•条纹是在培养基表面上用反式针头传播微生物培养的过程。•通过火焰对接种针头/环进行灭菌,使其变热,并使其冷却30秒。•样品以这种方式提供一系列稀释的方式。•目的 - 稀释innoculum以获得单独的殖民地。•可以通过将条纹板片到新板的条纹良好的菌落条纹来完成。•将肉汤培养在左手中握住肉汤。•在燃烧器火焰上对接种针的电线环消毒。•用右手的小指卸下肉汤培养管的棉塞。•立即燃烧试管的口。•插入电线环以形成薄膜并更换棉塞。•循环中的薄膜通过牢固地向后移动并向前移动循环,以锯齿形的方式划痕。•应注意不要将循环牢固地压在琼脂表面上。•在所需温度下将培养皿中的培养皿孵育。•细菌的生长在条纹标记上可见(过夜孵化后)。
摘要。背景/目标:三重阴性乳腺癌(TNBC)是一种积极的乳腺癌类型,化疗靶标有限。这项研究评估了新型Imidazo [2,1-B]基于奥恶唑的抑制作用迅速加速的纤维肉瘤(RAF)抑制剂,KIST0215-1和KIST0215-2,对上皮细胞转化和TNBC肿瘤的抑制作用。材料和方法:进行了免疫印迹,BRDU掺入分析,报告基因测定和软琼脂测定分析。体内效应。结果:KIST0215-1和KIST0215-2抑制了EGF在MDA-MB-231细胞中诱导的RAFS-MEK1/2-ERK1/2信号传导途径,这抑制了C-FOS转录活性和激活剂蛋白-1反式激活活性。KIST0215-1和KIST0215-2还防止了EGF诱导的JB6 C141小鼠表皮细胞的肿瘤转化,并始终抑制BALB/C小鼠中4T1细胞形成的肿瘤的生长。结论:使用KIST0215-1和KIST0215-2抑制RAF激酶是治疗TNBC的有前途的化学治疗策略。
避免饱和脂肪和反式脂肪也可能有助于防止与年龄相关的记忆力减退。至于饮食中的脂肪含量,对心脏有益的食物对大脑也有益。降低饱和脂肪和胆固醇水平可以保护动脉免于动脉粥样硬化,也可能有助于保护脑细胞。鲑鱼、鳟鱼、鲱鱼、沙丁鱼、鲭鱼和金枪鱼等冷水肥鱼中含有的 Omega-3 脂肪酸是一种对大脑有益的脂肪。每周吃两到三次冷水肥鱼是获取 Omega-3 脂肪酸的好方法。B 族维生素,如烟酸和叶酸,对大脑功能很重要,可能有助于保持头脑敏锐。提供 B 族维生素的食物包括瘦肉、鱼、豆类、坚果和种子、乳制品、谷物和绿叶蔬菜。B 族维生素似乎有助于控制炎症,并可能在新脑细胞的发育中发挥作用。
摘要 近 90% 的人类致病突变是由微小的基因变异引起的,有效纠正这些错误的方法至关重要。进行微小 DNA 改变的一种方法是提供单链寡脱氧核苷酸 (ssODN),该单链寡脱氧核苷酸包含一个改变,并在基因组的目标位点处与靶向双链断裂 (DSB) 相结合。将 ssODN 供体与 CRISPR-Cas9 介导的 DSB 结合是引入微小改变的最简化方法之一。然而,在许多系统中,这种方法效率低下,并且会在基因连接处引入不精确的修复。我们在此报告一种使用 ssODN 和 CRISPR-Cas9 的时空定位来改进基因改变的技术。我们表明,通过将 ssODN 模板与反式激活 RNA (tracrRNA) 融合,我们可以恢复精确的基因改变,并且在体外和体内的整合度和精确度都有所提高。最后,我们表明该技术可用于与其他基因编辑工具(如转录激活因子如效应核酸酶)一起增强基因转换。
CRISPR 技术有两个基本生物学组成部分(图 1)。2 第一组组成部分是称为 CRISPR 相关蛋白 (Cas) 的蛋白质,其功能如同分子剪刀,可启动 DNA 的双链断裂。第二组组成部分是向导 RNA,由两部分组成:CRISPR RNA (crRNA) 和反式激活 CRISPR RNA (tracrRNA)。向导 RNA 会瞄准 DNA 上 Cas 进行断裂的确切位点。CRISPR 介导的编辑机制主要有三种类型,可产生基因操作。首先,CRISPR 可在 DNA 中造成单次切割,破坏原始 DNA 序列并导致基因失活。其次,可以使用两个向导 RNA 删除较大的 DNA 片段。在每个 DNA 位点进行切割后,细胞修复过程会将剩余 DNA 片段的不同末端连接起来。第三,可以将 DNA 模板添加到 CRISPR 机制中,使细胞能够纠正基因,甚至插入新基因。
gRNA(向导 RNA):Cas9 使用的 CRISPR RNA(crRNA)包含 20 个碱基的原间隔元件和与 tracrRNA 互补的额外核苷酸。反式激活 CRISPR RNA(tracrRNA)与 crRNA 的互补区域杂交。组合的 crRNA 和 tracrRNA 与 Cas9 内切酶相互作用,激活编辑复合物以在目标基因组内的特定位点产生双链断裂。这 2 种天然 RNA 分子可以合成生成,用于基因组编辑实验。IDT 科学家已经修改了这些 RNA 的长度和组成,以优化基因组编辑效率,尤其是在与 CRISPR 核酸酶预先复合并以 RNP 形式递送到细胞时。或者,可以使用单向导 RNA(sgRNA)代替 crRNA 和 tracrRNA 的组合。sgRNA 包含通过发夹状环序列连接的 crRNA 和 tracrRNA 序列。向导 RNA(gRNA)可以是 crRNA:tracrRNA 复合物,也可以只是 sgRNA。
摘要:无法修复受损的 DNA 会严重损害任何生物体的完整性。在真核生物中,DNA 损伤反应 (DDR) 在细胞核内以非随机方式在染色质(一种紧密组织的 DNA-组蛋白复合物)中起作用。因此,染色质会协调各种细胞过程,包括修复。在这里,我们检查 DNA 损伤之前、期间和之后的染色质状况,重点关注双链断裂 (DSB)。我们研究染色质在修复过程中是如何被修改的,不仅在受损区域周围(顺式),而且在全基因组范围内(反式)。最近的证据突出了一个复杂的状况,其中不同的染色质参数(硬度、压缩度、环)被暂时修改,为 DDR 的每个特定阶段定义“代码”。我们说明了 DDR 的一个新颖的方面,其中染色质修饰有助于 DSB 损伤染色质以及未损伤染色质的移动,从而确保 DSB 的动员、聚集和修复过程。
呼吸道合胞病毒 (RSV) 是一种有包膜的负链单链 RNA 病毒,属于单链反式病毒目肺病毒科正肺病毒属 (Rima 等人 2017)。病毒上的两种表面糖蛋白在细胞感染中起重要作用。附着糖蛋白 G 将病毒与宿主细胞结合,三聚体融合 (F) 糖蛋白将病毒包膜与宿主细胞的质膜连接起来,从而使病毒可以进入宿主细胞。F 蛋白还能刺激受感染细胞的质膜融合,形成多核合胞体,这可以在组织培养中观察到。根据 G 蛋白的结构变异,已鉴定出 RSV 的两种主要亚型(A 和 B,有时称为亚组)。每种亚型的优势会随着连续的季节而发生变化;研究发现亚型和疾病严重程度之间的关系不一致(参见 Ciarlitto 等人,2019 年)。
摘要 - 稳态视觉诱发电位(SSVEP)当前是脑部计算机界面(BCI)中使用最广泛的范例之一。尽管SSVEP-BCI的特征是它们的高且稳健的分类性能,但从用户体验的角度来看,反式刺激的重复表现是不舒服的。的确,SSVEP刺激的低水平视觉特征使它们随着时间的流逝而紧张,并且可能会破坏需要持续关注的任务。他们甚至可以诱导癫痫发作。本研究探讨了刺激幅度深度(90%的幅度降低),以设计SSVEP刺激,以改善用户舒适性的解决方案。在低振幅和标准的全幅度SSVEP刺激之间,系统比较了不同管道获得的分类精度。结果揭示了使用与任务相关的组件分析(TRCA)分类方法的高(99.8%)和低幅度(80.2%)刺激的高分类精度。目前的发现证明了减少SSVEP刺激幅度以增加用户舒适度为透明BCI操作铺平道路的有效性。
(v),印度海得拉巴Medchal District。摘要:电动汽车(EVS)需要一个车载电池充电器单元和电池管理系统(BMS)单元,以平衡每个电池电池的电压水平。因此,提出的电路在一个方面使用了两个函数,因此消除了具有两个自传单元降低复杂性和降低组件计数的需求。电池均衡,旨在使内部电池的充电状态保持相同水平,对于最大化整个电池组的容量并使单元远离过度充电和过度放电损坏至关重要。在本文中,基于对双向转换器的分析,我们提出了一个模糊控制器来适应均衡电流。选择模糊控制器的输入作为充电状态,电荷的平均状态和总内部电阻的差异。通过多数指数(例如均衡速度,效率和细胞保护)评估所提出的均衡器的整体性能。拟议的电路作为反式转换器运行,并在电池充电期间实现功率因数校正。