请引用本文:Toda and Okamoto,(2020)。通过将大分子直接递送到水稻卵细胞和受精卵中的基因表达和基因组编辑系统,Bio-protocol 10 (14): e3681。DOI:10.21769/BioProtoc.3681。
生活和控制的自由基和阳离子聚合;树枝状聚合物和超支聚合物;共聚物(随机,块和移植物);合成和天然聚合物的最有效的化学转化(例如“点击”化学);来自可再生资源的聚合物;确定绝对分子量;自我修复聚合物材料;聚合物胶囊;光反应聚合物和水凝胶的合理设计;光反应聚合物的应用;聚合物化学的其他最新发展。生物材料:定义和分类,可生物降解的聚酯,水凝胶,生物相容性,生物材料的基本应用;超分子材料:离子相互作用;多个氢键阵列;金属协调;超分子聚合物;水自组装原理;分子机。模块的晚期聚合物化学和大分子化学可作为化学的晚期主题访问。
09:00 - 09:45会议全体会议-II教授。杰弗里·哈贝尔(Jeffrey Hubbell)(美国纽约大学)分子工程以打开和关闭免疫力为09:45 - 10:10教授。 Cesar Rodriguez-Emmenegger(加泰罗尼亚生物工程研究所)聚合物拓扑结构释放:从超虚拟的乔木到吞噬细菌10:10 - 10:35 DR的合成细胞。 Ulrich Glebe(Potsdam大学)09:00 - 09:45会议全体会议-II教授。杰弗里·哈贝尔(Jeffrey Hubbell)(美国纽约大学)分子工程以打开和关闭免疫力为09:45 - 10:10教授。 Cesar Rodriguez-Emmenegger(加泰罗尼亚生物工程研究所)聚合物拓扑结构释放:从超虚拟的乔木到吞噬细菌10:10 - 10:35 DR的合成细胞。 Ulrich Glebe(Potsdam大学)
摘要 生成表达标记目标蛋白的修饰细胞系的需求变得越来越重要。在这里,我们描述了一种简单的 CRISPR/Cas9 介导的基因标记和分离修饰细胞的详细方案。在这个方案中,我们结合了两种以前发表的促进 CRISPR/Cas9 介导的基因标记的策略:使用化学修饰的单链寡核苷酸作为供体模板,以及同时针对 ATP1A1 基因和目标基因的共选择策略。总之,与其他生成表达标记目标蛋白的细胞的方法相比,这里提出的方案既简单又节省时间,这对于从人细胞中纯化天然复合物至关重要。关键词(以“-”分隔)CRISPR/Cas9 - 共选择 - 复合物纯化 - 单链寡核苷酸供体
摘要:在多种生物医学应用中,类似病毒样颗粒(VLP)作为纳米镜出现,包括疫苗抗原和货物(例如mRNA)到粘膜表面的货物。这些软,胶体和蛋白质结构(衣壳)仍然容易受到粘膜环境应力因素的影响。,我们使用同质功能的聚乙烯甘油三甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基氨基酸残基交联多个衣壳表面氨基酸残基,以提高衣壳的持久性和存活率以模拟粘膜应激源。表面交联增强了从低pH值(向下pH 4.0)和高蛋白酶浓度条件(即在猪和小鼠胃液中)组装的VLP的稳定性。此外,它增加了使用原子力显微镜悬臂尖端应用的局部机械压痕下VLP的刚度。小角度X射线散射显示交联后的衣壳直径增加,并且与PEG交联的长度增加了衣壳壳的厚度。此外,表面交联对VLPS的粘液易位和积累在体外3D人类鼻上皮组织的上皮上的积累没有影响。最后,它并未损害VLPS在小鼠皮下疫苗接种模型中的疫苗功能。与没有交联的脉络化相比,相同长度的PEG分子的表面交联VLP的刚度更高,并且在胃液中表面交叉连接的VLP的寿命更长。使用大分子系tether的表面交联,但不是对这些分子的简单结合,因此提供了一种可行的手段来增强VLP对粘膜应用的弹性和存活。关键字:病毒样颗粒疫苗,粘膜递送,纳米压力,粘液相互作用,聚乙烯甘油二醇,生物医学应用V
新月形免疫学研究所(Bric-NII)提出了一个小型研讨会和“大分子X射线晶体学和蛋白质结构预测”的研讨会。加入我们,参加一个沉浸式的为期3天的活动,其中包括该领域的主要专家的演讲,并进行了一个探索大分子X射线晶体学和结构预测的理论和实践方面的研讨会。
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大分子药物是指活跃药物成分的药物是大分子,包括肽,蛋白质,抗体,多糖和核酸。尽管这些药物已被用于治疗癌,艾滋病,心血管疾病,遗传疾病和神经退行性疾病,但总体而言,大分子分子疗法仍处于起始阶段。从理论上讲,大分子药物具有巨大的潜力,可以成为个性化精密药物的最佳疗法。例如,可以通过大分子疗法给予完全相同的肿瘤抑制剂来轻松治疗由特定肿瘤抑制剂缺乏引起的癌症患者。这种应用不超出任何小分子药物的范围。大分子疗法的未来是有希望的,尽管有要克服的障碍。迄今为止,所有大分子疗法均未由原始正常人细胞产生。其中大多数是由非人类细胞系,转化鸡(鸡蛋)和永生的人类细胞系产生的,这些细胞系通过突变积极增殖。高剂量的大分子药物具有负面影响,而低剂量很难获得治疗作用。当前的大分子药物输送方法不是高效的,高剂量的成本也是一个问题。例如,治疗LAL缺乏症致死性疾病的大分子药物每年每年耗资60万美元。在另一个单词中,要让患者每年生活成本,这是一所房子的费用。人们死于不可承担性。特此,我们正在制定一种增强大分子药物影响的新策略。该策略在药物开发中被称为太阳策略,该策略应用了一个或几个增强剂,可增强大分子药物的功效,同时最大程度地减少这些外部大分子分子的剂量。值得注意的是,这样的增强剂可以是食物补充剂(活跃的食物成分/营养素),草药,令人愉悦的音乐(音乐疗法)或专门由理性药物设计设计的小分子,或者是优化的组合。在另一个单词中,一个加一个超过两个。一个加一个加1远远超过3个;至少,一个加0.5超过1-在这里,“ 0.5”指的是大分子药物的剂量减少,该剂量是出于负担能力或强烈的负副作用。通过最大程度地减少大分子药物的剂量,该策略可以挽救或延长人类的生命。
魔术 - 晶体:在异质样品中稀缺大分子的结构性确定Yasuhiro arimura 1,2*,hide A. Konishi 1,Hironori funabiki 1* 1* 1 1* 1 1* 1个伪装体和细胞生物学实验室,纽约州纽约州立大学,纽约州纽约州立大学。中心,美国华盛顿州西雅图市,98109-1024 *通信:funabih@rockefeller.edu,yarimura@rockefeller.edu或yarimura@fredhutch.org摘要冷冻冷冻级单 - 单点分析通常需要在0.05〜5.5.5.0 mg/ml上达到目标Macromolecule浓度,以下是iSMACromolecule浓度。在这里,我们设计了磁隔离和浓度(魔术)-cryo-em,这是一种能够对磁珠上捕获的靶标的直接结构分析,从而将目标的浓度需求降低到<0.0005 mg/ml。将魔术 - 晶体EM适应染色质免疫沉淀方案,我们表征了连接器组蛋白H1.8相关的核小体的结构变化,这些核小体是从异叶鸡蛋提取物中的相间和中期染色体分离出来的。将重复的选择组合以排除垃圾颗粒(Duster),这是一种去除低信噪比粒子颗粒的粒子策划方法,我们还解决了H1.8结合的核纤维蛋白NPM2的3D冷冻EM结构与与跨相染色体和露出不同的敞开和封闭的结构变体的3D冷冻EM结构。我们的研究表明,魔术 - 晶体EM对异质样品中稀缺的大分子的结构分析的实用性,并为H1.8与核小体关联的细胞周期调节提供了结构见解。关键字冷冻EM,磁珠,Xenopus鸡蛋提取物,核小体,接头组蛋白H1,核纤维蛋白