植物专业代谢物是物种特异性化合物,可帮助植物适应和生存在不断变化的生态环境中。花蜜包含各种专门的代谢产物,对于维持花蜜稳态至关重要。在这项研究中,我们采用了高性能液相色谱(HPLC)来比较变质花蜜和天然花蜜之间的糖成分,并进一步分析了颜色,气味,pH值和过氧化氢(H₂O₂)含量的变化。微生物菌株在网状花蜜中分离并使用与DNA测序结合的扩散板法分离并识别。液相色谱串联质谱法(LC-MS/ MS)被实施,以表征变质和天然花蜜之间的代谢物差异。随后进行了体外实验,以验证筛选的花蜜代谢物对分离的微生物菌株的影响。结果表明,某些网状花蜜会破坏和恶化,这破坏了花蜜稳态,并显着降低了授粉媒介的授粉效率。变质花蜜在颜色,气味,糖成分,pH和H2O2含量方面存在显着差异。腐败花蜜中微生物物种的数量和数量要高得多。天然花蜜中的H2O2含量可以达到(55.5±1.80)m m,而在变质花蜜中则无法检测到。从两种类型的花蜜中分离出15种不同的微生物菌株和364个差异代谢产物。未来的研究可以集中于进一步探索不同的体外实验表明,H2O2可以抑制除塞拉蒂亚液化菌外的网状花蜜中的所有细菌。12-甲基二核酸抑制了枯草芽孢杆菌,扁豆菌群堆积和rothia terrae,而肉豆蔻酸仅抑制Rothia terrae。这项研究中筛选的花蜜代谢物对花蜜专家酵母Metschnikowia Reukaufi没有影响。总而言之,这项研究的发现表明,C. noticulata nectar通过其代谢产物来调节微生物的生长,以维持花蜜稳态并防止变质。这项研究提高了对维持花蜜稳态的网状梭菌的生理机制的理解,并为控制花蜜疾病和维持网状梭菌的生殖能力提供了理论上的支持。
摘要:缺乏在整个血脑屏障中缺乏安全和有效的递送,而深刻的免疫抑制性微环境是胶质母细胞瘤(GBM)疗法的两个主要障碍。细胞外囊泡(EV)已用作GBM的治疗递送车,但效果有限。我们假设可以通过(i)使用脑脉冲靶向的循环RGDYK肽(RGD-EV)和(ii)使用辐射爆发以增强积累来增强EV递送到GBM。此外,EVS对针对程序性检查点的编程细胞死亡配体1(PD-L1)进行了较小的干扰RNA(siRNA),以进行免疫检查点阻滞。我们表明,这种基于EV的策略显着提高了RGD-EV对鼠GBM的靶向效率,而载荷的siRNA逆转了肿瘤细胞上辐射刺激的PD-L1表达,并募集了与肿瘤相关的髓样细胞,从而促进了同性恋效应。联合治疗显着增加了CD8 +细胞毒性T细胞的活性,停止肿瘤生长并延长动物生存。EV隔离和提出的功能化策略的选定细胞来源适合大规模生产。这些结果为GBM免疫检查点疗法提供了基于EV的治疗策略,可以转化为临床应用。关键词:胶质母细胞瘤,细胞外囊泡,免疫疗法,放射治疗,靶向递送G
作者:T Neri · 2022 年 · 被引用 8 次 — 支气管肺泡灌洗液 (BALF) 中的巨噬细胞被认为是肺 EV 的主要来源,而 EV 可调节正常的气道生物学,包括体内平衡和先天防御 [49,...
摘要:血脑屏障 (BBB) 维持中枢神经系统 (CNS) 的稳态并保护大脑免受循环血液中存在的有毒物质的侵害。然而,BBB 对药物的不渗透性是 CNS 药物开发的障碍,这阻碍了大多数治疗分子进入大脑。因此,科学家一直在努力开发安全有效的技术,以更高的靶向性和更低的脱靶副作用来促进药物渗透到 CNS。本综述将讨论人工纳米药物在 CNS 药物输送中的局限性以及使用天然细胞外囊泡 (EV) 作为治疗载体实现对 CNS 的靶向输送。关于使用 EV 进行 CNS 靶向药物输送的临床试验信息非常有限。因此,本综述还将简要介绍最近在外周神经系统中靶向药物输送的临床研究,以阐明 CNS 药物输送的潜在策略。已经实施了不同的前分离和后分离技术,以进一步利用和优化 EV 的天然特性。各种来源的 EV 也已应用于体外和体内中枢神经系统靶向药物输送的 EV 工程。本文将讨论这些研究在临床上的未来可行性。
细胞外囊泡(EV)被定义为已知的异质囊泡,可保守,源自内体或质膜,并由细胞释放[1,2]。由于原核生物和真核细胞中细胞间通信的重要性,它们在正常的生理和病理生理学中都起着积极作用,这导致了它们的进化[3]。evs成为有助于这种交流的结构[4]。今天,众所周知,电动汽车是由它们起源和携带细胞特征的细胞编码和释放的。EV首先被认为是1946年血浆中的procagulant血小板衍生的颗粒。后来,由于沃尔夫(Wolf)于1967年进行的研究,这些结构开始被称为血小板粉[5,6]。他认为这些结构仅带有在那几年提供凝血活性的细胞残基。然而,后来意识到它们的功能责任要比携带细胞碎屑更多。evs由脂质,核酸,蛋白质(例如跨膜和胞质蛋白)以及与脂质代谢有关的蛋白质组成。它们被定义为被细胞排泄到细胞外空间中的脂质结合的囊泡[7-12]。通常,根据释放机制和维度进行了简单的分类,但是该分类仍未完全阐明。在未来几年将进行的研究将允许更新此分类。通常,根据释放机制和大小进行了简单的分类。随着研究继续进行将在未来几年进行的研究将允许更新此分类。根据国际细胞外囊泡学会(ISEV)在2024年发表的细胞外囊泡研究的最小信息(MISEV2023)指南,如果根据大小,密度,密度,密度,分子组成等特性(例如大小,密度,密度,密度,密度,密度,密度,密度)[13],将继续仔细鼓励使用EVS子类型。
摘要:建立CRISPR/CAS9(群集的定期间隔短的短文重复序列/CRISPR相关蛋白9)用于真核基因编辑的技术,不仅为分析基因功能开辟了新的途径,还为治疗干预提供了新的途径。虽然最初的方法允许靶向基因破坏,但最新的技术进步产生了各种各样的工具,以各种方式修改基因和基因表达。目前,这项技术的临床应用不超过期望,这主要是由于将CRISPR/CAS9组件的有效且安全地交付给生物体。靶向的治疗核酸和蛋白质的靶向体内递送在技术上仍然具有挑战性,例如,通过不必要的脱靶效应,免疫反应,毒性或快速降解转移车辆的进一步局限性。一种可能克服这些限制的方法采用细胞外囊泡作为细胞间递送装置。在这篇综述中,我们首先介绍了CRISPR/CAS9系统及其最新进步,概述主要应用程序,并使用外泌体或微泡列出将CRISPR/CAS9成分运送到真核生物细胞中的当前最先进的技术状态。
(未通过同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。此预印本版的版权持有人于2024年4月22日发布。 https://doi.org/10.1101/2023.04.30.535834 doi:Biorxiv Preprint
这是技术集合。 DCAS9是CAS9的变体,没有DNA裂解活性,而是与GRNA结合,在这项研究中,我们将其用作GRNA的RNA结合蛋白。 (注3)下一代序列:一个可以同时将数百万到数亿个核酸序列序列序列序列的测序仪,本研究使用它同时分析了GRNA条形码的组成。 (注4)生物信息学:融合领域之一,例如生命科学,信息学和统计学。这项研究通过对通过CIBER筛选获得的大量信息以及有关已知蛋白质到基因网络获得的大量信息探讨了SEV释放重要的生物学过程。联系(请联系演讲者有关研究的详细信息)Kojima Ryosuke,东京大学医学研究生院副教授,电子邮件:kojima [at] M.U-tokyo.ac.ac.ac.ac.jp通用事务团队,东京大学医学院研究生院,电话:03-5841-3304 Email:ISHOMU:ISHOMU [at M.ACACPOK] M.UAC。 Pharmaceutical Sciences, University of Tokyo Tel: 03-5841-4702 Email: shomu[at]mol.f.u-tokyo.ac.jp Public Relations Division, Japan Science and Technology Agency Tel: 03-5214-8404 Email: jstkoho[at]jst.go.jp Higashide Takanobu, Emerging Research Promotion Department, Japan Science and Technology Agency电话:03-5214-7276电子邮件:souhatsu inquiry [at] jst.go.jp
缩写:AFM,原子力显微镜;冷冻em,冷冻电子显微镜; DLS,动态光散射; EV,细胞外囊泡; FTIR,傅立叶转化红外光谱; mRNA,Messenger RNA; mirna,microRNA; NGS,下一代测序; NTA,纳米颗粒跟踪分析; SDS-页,十二烷基 - 硫酸盐聚丙烯酰胺凝胶电泳; TRP,可调电阻脉冲传感。