图1。在去除RNase和dNase中,MP生物医学Nuc-Off核酸酶和DNA去除喷雾剂和竞争者T溶液的性能比较。A. RNase消除。在室温下孵育5分钟,将4μl的去除试剂和不同量的RNase(以1μl为单位)的混合物孵育;之后,加入1μlRNA,并在室温下进一步孵育15分钟,然后在含有甲醛的琼脂糖凝胶中变性和最终混合物的电泳。B. DNase消除。在室温下孵育4μl的去除试剂和不同量的DNase(以1μl)的混合物5分钟;之后,将1μl10X反应缓冲液和1μgDNA和无核酸酶的水加入总体积10μl,并在室温下进一步孵育15分钟,然后是最终混合物的琼脂糖凝胶电泳。C.去除试剂对DNA稳定性的影响。在室温下孵育15分钟,将4μl的去除试剂和1μl基因组DNA的混合物进行孵育,然后通过琼脂糖凝胶电泳进行分析。D.去除试剂对RNA稳定性的影响。在室温下孵育4μl的去除试剂和1μlRNA的混合物,然后变性添加含有甲醛的琼脂糖凝胶电泳。此处显示的图仅供参考,它可能会根据不同的实验条件而有所不同。
课程提供的课程号课程标题SAS/ ST/ C001花卉生物学,种子发展和成熟3 SAS/ ST/ C002种子生产:原理和实践3 SAS/ ST/ C003遗传学和植物育种3 SAS/ ST/ C004的生理学 Techniques in Vegetable Seed production 3 SAS/ ST/C008 Seed Legislation and Certification 3 SAS/ ST/C009 Seed Quality Testing 3 SAS/ ST/C010 Seed Health Technology and Quarantine 3 SAS/ ST/C011 Intellectual Property and its Management in Agriculture 3 SAS/ ST/C012 Laboratory Course - II 3 SAS/ ST/C013 Seed Marketing and Management 3 SAS/ ST/C014 Seed Biotechnology 3 SAS/ ST/ C015实验室课程-III 3 SAS/ ST/ C016 Master's Research论文6 SAS/ ST/ C017实验室课程-IV 3总计 - (a)54个选修课程SAS/ ST/ E001实验室中的基本概念。技术3 SAS/ST/E002种质收集,交换和隔离3 SOA/ST/E003田间作物中的种子生产3 SAS/ST/ST/E004药用和芳香植物的种子生产和种植(MAP)
在37°C。 孵育30分钟后,将细胞用冰冷的PBS洗涤三次,以停止肽样品的内在化。 要观察新设计的纳米颗粒的线粒体靶向能力,将细胞与mito-tracker(绿色; 1 µm)进一步孵育20分钟,并用冰冷的PBS将三分之一洗涤,以观察与线粒体的样品共定位。 此外,对于核染色研究,将相同的细胞用Hoechst-33258处理,再孵育20分钟,然后用PBS洗涤三次。 接下来,使用caspase-3活性染色试剂盒(Solarbio®Co.,Ltd。北京,中国)评估caspase-3的活性。 将细胞用5 µM CASP-3试剂盒(AC-DEVD-PNA)染色30分钟,用冰冷的PBS洗涤两次。 此测定基于的检测在37°C。孵育30分钟后,将细胞用冰冷的PBS洗涤三次,以停止肽样品的内在化。要观察新设计的纳米颗粒的线粒体靶向能力,将细胞与mito-tracker(绿色; 1 µm)进一步孵育20分钟,并用冰冷的PBS将三分之一洗涤,以观察与线粒体的样品共定位。此外,对于核染色研究,将相同的细胞用Hoechst-33258处理,再孵育20分钟,然后用PBS洗涤三次。接下来,使用caspase-3活性染色试剂盒(Solarbio®Co.,Ltd。北京,中国)评估caspase-3的活性。将细胞用5 µM CASP-3试剂盒(AC-DEVD-PNA)染色30分钟,用冰冷的PBS洗涤两次。此测定基于
加入6孔板中并在28°C下孵育2小时(不摇晃)以形成单层。我们制备了8μL Cellfectin II 试剂(Gibco-10362-100)和1μg每种DNA样本,并根据Bac-to-Bac手册提供的指导进行孵育。去除培养基后,将DNA转染试剂复合物逐滴加入6孔板中。将板在28°C下孵育5小时。然后,在从细胞培养板中取出DNA样本后,向每个孔中加入3mL不含抗生素的新鲜培养基进行孵育。每隔24小时观察一次细胞病变效应(CPE)。感染后72-96小时收获P0重组杆状病毒,并进行噬斑测定(Bac-to-Bac手册)以检查滴度。收获P1和P2以增加重组杆状病毒的库存和滴度,用于蛋白质表达。
步骤:将Vero细胞接种在适当的培养基中(RPMI 1640,10%FBS)。将两个细胞培养容器分别放在一个Provi™CM20孵化监视器头上,该孵育型显示器头部安装在CellXpert C170I CO 2从Eppendorf的CellXpert C170i CO 2孵育器中,温度为21.2°C。细胞在37°C和5%CO 2下孵育。播种后约60小时监测细胞生长。CO 2浓度和温度同质性同时记录。根据DIN 12880:2007-05标准,通过外部探针在27个测量点处测量CO 2孵化器中的温度均匀性。
在 NEBuffer 4 中,10 µl 反应物含有 40 ng 300 碱基单链 RNA 和至少 1 µl Luna® Probe One-Step RT-qPCR 4X Mix with UDG,在 37°C 下孵育。孵育 4 小时后,通过荧光检测凝胶电泳测定,>90% 的底物 RNA 保持完整。
膜过滤测试的生物负载估计样品中可存活的需氧微生物总量,结果以菌落形成单位 (CFU) 表示。在胰蛋白胨大豆琼脂 (TSA) 上孵育 3 – 5 天后评估细菌生长情况,在 Sabouraud 葡萄糖琼脂 (SDA) 上孵育 5 – 7 天后评估真菌生长情况。
图 1:动态 BH3 分析可预测不同 RMS 细胞系的化疗敏感性。(A)CW9019 细胞与治疗剂孵育 36 小时后 DBP 测定的结果。以 ∆% priming 表示的结果表示与对照细胞相比引发的增加。(B)CW9019 细胞与化疗剂孵育 96 小时后 Annexin V 和碘化丙啶/DAPI 染色和 FACS 分析导致细胞死亡。(C)RD 和 RH4 细胞与治疗剂孵育 36 小时后 DBP 测定的结果。以 ∆% priming 表示的结果表示与对照细胞相比引发的增加。(D)RD 和 RH4 细胞与化疗剂孵育 96 小时后 Annexin V 和碘化丙啶/DAPI 染色和 FACS 分析导致细胞死亡。 (E) 左图显示 36 小时时 ∆% 启动和 96 小时时 % 细胞死亡之间的相关性。右侧显示接收者操作特征曲线分析。值表示至少三次独立实验的平均值 ± SEM。** p<0.01 和 * p<0.05。