3D印刷脚手架提供了治疗脊髓损伤(SCI)的有前途的策略。在这里,我们提出了一种创新的生物技术方法,用于以仿生结构的自由形式打印脚手架的3D打印,其空间分辨率最高为千分尺,旨在植入Wistar大鼠的SCI。脚手架的制造是基于有机聚合物的2光子光聚合化,并且可扩展到病变的几何形状。脚手架被实现为多个填充的平行平行微调(每侧50μm),延伸整个长度。这些微连接被薄壁(5-10μm)隔开,使支架几乎是空心的,同时使其内部表面积最大化。该设计提供了一种最佳的底物,在空间上沿Rostro-caudal方向对齐,以支撑轴突和血管向内生长。我们发现,在低胸腔水平的脊髓的侧面半碎片切除中植入的脚手架表现出与周围组织的良好整合,而没有形成明显的神经胶质疤痕。髓鞘轴突和少突胶质细胞以及在操作后的12周内在植入支架的每个微肺中观察到血管,并且在整个长度中至少在支架中重新生成1000个轴突。治疗可显着提高运动功能,并在第8周降低同侧偏度肢体的痉挛,恢复至少20周。因此,具有较大内部表面积的3D面向空心支架继续持续微台网,有效地降低了轴突分散体,模仿受体组织的自然结构,并创建了用于增强脊髓再生的条件,并恢复了PATETIC LIMB的运动功能。
大规模平行的第二代短阅读DNA测序已成为基因组研究生物学的积分工具。以最有竞争力的价格提供高度准确的基础配对分辨率,该技术已广泛。然而,多路复用DNA文库的高通量构成可能是昂贵且繁琐的。在这里,我们提供了一种具有成本意识的协议,用于使用来自Illumina的珠子链接的转座体生成多路复用的短阅读DNA库。,我们准备在高通量的图书馆中,与Illumina DNA准备标记协议相比,使用小反应量的小反应量使用1/50。通过减少转座体的使用并将协议优化为基于磁珠的基于磁珠的清理,我们降低了成本,劳动时间和DNA输入要求。开发我们自己的双重指数引物进一步降低了成本,并使96孔微孔板组合可实现。这有助于有效地使用大型测序平台,例如Illumina Novaseq 6000,该平台可提供每个S4流动池的三个测序的三个terabase。与传统的Illumina方法相比,提供的协议大大降低了每个库的成本约1/20。
1. 荷兰埃因霍温理工大学生物医学工程系化学生物学实验室 2. 荷兰埃因霍温理工大学复杂分子系统研究所 (ICMS) 3. 荷兰埃因霍温理工大学生物医学工程系计算生物学组 4. 美国华盛顿州雷德蒙德市微软公司 5. 美国华盛顿州西雅图市华盛顿大学保罗·G·艾伦计算机科学与工程学院 6. 荷兰埃因霍温理工大学化学工程与化学系自组织软物质实验室 7. 荷兰奈梅亨拉德堡德大学医学中心内科系和拉德堡德传染病中心 (RCI) 8. 英国剑桥市微软研究院 9. 英国布里斯托尔大学化学学院原始生命研究中心和有组织物质化学中心 10. 学校上海交通大学材料科学与工程系,上海,中国 11. 上海交通大学张江高等研究院(ZIAS),上海,中国。 12. 华盛顿大学电气工程系,华盛顿州西雅图,美国 13. 荷兰奈梅亨拉德堡德大学分子与材料研究所 14. 荷兰埃因霍温-瓦赫宁根-乌得勒支联盟生命技术中心 * 通讯作者 电子邮件:yuanjc@microsoft.com;tfadgreef@tue.nl 摘要 由于其寿命长和极高的信息密度,DNA 已成为一种有吸引力的档案数据存储介质。可扩展的并行随机信息访问是任何存储系统的理想特性。然而,对于基于 DNA 的存储系统,这一点还有待稳健地建立。在这里,我们开发了热约束 PCR,这是一种新方法,可以实现对分区 DNA 文件进行多路复用、重复的随机访问。我们的策略是基于将生物素功能化的寡核苷酸稳定地定位在具有温度依赖性膜通透性的微胶囊内。在低温下,微胶囊对酶、引物和扩增产物具有渗透性,而在高温下,膜塌陷可防止扩增过程中的分子串扰。我们证明,在重复随机访问和降低多重 PCR 期间的扩增偏差方面,我们的平台优于非区室化 DNA 存储。使用荧光分选,我们还通过对微胶囊进行条形码编码来展示样本汇集和数据检索。我们的热响应微胶囊技术为重复随机访问档案 DNA 文件提供了一种可扩展的、与序列无关的方法。主要虽然世界正在生成越来越多的数据,但我们存储这些信息的能力却落后了 1 。传统的长期存储介质(如硬盘或磁带)在耐用性和存储密度方面受到限制,这导致人们对小有机分子 2,3 、聚合物 4,5 以及最近的 DNA 6–8 作为分子数据载体的兴趣日益浓厚。由于其固有的信息存储能力、寿命和高信息密度,DNA 尤其成为档案数字数据存储的主要候选者 9 。用于存储信息的编码方案 7,10,11 取得了重大进展
本协议描述了用于测序标准COI标记的实验室协议(即DNA条形码),多路复用多达2,280个标本(24 x 96井板,每个板的一个阴性对照孔),以在牛津纳米孔技术上运行,in 10.4.1在占用量序列仪上流动细胞。所有索引都是通过PCR使用标记的引物来完成的,这意味着图书馆准备仅在单个管中进行,所有2,280个PCR均得到了合并。这是通过不对称索引来完成的,其中带有96个唯一分子标识符(UMIS)的正向引物提供了映射到96孔板的孔,而带有24 UMIS的反向引物则将其映射到板上。
人脑连续处理视觉输入的流。然而,单个图像通常会触发延伸超过1s的神经反应。要了解大脑如何编码和保持连续的图像,我们用脑电图分析了人类受试者观看时的大脑活动。 5000个视觉刺激以快速序列呈现。首先,我们确认可以从大脑活动中解码每种刺激; 1s,我们证明大脑在每次瞬间同时代表多个图像。第二,我们在预期的视觉层次结构中进行了定位的脑反应,并表明在每次瞬间,不同的大脑区域代表了过去刺激的不同快照。第三,我们提出了一个简单的框架,以进一步表征这些行进波的动态系统。我们的结果表明,一系列神经回路,每个链由(1)隐藏的维护机制和(2)可观察到的更新机制组成,它解释了视觉序列引起的宏观脑表示的动力学。一起,这些结果详细介绍了一个简单的体系结构,解释了如何同时在大脑中同时代表连续的视觉事件及其各自的时间。
。CC-BY-ND 4.0 国际许可证永久有效。它以预印本形式提供(未经同行评审认证),作者/资助者已授予 bioRxiv 许可,可以在该版本中显示预印本。此版本的版权持有者于 2020 年 2 月 20 日发布。;https://doi.org/10.1101/2020.02.19.956888 doi: bioRxiv preprint
我们提出了一种具有极化多重照明的单次定量差异相比(DPC)方法。在我们系统的照明模块中,可编程的LED阵列分为四个象限,并覆盖了四个不同极化角度的偏振膜。我们在成像模块中的像素之前使用偏振摄像头。通过将自定义LED阵列上的偏振膜与相机中的极化器匹配,可以从单件采集图像中计算出两组不对称的照明采集图像。与相传函数结合使用,我们可以计算样品的定量相。我们介绍了设计,实现和实验图像数据,证明了我们方法获得相位分辨率目标的定量相位图像以及HELA细胞的能力。
摘要 基于 CRISPR 的定向进化是一种有效的育种生物技术,可改善植物的农艺性状。然而,使用单个单向导 RNA 其基因多样化仍然有限。我们在这里描述了一种多重正交碱基编辑器 (MoBE) 和一种随机多重 sgRNA 组装策略,以最大化基因多样化。MoBE 可以在不同的靶标上有效诱导正交 ABE (< 36.6%)、CBE (< 36.0%) 和 A&CBE (< 37.6%),而 sgRNA 组装策略将各种靶标上的碱基编辑事件随机化。对于水稻乙酰辅酶 A 羧化酶 (OsACC) 第 34 外显子的每一条链上的 130 个和 84 个靶标,我们在随机双 sgRNA 和随机三重 sgRNA 文库中观察到多达 27 294 种靶标-支架组合类型。我们进一步利用MoBE和随机双sgRNA文库对水稻中的OsACC进行了定向进化,获得了更强的除草剂抗性的单突变或连锁突变。这些策略可用于功能基因的原位定向进化,并可能加速水稻性状改良。
Sensitive multiplexed quantification of protein biomarkers for early drug discovery and development Increasing sensitivity for quantification of surfactant proteins in matrix using the SCIEX 7500 system Bo An 1 , Timothy Sikorski 1 , John Mehl 1 , Eshani Nandita 2 , Remco van Soest 2 and Elliott Jones 2 1 Glaxosmithkline, Upper Providence, Pennsylvania; 2 Sciex,加利福尼亚州红伍德城,该技术说明使用高端三倍四极杆质谱仪在签名肽水平上对表面活性剂蛋白的高度敏感定量工作流程。通过改进的前端技术,可以在Sciex 7500系统上生成,捕获和传输更多离子,从而增强了表面活性剂蛋白的敏感性。Low-ng/mL lower limits of quantification (LLOQs) were achieved for the 4 surfactant proteins analyzed in human plasma.
网站在蒙扎(Monza)的10个电影院的财团网站,创建了一个“虚拟”多路复用,以与真实的多路复用竞争。它包括电影编程,自动新闻通讯,票务预订和购买选项。