图 1. 在室温下保存在 Norgen 唾液 DNA 保存剂中超过 2 年的 DNA 稳定性。从众多捐赠者中收集唾液样本并混合,然后将等量的 Norgen 唾液 DNA 保存剂添加到唾液中。然后将保存的唾液在室温下保存长达 24 个月。随后在 4 个月、8 个月、16 个月和 24 个月时使用 Norgen 唾液 DNA 分离试剂盒 (Cat. RU45400) 从 0.5 mL 保存的唾液样本中分离唾液 DNA。为了进行目视分析,将 10 µL 纯化的 DNA 在琼脂糖 TAE 凝胶上运行。从中可以看出,唾液样本在 Norgen 唾液 DNA 保存剂中在室温下保存 24 个月后,没有 DNA 降解的迹象。此外,在整个 24 个月期间,DNA 的大小都保持在 24 kb 以上。M:Norgen 的 UltraRanger 1 Kb DNA Ladder(目录号 12100)。
图1。在室温下保存在Norgen的唾液DNA防腐剂中的DNA的稳定性超过2年。 唾液样品是从众多供体中收集的,并混合了,然后将等量的Norgen的唾液DNA防腐剂添加到唾液中。 然后将保存的唾液在室温下储存长达24个月。 唾液DNA随后在4个月,8个月,16个月和24个月中从0.5 mL保留的唾液样品使用NOR的唾液DNA分离试剂盒(Cat。) RU45400)。 进行视觉分析,在琼脂糖TAE凝胶上运行10 µL纯化的DNA。 可以看出,在Norgen的唾液DNA防腐剂中,将唾液样品存储24个月后,没有证据表明DNA降解24个月。 此外,在整个24个月内,DNA的大小保持在24 KB以上。 M:Norgen的Ultraranger 1 KB DNA梯子(Cat。 12100)。在室温下保存在Norgen的唾液DNA防腐剂中的DNA的稳定性超过2年。唾液样品是从众多供体中收集的,并混合了,然后将等量的Norgen的唾液DNA防腐剂添加到唾液中。然后将保存的唾液在室温下储存长达24个月。唾液DNA随后在4个月,8个月,16个月和24个月中从0.5 mL保留的唾液样品使用NOR的唾液DNA分离试剂盒(Cat。RU45400)。 进行视觉分析,在琼脂糖TAE凝胶上运行10 µL纯化的DNA。 可以看出,在Norgen的唾液DNA防腐剂中,将唾液样品存储24个月后,没有证据表明DNA降解24个月。 此外,在整个24个月内,DNA的大小保持在24 KB以上。 M:Norgen的Ultraranger 1 KB DNA梯子(Cat。 12100)。RU45400)。进行视觉分析,在琼脂糖TAE凝胶上运行10 µL纯化的DNA。可以看出,在Norgen的唾液DNA防腐剂中,将唾液样品存储24个月后,没有证据表明DNA降解24个月。此外,在整个24个月内,DNA的大小保持在24 KB以上。M:Norgen的Ultraranger 1 KB DNA梯子(Cat。12100)。
Maxwell®RSC稳定的唾液DNA试剂盒使用一种称为Magnacel™粒子的新型顺磁性粒子净化样品,该粒子提供了一个可移动的固相,可优化样品GDNA的捕获,洗涤和纯化。该粒子利用核酸的基于纤维素的结合,比传统的DNA纯化提供了更高的结合能力和清洁剂。Maxwell®仪器是磁性粒子处理仪器,可有效地将GDNA与预填充墨盒的第一个孔中的顺磁颗粒结合,并在加工过程中混合。这种磁性捕获方法避免了常见的液体处理问题,例如堵塞的尖端或部分试剂转移,从而导致其他自动化系统次优纯化处理。
摘要 本文介绍了一种比色检测唾液 α-淀粉酶的方法,该酶是自主神经系统 (ANS) 活动的潜在生物标志物之一,可用于评估疲劳。利用 α-淀粉酶裂解多糖 α 键的能力来开发比色测定法。在所提出的方法中,2-氯-4-硝基苯基-α-D-麦芽三糖苷作为底物,在被唾液 α-淀粉酶裂解后释放出有色副产物。引入麦芽糖作为非竞争性抑制剂可在生理相关浓度范围 (20-500 μ g/mL) 内产生理想的线性响应,检测限 (LOD) 为 8 μ g/mL(在水溶液中)。随后优化底物和非竞争性抑制剂的浓度,以进行唾液 α-淀粉酶的比色检测。提出了一种简便的纸基“试纸”检测方法,用于分析人类唾液样本,唾液成分的干扰很小。所提出的检测方法快速、特异性强且易于实施,可用于比色检测唾液 α-淀粉酶 20-500 μ g/mL 之间。互补的 RGB(红、绿、蓝成分)分析 17 提供定量检测,LOD 为 11 μ g/mL。这两种检测格式以 Phadebas 18 测试为基准,Phadebas 18 测试是一种最先进的 α-淀粉酶分光光度检测方法。所报告的纸基方法 19 具有很高的潜力,可用于评估 ANS 对应激源的反应改变,可能在疲劳评估和监测疲劳发作方面有应用。21
疟疾是由按蚊传播的疟原虫引起的。当受感染的雌蚊吸食脊椎动物宿主的血液时,疟原虫子孢子会随唾液释放。沉积在皮肤中的子孢子必须进入血管才能开始前往肝脏的旅程。从蚊子体内移出后,子孢子会与皮肤中许多媒介唾液成分相关或接近。最近的研究阐明了按蚊唾液及其成分如何影响皮肤疟原虫感染早期的宿主-病原体相互作用。在这里,我们讨论了按蚊唾液成分如何调节局部宿主反应并影响疟原虫的感染性。我们假设针对蚊子唾液蛋白的治疗策略可以在控制疟疾和其他媒介传播疾病方面发挥作用。
OA2ω,/A280 比率仅为 1/140 和 1/85,分别为 1.54±0.43 和 1.51±0.21。
唾液是一种新兴的疾病生物标志物来源,特别是对于头颈部癌症而言。尽管唾液中的游离 DNA (cfDNA) 分析有望成为一种用于癌症检测的液体活检方法,但目前尚无用于研究 DNA 的唾液收集和分离标准化方法。在本文中,我们评估了各种唾液收集容器和 DNA 纯化技术,比较了 DNA 数量、片段大小、来源和稳定性。然后,我们使用优化的技术,测试了从患者唾液样本中检测人乳头瘤病毒 (HPV) DNA(头颈部癌症亚群中的真正癌症生物标志物)的能力。对于唾液收集,我们发现 Ora-gene OG-600 容器可产生最高浓度的总唾液 DNA 以及对应于单核小体游离 DNA 的 < 300 bp 的短片段。此外,与其他唾液收集容器相比,这些短片段在收集后 48 小时仍然保持稳定。对于从唾液中纯化 DNA,QIAamp 循环核酸试剂盒可产生最高浓度的单核小体大小的 DNA 片段。唾液样本的冻融不会影响 DNA 产量或片段大小分布。发现从 OG-600 容器中分离的唾液 DNA 由单链和双链 DNA 组成,包括线粒体和微生物来源。虽然核 DNA 水平随时间保持一致,但线粒体和微生物 DNA 水平变化更大,并在收集后 48 小时增加。最后,我们发现 HPV DNA 在 OG-600 容器中稳定,在 HPV 阳性头颈癌患者的唾液中可以可靠地检测到,并且在单核小体大小的无细胞 DNA 片段中含量丰富。我们的研究已经确定了从唾液中分离 DNA 的最佳技术,这将有助于未来基于液体活检的癌症检测应用。
1疾病媒介基因组学和蛋白质组学实验室,寄生虫学研究所,捷克科学学院生物学中心,37005 CESKE BUDEJOVICE,捷克共和国2个血管性促进hythropods的实验室 Technology in Molecular Entomology, National Council for Scientific and Technological Development (INCT-EM/CNPq), Rio de Janeiro 21941-902, RJ, Brazil 4 Tick-Pathogen Transmission Unit, Laboratory of Bacteriology, Rocky Mountain Laboratories, National Institute of Allergy and Infectious Diseases, National Institutes of Health, Hamilton, MT 59840, USA 5 Laboratory of实验免疫学,生物医学研究所免疫学系,圣保罗大学,圣保罗05508-000,SP,巴西 *通信:kotsyfakis@paru.cas.cas.cz
唾液 DNA 分离试剂盒 - 50 次制备产品说明书产品编号 RU45400 Norgen 唾液 DNA 分离试剂盒提供一种快速简便的方法,用于从使用 Norgen 唾液 DNA 收集和保存设备收集和保存的唾液样本以及新鲜唾液中分离基因组 DNA。从唾液中发现的颊上皮细胞和白细胞中提取的人类基因组 DNA 可用于诊断的各种应用。分离的 DNA 可用于检测生物标志物,以诊断疾病、跟踪疾病进展或监测特定治疗的效果。唾液 DNA 还可用于诊断特定类型的感染。从唾液中分离 DNA 已成为一种有吸引力的血液或组织分离替代方法,因为样本采集是非侵入性的,样本可由几乎不受培训的人员采集,并且不需要特殊设备。使用 Norgen 试剂盒纯化的唾液 DNA 质量最高,并且与许多下游研究应用兼容,包括 PCR、Southern Blot 分析、测序和微阵列分析。Norgen 的纯化技术纯化基于旋转柱色谱法。基因组 DNA 优先从其他细胞成分(如蛋白质和 RNA)中纯化。唾液 DNA 可以从使用 Norgen 唾液收集和保存设备收集和保存的唾液样本或新鲜唾液样本中分离。将保存的唾液样本(新鲜唾液样本与裂解缓冲液 F 混合)与蛋白酶 K 混合并在 55°C 下孵育 10 分钟,然后将结合缓冲液 B 添加到样本中,然后在 55°C 下进行第二次孵育 5 分钟。然后将异丙醇添加到混合物中。然后将所得溶液加载到旋转柱上。只有 DNA 会与柱结合,而大多数 RNA 和蛋白质将在流通中被去除。然后用提供的洗涤液洗涤结合的 DNA,以去除任何残留的杂质,并用洗脱缓冲液 B 洗脱纯化的总 DNA。纯化的 DNA 质量最高,可用于多种下游应用。规格