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公正转型基金 - 欧盟预算如何才能最好地协助从化石燃料到可持续能源的必要转型
该文件是应欧洲议会预算委员会的要求编写的。委员会指定 Eider Gardiazabal Rubial 女士负责跟踪这项研究。作者 Aliénor CAMERON 女士，布鲁盖尔 Grégory CLAEYS 博士，布鲁盖尔 Catarina MIDÕES 女士，布鲁盖尔 Simone TAGLIAPIETRA 博士，布鲁盖尔 负责管理员 Kaare BARSLEV 先生（借调国家专家） 预算事务政策部 欧洲议会 B-1047 布鲁塞尔 电子邮件：poldep-budg@europarl.europa.eu 语言版本 原文：英语 翻译：法语、德语 关于编辑 如需联系政策部或订阅其时事通讯，请写信至：poldep-budg@europarl.europa.eu 手稿于 2020 年 4 月完成。布鲁塞尔，© 欧盟，2020。本文件可在互联网上查阅：http://www.europarl.europa.eu/supporting-analyses 免责声明 本文件中表达的观点仅代表作者本人。作者对此不承担任何责任，并不一定代表欧洲议会的官方立场。允许出于非商业目的复制和翻译，但必须注明来源并提前通知欧洲议会并发送副本。© 封面图片经 Shutterstock.com 许可使用
CRISPR/Cas 衍生物作为新型基因调控工具
摘要：基因组编辑领域始于酵母中巨核酸酶（如LAGLIDADG家族归巢核酸内切酶）的发现。继转录激活因子样效应核酸酶和锌指核酸酶发现之后，最近发现的成簇的规律间隔的短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白（Cas）系统为基因编辑领域的应用打开了新的窗口。本文，我们回顾了不同的Cas蛋白及其相应的特点包括优缺点，并概述了不同的核酸内切酶缺陷型Cas蛋白（dCas）衍生物。这些dCas衍生物由核酸内切酶缺陷型Cas9组成，其可与不同的效应结构域融合以执行不同的体外应用，如追踪、转录激活和抑制以及碱基编辑。最后，我们回顾了这些 dCas 衍生物在体内的应用，并讨论了它们在体内进行基因激活和抑制的潜力，以及它们未来在人类治疗中的潜在用途。
CRISPR/Cas9 基因敲除及随后的野生型和突变型基因拯救的改进策略
将荧光标记 mOrange 插入到流行的 pLentiCrispr-V2 中，以创建包含嘌呤霉素选择和荧光标记的 pLentiCrispr-V2-mOrange (V2mO)，使病毒产生和靶标转导可见。用该质粒和适当的向导 RNA (gRNA) 包装的慢病毒成功敲除了人胃癌细胞系中的 RhoA、Gli1 和 Gal3 基因。Cas9-gRNA 编辑效率可以直接从 Cas9-gRNA 转导细胞中 gRNA 区域周围的短聚合酶链反应产物的 Sanger 电泳图来估计。必须对转导的靶细胞池进行单克隆以建立稳定的敲除克隆。仅当 gRNA 结合的 cDNA 被三个核苷酸修饰而氨基酸序列保持不变时，才能成功将野生型（RhoA 和 Gal3）和突变型（RhoA.Y42C）基因拯救到敲除细胞中。在 Gal3 基因中观察到严格的靶向 CRISPR/Cas9 编辑，但在 RhoA 基因中未观察到，因为 RhoA.Y42C 已经在 gRNA5 结合位点出现核苷酸变化。总之，我们改进的策略增加了这些优势：在流行的慢病毒系统中添加可视化标记、监测慢病毒的生产和转导效率、通过荧光激活细胞分选在靶细胞中分选 Cas9+ 细胞、通过 gRNA 结合位点周围的短 PCR 电泳图直接估计靶细胞池的基因编辑效率、以及在敲除细胞中成功拯救野生型和突变型基因，通过修饰 cDNA 克服 Cas9 编辑。
新型基因组编辑工具CRISPR-Cas3研发成功
标题：CRISPR-Cas3 在人类细胞中诱导广泛和单向基因组编辑 DOI：NCOMMS-19-1124908-T 作者：Hiroyuki Morisaka#、Kazuto Yoshimi#、Yuya Okuzaki#、Peter Gee、Yayoi Kunihiro、Ekasit Sonpho、Huaigeng Xu、Noriko Sasakawa、Yuki Naito、Shinichiro Nakada、Takashi Yamamoto、Shigetoshi Sano、Akitsu Hotta*、Junji Takeda* 和 Tomoji Mashimo*（# 同等贡献，* 通讯作者）
电机热模型基础知识及其应用...
本文讨论了电机热模型的基本原理及其在电机运行不同阶段的数学解释和物理原理。（过载、转子锁定、加速过于频繁或长时间、工作循环应用）。它解释了热模型时间常数和导致热模型算法偏差的其他技术参数。本文涵盖的其他主题表明：（a）详细的电机数据表信息，以及（b）保护工程师和电机供应商之间的协调，可以导致正确选择电机热保护参数。本文详细介绍了电机失速、加速和运行热极限曲线。它还解释了热容量的概念，并详细说明了如何在电机保护装置中评估热容量。本文还涵盖了以下几点：