oenococcus oeni是酿酒中的重要工程微生物。详细了解其在恶劣的葡萄酒环境中其生长和代谢的知识可能有助于繁殖精英o. oeni品种。然而,由于缺乏稳定且可重复的技术来对O. oeni进行基因操纵,因此对该主题的进一步研究似乎无法持续。因此,这项研究旨在通过探索一种新适用的转化技术来研究基因功能,该技术可以在O. oeni上稳定且可重复地性能。通过将基因枪技术与爆炸纳米座符作为质粒DNA载体,我们在O. oeni中实现了稳定且可重复的质粒DNA转化。此外,具有氯霉素耐药基因的质粒使O. oeni sx-1b在氯霉素培养基中繁殖。
摘要:基因枪转染是一种流行且用途广泛的植物转化工具。基因枪过程中的一个关键步骤是使用递送剂将 DNA 与重微粒结合,递送剂通常是带正电的含有胺基的分子。目前,商业递送剂的选择大多局限于亚精胺。此外,尚未报道详细的递送机制。为了帮助扩大递送剂的选择范围并揭示导致高递送性能的基本机制,研究了一个含胺分子库。使用双管基因枪递送装置测试了数百个样品,一致性大大提高。在洋葱表皮上评估了性能。通过直接高效液相色谱分析测量了 DNA 的结合和释放。这项研究表明,绝大多数胺库的表现与亚精胺相同。为了进一步解释这些结果,对化学建模生成的数千个分子描述符进行了关联分析。结果发现,总电荷很可能是成功结合和递送的关键因素。此外,即使将 DNA 浓度增加 50 倍以强调分子的结合能力,文库中的胺类仍继续以几乎相同的水平进行传递,同时结合所有 DNA。需要传递大量 DNA 的 Cas9 编辑测试也证明了 DNA 的增加,结果与之前确定的胺类性能一致。这项研究大大扩展了基因枪传递的传递剂选择,允许使用更耐储存且更便宜的商业试剂替代品。该文库还提供了一种方法,用于研究未来通过基因枪过程进行更具挑战性的蛋白质和 CRISPR-Cas 传递。关键词:DNA 传递、DNA - 粒子沉淀、基因编辑、基因枪、粒子轰击、QSAR