摘要 在巴西,种植者生产有益微生物专供自己使用是一种被称为“农场生产”的做法。至于农场生物杀虫剂,它们最初在 20 世纪 70 年代用于防治多年生和半多年生作物的害虫,但自 2013 年以来,其使用范围已扩大到玉米、棉花和大豆等一年生作物的害虫。目前,数百万公顷的土地正在使用这些农场制剂进行处理。本地生产可降低成本、满足当地需求并减少对环境有害的化学农药的投入,从而有助于建立更可持续的农业生态系统。批评人士认为,如果不实施严格的质量控制措施,农场制剂可能会:(1) 被可能包括人类病原体的微生物污染,或 (2) 含有极少的活性成分,影响田间药效。细菌杀虫剂的农场发酵占主导地位,尤其是针对鳞翅目害虫的苏云金芽孢杆菌。然而,在过去的 5 年中,昆虫病原真菌的生产迅速增长,主要用于控制吸食汁液的昆虫,例如粉虱(Bemisia tabaci (Gennadius))和玉米叶蝉(Dalbulus maidis (DeLong and Wolcott))。相比之下,昆虫病毒的农场生产增长有限。巴西约 500 万农村生产者中的大多数拥有中小型农场,虽然绝大多数人仍然没有在农场生产生物农药,但这个话题已经引起了他们的兴趣。许多采用这种做法的种植者通常使用非无菌容器作为发酵罐,导致制剂质量差,并且有失败的案例报道。另一方面,一些非正式报告表明,即使受到污染,农场制剂也可能有效,这至少可以部分解释为液体培养基中的微生物池分泌的杀虫次生代谢物。事实上,关于这些微生物生物农药的功效和作用方式的信息不足。通常是大型农场生产的生物农药污染程度较低,其中一些农场的连续耕地面积超过 20,000 公顷,因为其中许多农场拥有先进的生产设施,并拥有专业知识和训练有素的员工。农场生物农药的使用预计将持续下去,但采用率将取决于多种因素,例如选择安全、毒性强的微生物菌株和实施合理的质量控制措施(符合新兴的巴西法规和国际标准)。本文介绍并讨论了农场生物杀虫剂的挑战和机遇。
EMB琼脂预期用途的亚甲基蓝色(EMB)琼脂是一种略有选择性和差异培养基,用于从临床和非临床标本中分离,培养和分化革兰氏阴性肠菌的分离,培养和分化。摘要曙红亚甲基蓝色(EMB)琼脂最初是由Holt-Harris和Teague开发的。eosin Y和亚甲基蓝是这些介质中掺入的两种染料。该配方在乳糖发酵和非乳糖发酵微生物的菌落之间产生了锐利而独特的分化。原理培养基包含曙红和亚甲基蓝色染料,这些染料在有限程度上抑制革兰氏阳性细菌。此外,这些染料还用作微生物对乳糖/蔗糖发酵响应的差异指标。蔗糖作为典型的乳糖发酵,革兰氏阴性芽孢杆菌的替代碳水化合物来源,有时可能不会发酵乳糖或可能缓慢发酵。乳糖发酵罐将降低培养基的pH值,从而导致由于甲基蓝欧染料染料复合物吸收而形成紫色的黑菌落,而乳糖非因子可能会通过氧化脱氨酸来提高周围培养基的pH值,从而溶解甲基蓝色蛋白质复合物中的甲基蓝色蛋白质复合物,从而在无色的上溶解了甲基化的蛋白质。配方 *成分G/L pryptone 10.0磷酸二磷酸二硫酸2.0乳糖5.0蔗糖5.0 Eosiny 0.4甲基蓝色0.065琼脂13.5最终pH(在25°C下)7.2±0.2 *调整为适合性能参数。储存和稳定存储在紧密闭合的容器和2°C-8°C下制备的培养基中脱水的培养基脱水。2。避免冷冻和过热。在标签上到期日之前使用。打开后,保持粉末状培养基闭合以避免补水。样品水样和临床样品的类型。样品收集和处理确保所有样品都正确标记。按照确定的准则遵循适当的技术来处理样品。某些样品可能需要特殊处理,例如立即制冷或免受光的保护,遵循标准程序。样品必须在允许的持续时间内存储和测试。使用后,必须在丢弃前高压灭菌对受污染的材料进行消毒。指示1。将35.96克粉末悬浮在1000毫升纯化 /蒸馏水中。彻底混合直至悬浮液均匀。3。频繁搅拌热以完全溶解粉末。避免过热。4。根据经过验证的循环,通过在121°C(15 psi)的121°C(15 psi)进行消毒15分钟。5。冷却至50°C,然后摇动培养基以氧化甲基蓝色并悬挂絮凝沉淀物。6。倒入无菌石油中。
紫罗兰色红胆葡萄糖(VRBG)琼脂脱水且现成的培养基1-在食物,动物饲料和环境样品中检测和列举肠杆菌科的使用和枚举。2 – C OMPOSITION - TYPICAL FORMULA * ( AFTER RECONSTITUTION WITH 1 L OF WATER ) DEHYDRATED AND READY - TO - USE MEDIUM Peptone 7.0 g Yeast extract 3.0 g Sodium chloride 5.0 g Bile salts No.3 1.5 g Glucose 10.0 g Neutral red 30.0 mg Crystal violet 2.0 mg Agar 15.0 g *The formula may be adjusted and/or supplemented to meet the required performances 标准。3-方法的含量和解释肠杆菌科的解释通常被食品制造商视为卫生指标,因此用于监测采取的预防措施的有效性。这也反映在肠杆菌科作为卫生指标的几种国家和国际标准或标准中。紫罗兰色胆汁葡萄糖(VRBG)琼脂是由摩森植物1设计的,用于枚举肠杆菌科,通过将葡萄糖添加到紫罗兰红胆汁乳糖琼脂中。Mossel等人后来的作品。2,3证明可以省略乳糖,从而导致称为VRBG琼脂的配方。紫罗兰色红胆葡萄糖琼脂,以进行探测和枚举,并采用富集前的步骤,并采用肠杆菌科的MPN技术,当期望寻求的微生物预计需要复苏,并且预计需要的数量低于100次以下或每米级测试。葡萄糖的同化会导致培养基的酸化,因此胆汁盐和中性红摄取的沉淀。ISO 21528-2 5推荐使用倒板技术枚举肠杆菌科,而预计所需的菌落数量为每毫升100毫升或测试样品的每克。肽为细菌生长提供了重要的生长因子;酵母提取物是用于生长刺激的B-VITAMINS复合物的来源。氯化钠保持渗透平衡。培养基依赖于选择性抑制性成分晶体紫和胆汁盐,这些含量抑制了革兰氏阳性细菌的生长以及指标系统葡萄糖和中性红色的生长。肠杆菌科以红色粉红色至红色紫色菌落的生长,周围是红色降水带。非葡萄糖发酵罐(例如,假单胞菌,阿科杆菌,阿尔卡吉尼等)表现出透明的无色菌落。除肠杆菌科以外的一些革兰氏阴性细菌可能会生长,但可能受到覆盖程序的限制。4a -d介质制剂(脱水培养基)悬浮41.5 g在1000毫升冷纯净的水中。热量频繁搅动以完全溶解。不要自压盐,也不要过热。冷却至47-50°C,混合并分布成无菌培养皿。4B- d的介于培养基(准备就绪 - 使用烧瓶 /试管)的液体液化液在100±2°C或温度控制的水浴(100°C)中的高压釜中烧瓶 /管的含量。或者,可以将瓶子或管子放入装有水的罐子中,该水放在热板上并煮沸。在加热之前稍微松开盖,以允许压力交换。冷却至47-50°C,然后将培养基倒入无菌条件下的无菌培养皿中。5-疗程特征脱水的培养基外观绿色紫色,细,均匀,自由流动的粉末溶液和准备好的中等外观紫罗兰,在20-25°C时清除最终pH 7.4±0.2 6- M M M原始物质 - 包装