乳酸链球菌肽是一种用作天然食品防腐剂的肽,本研究采用该肽开发新型纳米载体系统。使用 20 kHz 流通式超声技术成功制备了直径为 100 ± 20 nm 的稳定均匀的乳酸链球菌肽壳纳米乳剂 (NSNE)。NSNE 表现出有限的毒性、高杀菌活性和高载药能力 (EE 65 % w/w)。此外,乳酸链球菌肽壳还用于位点特异性附着重组产生的癌症靶向配体 (α HER2 LPETG IgG)。采用独特的两阶段(生物点击)方法,包括分选酶 A 介导的叠氮化物生物结合 (SMAB) 和应变促进叠氮化物炔烃环加成 (SPAAC) 反应,成功组装靶向 NSNE (NSNE DOX - α HER2 IgG) 并装载化疗药物阿霉素 (DOX)。最后,NSNE DOX - α HER2 IgG 显示出癌症特异性结合,并对表达 HER2 的肿瘤细胞具有增强的细胞毒性。
Barry Sharp Lester发明了“点击化学”。他赢得了2022年诺贝尔。点击化学具有许多优势。点击化学自成立以来已经塑造了当代化学的几个领域。点击化学帮助我们理解并制备复杂的分子。本评论检查了点击响应重要性。HUISGEN 1,3-偶极环加成技术产生1,4-二取代的1,2,3-三唑来自Azode和末端炔烃。该学科在研发方面也正在迅速扩大。本文对CC及其许多用途进行了快速审查。cui经常使用叠氮化物碱基环加成,因为它是强大的变更代理。根据研究和综述研究,通过CU(I)催化剂的生成点击化学有助于耦合过程。单击反应类型和组可以由炔烃,环棒和叠氮化物形成。这项研究涵盖了点击化学及其在药物发现中的应用,点击化学辅助类固醇取代,无金属点击反应,药物产生和三维生物印刷。我们还检查了点击化学的利弊和优势。
在原核生物和真核生物中,大多数已鉴定的离子泵 ATPase 属于以下三种结构类型之一。(i)F1Fo ATPase(F 型)存在于线粒体内膜(2)、叶绿体类囊体膜(3)和细菌细胞质膜(4)中。(ii)E1E2 ATPase(P 型)存在于真菌(5)、植物(6)和动物的细胞质膜中[包括 Na',K4-ATPase(7)和 H +,K + -ATPase(8)],以及肌细胞的肌浆网(Ca 2+-ATPase)(9)和细菌细胞质膜(K+-ATPase)(10,11)。 (iii) 已鉴定出第三类 ATPase(V 型),并从真菌和植物液泡(参考文献 12 及其中的参考文献)、包被囊泡(13、14)和嗜铬颗粒(15、16)的膜中部分纯化。正如 Mellman 等人(17)所建议的,我们使用术语“液泡 ATPase”来指代第三类 ATPase。F1Fo ATPase 通常使用 H+ 的电化学梯度(18)或偶尔使用 Na+ 梯度(19)来合成 ATP。这种类型的酶也表现出 ATPase 活性,在某些情况下仅在用蛋白酶活化后才表现出 ATPase 活性(20)。叠氮化物和 N,N'-二环己基碳二酰亚胺可抑制 F1Fo ATPase 的酶活性;寡霉素也可抑制线粒体 ATPase(21)。在 E1E2 ATPases 中,ATP 水解释放的能量与阳离子跨膜转运偶联。酶循环通过构象状态,包括形成磷酸化中间体。酶活性不受叠氮化物或寡霉素的影响,但被钒酸盐特异性抑制,在大多数情况下被 N-乙基马来酰亚胺和异硫氰酸荧光素抑制,而对于 Na4 ,K4-ATPase,则被乌巴因抑制 (5-11)。液泡 ATPases 似乎会水解 ATP,产生质子梯度,用于酸化细胞内区室 (12、17、22)。这组 ATP 酶因其抑制剂特异性而与其他两组 ATP 酶区分开来。液泡 ATPase 不受叠氮化物、寡霉素、钒酸盐或乌巴因的抑制。相反,
AFM显微照片(图S1)。D H分布记录在分散在Tris-Edta(TE)缓冲液中的CMP上的Malvern-Zetasizer-Nano仪器上(5 mM Tris,1 mm EDTA,1 mm EDTA,5 mm NaCl,pH 7.3)。(d)菌株促进的叠氮化物 - 烷基环加成(SPAAC)的方案 - 铜铜的铜线自由点击反应在叠氮化物标记的CMPS和二苯并杂志环链(DBCO) - 修饰的ssDNA低聚物之间。(e)根据耗尽测定估计的平均值(SEM)标准误差的平均ssDNA数量与标称移植密度r(x)相比。(f)在90 MA处的0.5%琼脂糖凝胶上,在不同的R(x)值上对CMP和CMP-DNA偶联物进行的琼脂糖凝胶电泳移位测定,P代表装载口袋。(g)CMP-DNA的凝胶相对前(r f)相对于r(0)样品的r f,无ssDNA作为r(x)的函数。(h)CMP-DNA偶联物的体积加权粒子流体动力学大小(D H)作为R(x)的函数。面板F和G中的实线是拟合参数r f lemal = 0.42 dna/nm 2和n = 6.3和r falt = 0.48 dna/nm 2和n = 4.5的山丘方程。比例尺分别在面板(a)和(b)中为50和100 nm。
摘要:甲基化是一种广泛存在的天然修饰,具有多种调节和结构功能,由大量 S -腺苷-L -蛋氨酸 (AdoMet) 依赖性甲基转移酶 (MTases) 进行。AdoMet 辅因子由多聚体蛋氨酸腺苷转移酶 (MAT) 家族从 L -蛋氨酸 (Met) 和 ATP 产生。为了推进机制和功能研究,已经开发出重新利用 MAT 和 MTase 反应以接受来自相应前体的可转移基团的扩展版本的策略。在这里,我们使用结构引导的小鼠 MAT2A 工程,以便从合成的蛋氨酸类似物 S -(6-叠氮己-2-炔基)-L -同型半胱氨酸 (N 3 -Met) 生物催化生产扩展的 AdoMet 类似物 Ado-6-叠氮化物。三种工程化的 MAT2A 变体表现出对延伸类似物的催化能力,并且在没有和存在竞争性 Met 的情况下,都支持与 M. Taq I 和小鼠 DNMT1 的工程化变体在级联反应中进行 DNA 衍生化。然后,我们使用 CRISPR-Cas 基因组编辑将两种工程化变体作为 MAT2A-DNMT1 级联安装在小鼠胚胎干细胞中。所得细胞系在暴露于 N 3 -Met 且存在生理水平的 Met 时,保持正常的活力和 DNA 甲基化水平,并显示出 Dnmt1 依赖的 DNA 修饰和延伸叠氮化物标签。这首次展示了一种用于生物合成生产延伸 AdoMet 类似物的遗传稳定系统,该系统能够在活哺乳动物细胞中对 DNMT 特异性甲基化组进行轻度代谢标记。■ 简介
在先前的研究中,我们设计了一个库的库,其中具有点击式化合物启用官能团的顺序官能化,即叠氮化物(go-n 3),碱(go)和叠氮化股(go)和叠氮化股(C 2 GO)(c 2 go),如方案1所示。[9-13]叠氮化物修饰显着增加了水接触角GO-N 3和C 2 GO,而炔烃的修饰并未改变接触角(图1)。更有趣的是,我们发现这种修饰导致血清蛋白在GO上结合的顺序降低(又称A.强限制的硬蛋白电晕,以下称为HC)。GO的HC从1.4 mg(GO)降低到1.1 mg(GO,降低22%),0.9 mg(GO-N 3,35%HC还原)和0.8 mg(C 2 GO,43%HC降低)。这导致吞噬J774细胞的细胞摄取显着增加,与GO蛋白质还原的线性相反关系(r 2 = 0.99634)。由于蛋白质涂料的减少而引起的较高的吸收也导致了较高的细胞毒性,而无效的GO也会产生较高的细胞毒性。[10-12]另一方面,众所周知,高蛋白涂层可以防止其细胞相互作用和非吞噬A549细胞的内在化,从而降低了细胞毒性[14],这是由于GO和A549细胞膜之间的物理相互作用降低而导致的。[15]这项研究使用已知的J774和A549细胞模型进一步研究了我们的研究,并假设在两个模型细胞中,生物纳米相互作用将有所不同。我们假设生物纳米相互作用的对比对于进行表面化学修饰将很敏感,并旨在使用无标签方法检测和分析生化差异,例如基于同步辐射的基于同步辐射的IR-Transans-Transans-Transansform-Transtrans-Transtrans-Transeform-Transeform-Transeform ir scirotectroscopopicy(SR-FTIR(SR-FTIR),这些方法可以使用pace Armination(PCA)进行可视化的分析(PCA)。
致力于开发用于制备苯唑骨骨骼的效果方法。单原子插入代表了杂环合成的最有趣的方法之一,并为获取有价值的苯并牙素建立了新的机会。在此,我们报告了一种反应,其中氮原子直接插入麦诺尔,以通过叠氮化物中间体产生相应的苯唑环环(图1d)。为了将氮原子插入舞台,我们建议利用艾尔诺尔作为底物,这可以破坏芳族环的稳定性。noLs可以用作位置选择性氮插入中的指导组。与苯环添加到32 - 35中不同,该策略有助于C - C键裂解,更重要的是,实现了现场选择性的氮原子插入。
生物正交化学因其出色的生物相容性和在改变生物分子的同时避免干扰自然生物过程的精确性而在生物医学领域迅速流行起来。本综述专门研究了生物正交过程在纳米级生物医学环境中的基本概念和实际用途,包括药物管理、癌症治疗和光学成像领域。我们重点介绍了最近的突破,例如点击化学、四嗪配位和应变促进叠氮化物-炔烃环加成 (SPAAC) 的利用,这些突破允许在生物系统中进行极具选择性和效率的生物分子改变。此外,我们将这些方法与传统的生物共轭技术进行比较,研究它们在未来生物医学研究中的潜力及其在治疗靶向方面的优势。本综述旨在全面概述生物正交化学、其当前用途以及在临床环境中充分发挥其潜力必须克服的障碍。