的 CRISPR-Cas9 方案的凝胶电泳。含有梯状物的孔标记为“L”。含有未切割的 PCR 产物储备孔标记为“P”。标签 2/3、1X 和 4X 表示反应中使用的 DNA 浓度。标准浓度为 1X。孔 2-4、6-8、10-12、14-16、18 和 19 显示 CRISPR/Cas9 反应产物 .……………………………….…….….… 21 图 3.3:基于 Origene 的改良版 CRISPR-Cas9 方案的凝胶电泳图,其中模板 DNA 浓度和 Cas9 试剂浓度均增加。含有梯度的孔标记为“L”。含有未切割的 PCR 产物原料孔标记为“P”。孔 3-6、7、8、10-13、14 和 15 含有 CRISPR/Cas9 反应产物。所有反应均含有 10uL 模板 DNA .…………………………………………………..……………………..……...…. 22 图 3.4:基于 IDT 的改良版 CRISPR-Cas9 方案的凝胶电泳图。含有梯状物的孔标有“L”。含有未切割的 PCR 原液产物的孔标有“P”。孔 2 不含任何产物。孔 3-6、7-10 和 11-14 含有 CRISPR/Cas9 反应产物。所有反应均含有 tracrRNA。孔 11-14 含有 3 倍量(uL)的模板 DNA……… ...