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基于半导体的生物界面通常建立在质膜表面或细胞质内。在革兰氏阴性细菌中,周质空间的特点是封闭且存在大量酶和肽聚糖,为生物矿化提供了额外的机会,从而允许非遗传调节界面。我们通过各种基于电子和 x 射线的成像技术观察到周质内含有单金属和多金属元素的半导体纳米团簇沉淀。周质半导体是亚稳态的,并显示出缺陷主导的荧光特性。出乎意料的是,原位产生的富含缺陷(即低品位)的半导体纳米团簇在与光敏化结合时仍可提高三磷酸腺苷水平和苹果酸的产生。我们扩展了生物混合系统的可持续性水平,包括在初级水平上减少重金属、在次级水平上构建活生物反应器以及在第三级水平上创建半人工光合作用。具有生物矿化功能的周质生物混合体有可能成为各种可持续应用的容错平台。
摘要:革兰氏阴性细菌holospora ottusa是纤毛尾ca的大核特异性共生体。众所周知,这种细菌的感染诱导了宿主HSP60和HSP70基因的高水平外,并且宿主细胞同时获得热震和高盐抗性。此外,在其氨基酸序列中具有DNA结合结构域的H. ottusa特异性63-kDa的感染形式被分泌到宿主大核中后,将其分泌到宿主的大核中,并留在大核中并留在原子核中。这些事实表明,63 kDa蛋白与宿主大核DNA的结合会导致宿主基因表达的变化并增强宿主细胞的环境适应性。这种63 kDa蛋白被更名为周质区域蛋白1(PRP1),以将其与具有相似分子量的其他蛋白区分开。确认PRP1是否确实与宿主DNA,SDS-DNA PAGE和DNA Af-FILITY色谱法与小腿胸腺DNA和Caudatum DNA进行了结合,并结合了PRP1与单克隆DNA弱结合,该PRP1与促进63- kda蛋白的单克隆抗体与Caudatum dna弱结合。
融合蛋白在大肠杆菌重组蛋白的生产中起着重要作用。它们主要用于细胞质表达,因为它们可以设计为增加目标蛋白的溶解度,然后可以通过亲和层析轻松纯化。相反,融合蛋白通常不包含在用于周质生产的构建体设计中。相反,插入信号序列以将蛋白质转运到周质中,并添加 C 端 his-tag 以进行后续纯化。我们的研究小组提出从欧洲亚硝化单胞菌周质中分离的小金属结合蛋白 (SmbP) 作为一种新的融合蛋白,用于在大肠杆菌的细胞质或周质中表达重组蛋白。SmbP 还允许通过使用 Ni(II) 离子的固定化金属亲和层析进行纯化。最近,我们通过将 SmbP 标记蛋白的天然信号肽与取自果胶酸裂解酶 B (PelB) 的信号肽进行交换,优化了 SmbP 标记蛋白的周质生产,从而大幅增加了蛋白产量。在这项工作中,我们表达并纯化了 PelB-SmbP 标记的可溶性生物活性人类生长激素 (hGH),并获得了迄今为止报道的该蛋白的最高周质产量。在 Nb2-11 细胞上测试的其活性相当于 50 ng mL 1 的商业生长激素。因此,我们强烈建议使用 PelB-SmbP 作为蛋白标签,用于大肠杆菌周质中 hGH 或其他可能的目标蛋白的表达和纯化。