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内布拉斯加州农业食品系...
请在申请提交和检查日期之间至少允许30天。如果需要，平面图审查可能需要额外30天才能完成检查。必须在粮食建立之前进行检查。如果在申请许可证之前已经进行了食品机构，食品加工厂或打捞业务，则申请人应支付60美元的额外费用。食品许可证不可转让给任何其他人或位置。任何许可证在更改所有权或位置时会自动失去失误。许可证应在每年的8月1日之前续签，无论何时获得许可证。董事应在每个会计年度的7月1日或之前设定初始许可费和年费。董事每年可以筹集或降低费用。费用可以在内布拉斯加州纯食品法中找到。单击此处查看有关食品建立费的常见问题（常见问题解答）。商业处理器的其他资源首先从事酸化食品（AF）或低酸罐头食品（LACF）的制造，加工或包装时，必须在FDA中注册和归档。有关FDA要求的更多信息，请单击此处。《 FD＆C法案》第415条（美国法典21350d）需要在美国制造，处理，包装或持有食物的家庭和外国设施，以便在美国的人类或动物消费中进行注册。单击此处注册。建立信息建立名称：
两种品系助力蓝莓实现 FasTrack 育种
摘要。蓝莓幼苗的幼年期通常持续 3 至 4 年。为了缩短这一时期并促进 FasTrack 育种，我们开发了转基因“ Aurora ”蓝莓植物，该植物具有蓝莓 FLOWERING LOCUS T 基因的组成性表达，使 T 0 转化体在短短 1 年内开花。为了评估这些转基因系在加速育种周期方面的潜力，我们将转基因“ Aurora ”与转基因南部高丛蓝莓“ Legacy ”杂交，称为 Mu-Legacy。Mu-Legacy 也表现出早期开花，这主要是由于转基因插入，使其适合 FasTrack 育种。经过 2 年多的表型分析，我们观察到转基因幼苗每年都会持续开花，而非转基因幼苗则不会开花。这些结果表明，无论是蓝莓 FLOWERING LOCUS T 基因的组成性表达，还是转基因“Legacy”中的特定转基因插入位点，都可以有效缩短蓝莓植物的幼年期。鉴于“Aurora”和“Legacy”在蓝莓生产中的重要性，这些转基因品系将成为加速蓝莓育种计划的宝贵工具。
玉米杂交种性能和品系配合力的基因组预测
玉米育种中最重要的两项活动是开发具有高一般配合力 (GCA) 和特殊配合力 (SCA) 值的自交系，以及鉴定具有高产量潜力的杂交种。基因组选择 (GS) 是一种很有前途的基因组工具，可根据从基因组预测 (GP) 估算的基因组估计育种值对未经测试的育种材料进行选择。在本研究中，进行了 GP 分析，以在三个玉米品系逐个测试试验中估计杂交种、GCA 和 SCA 的谷物产量 (GY) 表现，其中所有材料在 10 到 11 个多地点试验中进行了表型分析，并使用中密度分子标记平台进行了基因分型。结果表明，在模型的所有试验中，包括品系和测试者的加性效应，对杂交种表现的预测能力范围为 0.59 到 0.81。在同时包含加性和非加性效应的模型中，杂交种性能的预测能力得到了提高，所有试验的范围为 0.64 至 0.86。GY 的 GCA 预测能力较低，在仅包含自交系的模型的所有试验中范围为 0.14 至 0.13；在同时包含自交系和测试者的模型的所有试验中，GY 的 GCA 预测能力得到了提高，范围为 0.49 至 0.55，而 GY 的 SCA 预测能力在所有试验中均为负值。测试者之间的 GY 预测能力从 0.66 到 0.82 不等；测试者之间的杂交种性能很难预测。GS 提供了基于分子标记信息预测新杂交种性能和新自交系的 GCA 的机会，通过对更少的多地点试验进行表型分析，可以大幅降低总育种成本。 2021 中国作物学会和中国农业科学院作物科学研究所。由 Elsevier BV 代表科爱传播有限公司制作和托管。这是一篇根据 CC BY-NC-ND 许可协议开放获取的文章（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）。
通过多重 CRISPR/Cas9 介导的基因失活产生透明鳉鱼品系
摘要 身体色素沉着限制了体内成像，因此也限制了生物医学纵向研究的开展。一种绕过这一障碍的可能性是使用色素沉着突变体，这种突变体常用于斑马鱼和青鳉等鱼类。为了解决衰老的根本原因，短命的非洲鳉鱼 Nothobranchius furzeri 最近被确立为模型生物。尽管寿命短暂，但 N. furzeri 显示出哺乳动物衰老的典型迹象，包括端粒缩短、衰老细胞积聚和再生能力丧失。本文，我们报告了通过同时失活三个负责色素沉着的关键基因座来生成透明的 N. furzeri 系。我们证明这种名为 klara 的稳定系可用作不同应用的工具，包括行为实验和通过将荧光团整合到 cdkn1a (p21) 基因座来建立衰老报告基因，并在体内显微镜下复制所得系。
使用 CRISPR/Cas9 在水稻 Oryza sativa L. 中编辑 OsGTL1 启动子。
摘要：GT2-LIKE1（GTL1）基因是气孔发育的负调控基因，它调节植物气孔的数量。CRISPR/Cas9 系统已用于改造OsGTL1启动子。本研究旨在筛选出带有OsGTL1启动子改造的无Cas9水稻。设计Cas9特异引物对8个T 3 水稻品系的所有分蘖进行Cas9筛选。只有一个T 3 品系在所有分蘖中都是无Cas9的，而8个品系中有3个品系的所有分蘖中都有Cas9。从5个独立品系中可获得无Cas9分蘖的种子。改造植株与野生型（WT）的叶绿度、每株分蘖数和每株叶子数无显著差异。然而，8个改造品系中有7个品系的叶片显著小于WT。一些无Cas9植物中OsGTL1启动子的核苷酸序列揭示了OsGTL1启动子的修饰，包括在目标区域内的小的缺失、插入和大的缺失。
彻底改变草莓生产：CRISPR/Cas9 编辑可提高果实硬度并延长保质期
从表型上看，编辑植物的营养生长与野生型相似。所选 8 个品系的果实质量参数显示，重量、长度、颜色和硬度均有所变化，具体取决于品系，其中大多数品系的长宽比低于野生型，与对照相比，转基因果实的伸长率较低且更方。此外，几乎所有编辑品系的果实硬度均显著增加，FaPG1 编辑程度与收获时的果实硬度之间存在明显的正相关关系。
改进高粱转化和基因组编辑，开发稳定品系，用于光合和水分利用效率分析
通过使用基因组编辑和稳定植物转化技术，开发将高粱基因与表型联系起来的基因组水平知识库以实现生物能源目标，对于理解基本生理功能和作物改良至关重要。我们与参与该项目的各个实验室一起贡献中央枢纽能力，以创建、测试和培育转基因和基因组编辑植物。我们已经建立了可靠的协议，用于通过农杆菌介导将实验性遗传构建体引入高粱 cv BTx430，并合作生成该项目正在进行的研究所需的可行转基因。这些实验包括：； (1) 用于敲低的高粱 RNAi 构建体，例如电压门控氯离子通道蛋白、α碳酸酐酶 7 (CA) 和 9-顺式环氧胡萝卜素双加氧酶 4 以及 myb 结构域蛋白 60； (2) 构建体用于测试磷酸烯醇丙酮酸羧化酶 (PEPC) 启动子表达、CA 过表达和具有改变动力学的 PEPC 的保真度；(3) 旨在测试一系列增加的叶肉 CA 活性的 CA 过表达的其他版本；(4) Ta Cas 9、dTa Cas9 和 dCas9 转录激活因子用于改进编辑，以及；(5) 构建体用于评估转基因过程的改进，旨在增加转化频率并缩短 T1 种子的时间。这些品系目前处于转基因过程的不同阶段。使用形态发生调节剂介导的转化 (MRMT) 的最新发展是实现快速转化和基因组编辑的突破。我们报告了一种使用 MMRT 技术的改进的快速转化方法的开发，该方法有可能增加我们的项目的吞吐量并缩短时间。与 Voytas 实验室合作，我们评估了 MRMT 载体的公共版本。 Voytas 实验室还在测试递送基因组编辑试剂的新方法，特别是使用 RNA 病毒载体通过感染递送 gRNA。通过感染进行可遗传基因编辑已在多个双子叶植物中实现，我们正在努力在狗尾草和高粱中实施该技术。
通过 CRISPR/Cas9 靶向基因组编辑在商业鸡品系中获得对逆转录病毒感染的抗性
基因组编辑技术为动物育种提供了新的可能性，并有助于理解宿主-病原体相互作用。在家禽中，逆转录病毒是最难通过常规策略（例如疫苗接种）控制的病原体之一。禽白血病病毒亚群 J (ALV-J) 是一种致癌、免疫抑制性逆转录病毒，可导致鸡的髓性白血病和其他肿瘤。由于根除策略低效和缺乏有效疫苗，ALV-J 造成的严重经济损失在世界许多地方仍然是一个未解决的问题。ALV-J 附着和进入是通过特定受体鸡 Na + /H + 交换器 1 型 (chNHE1) 介导的。chNHE1 中非保守氨基酸色氨酸 38 (W38) 对病毒进入至关重要，使其成为引入抗病性的有利靶标。在本研究中，我们利用 CRISPR/Cas9 系统结合同源定向修复，通过精确删除 chNHE1 W38，在商业鸡系中获得了 ALV-J 抗性。基因改造完全保护细胞免受 J 亚组逆转录病毒的感染。W38 删除对基因编辑鸡的发育和总体健康状况均没有负面影响。总体而言，通过精确基因编辑产生 ALV-J 抗性鸟类表明这种方法作为家禽替代疾病控制策略的巨大潜力。
必需基因对基因组编辑实验成功的影响生成 3,313 个新的转基因小鼠品系
。CC-BY-NC 4.0 国际许可下可用（未经同行评审认证）是作者/资助者，他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是此预印本的版权持有者此版本于 2024 年 3 月 21 日发布。；https://doi.org/10.1101/2021.10.06.463037 doi：bioRxiv 预印本
利用 CRISPR-Cas9 创建白化鱿鱼品系及其在神经活动体内功能成像中的应用
头足类动物在无脊椎动物中以认知能力、适应性伪装、新颖结构和通过 RNA 编辑重新编码蛋白质的倾向而引人注目。然而，由于缺乏遗传上可处理的头足类模型，这些创新背后的机制尚不清楚。CRISPR-Cas9 等基因组编辑工具允许在不同物种中进行定向突变，以更好地将基因和功能联系起来。一种新兴的头足类模型 Euprymna berryi 产生大量胚胎，这些胚胎可以在其整个生命周期中轻松饲养，并且具有已测序的基因组。作为原理证明，我们在 E. berryi 中使用 CRISPR-Cas9 来靶向色氨酸 2,3 双加氧酶 (TDO) 基因，色氨酸 2,3 双加氧酶 (TDO) 是形成色素色素所需的酶，色素色素是头足类动物眼睛和色素细胞中的色素。将靶向 tdo 的 CRISPR-Cas9 核糖核蛋白注射到早期胚胎中，然后培养至成年。出乎意料的是，注射的标本是有色的，尽管通过对注射动物 (G0s) 进行测序验证了目标位点的插入缺失。经过多代繁殖的 TDO 纯合敲除系也有色。令人惊讶的是，E. berryi 中也存在编码吲哚胺 2,3 双加氧酶 (IDO) 的基因，该酶在脊椎动物中催化与 TDO 相同的反应。使用 CRISPR-Cas9 对 tdo 和 ido 进行双敲除产生了白化表型。我们展示了这些白化病在双光子显微镜对大脑中的 Ca 2+ 信号进行体内成像中的实用性。这些数据表明，制造基因敲除头足类动物系的可行性，可用于对这些行为复杂的生物体的神经活动进行实时成像。