摘要:大西洋子午翻转循环(AMOC)在气候中起着重要作用,将热量和盐传输到北大西洋亚北大西洋。AMOC的变异性对大气强迫敏感,尤其是北大西洋振荡(NAO)。由于AMOC观察值很短,因此气候模型是研究AMOC可变性的宝贵工具。然而,气候模型存在已知问题,例如不确定性和系统偏见。进行投资,评估了参与耦合模型对比项目(CMIP6)的6阶段模型的工业前控制实验。在模型的子极平均表面温度和盐度中有一个大但相关的扩散。通过将模型分成温暖的或冷的新鲜的亚极性回旋,表明温暖的 - 咸模型在拉布拉多海中具有较低的海冰盖,因此,在正阳阳性的NAO期间,较大的热量损失。层次也较弱,因此较大的与NAO相关的热量损失也会影响更大的深度。因此,在温暖的模型中,地下密度异常比倾向于冷又新鲜的模型要强得多。当这些异常沿西部边界向南传播,它们建立了一个区域密度梯度异常,从而促进了温暖的咸模型中对NAO的延迟延迟的延迟。这些发现证明了模型的含义是如何在变量之间链接并影响变异性的,这强调了改善模型中北大西洋平均状态的需求。
t eChniquers i n M Olecular b Iology - 用于P LASMID DNA I求解DNA分离的方法:分子生物学技术在复杂基因组分析中的应用取决于准备纯质粒DNA的能力。大多数质粒DNA隔离技术有两种口味,简单 - 低质量的DNA制剂,更复杂,耗时但高质量的DNA制剂。对于许多DNA操作,例如限制酶分析,亚克隆和琼脂糖凝胶电泳,简单的方法就足够了。大多数DNA测序,PCR操作,转换和其他技术都需要高质量的制剂。大多数方法都以大量细菌细胞开头,这些细菌细胞包含选择的质粒并离心至颗粒。然后,细胞在基本条件下通过洗涤剂钠硫酸盐(SDS)的混合物裂解,或添加蛋白酶(溶菌酶)以削弱和破坏宿主细胞壁。这两种方法的结果都导致紧凑型超螺旋质粒DNA分子释放到溶液中。下一个问题是将RNA,基因组DNA和其他细胞成分与细胞分开。如何完成此操作取决于所使用的方法。碱性裂解制剂是隔离少量质粒DNA的最常用方法,通常称为小型质子。此方法将SDS用作弱洗涤剂,以在NaOH存在的情况下使细胞变性,该清洁剂可将细胞壁和其他细胞分子水解起来。高pH值通过添加乙酸钾进行中和。这将质粒DNA和RNA留在溶液中。钾对样品有额外的影响。钾离子与SD相互作用,使其成为不溶性的洗涤剂。SD会很容易沉淀,并且可以通过离心分离。这样做的不溶性SDS会捕获较大的基因组DNA并将其从上清液中清除。通常通过添加RNASEA消化去除RNA。这仅留下溶液中的蛋白质,碳水化合物和RNA核苷单体。原发性醇(例如乙醇或丙醇)用于沉淀DNA。这是通过对水的重新排序来实现的,使DNA聚集体并变得不溶性。结果是一种纯净的DNA颗粒,可以重悬于温和缓冲的溶液或水中。建议使用大量培养物中煮沸的微型REIPREP来制备少量的质粒DNA。虽然此方法非常快,但产生的DNA质量低于碱性裂解小型培训的质量。在碱性裂解小型方法中,溶菌酶用于水解负责使细菌细胞壁具有其强度的广泛交联蛋白。然后将细胞煮沸以进一步使蛋白质结染并破坏细胞壁。然后用酒精沉淀质粒DNA。这两种方法都将仅产生几µg质粒DNA。对于纯度较高的较大数量,需要许多其他步骤。通过在非常高的重力力下在氯化丘密度梯度中离心,根据其密度分离其密度。氯化剖腹梯度产生的高质量质粒DNA不含大多数污染物,但使用溴化乙锭来识别DNA(潜在的诱变剂),并且需要长时间的超级离心运行以建立密度梯度。该方法是通过使用碱性裂解方法裂解细胞的,并在350,000 x g下离心14小时。首先,将CSCL梯度在小管中制成,并用溴化乙锭添加DNA。在旋转时,DNA将向下迁移,直到达到与质粒相同的CSCL的密度。因此,较大的DNA将与紧凑的质粒DNA分离。用紫外线可视化质粒带,用针切除,然后重复该过程。您可以看到,这是一种非常复杂且乏味的方法,用于隔离DNA,通常不经常在柱分离的出现中使用。现在存在一种更流行的方法,它利用了质粒DNA的物理特性和碱性裂解方法中发现的污染物的差异。核酸是负电荷的,因此可以使用阴离子交换
在发育过程中,大鼠脑髓磷脂亚菌群中描述了含有含有神经酰胺半乳糖基转移酶的酶UDP-半乳糖糖羟基脂肪酸的定位和活性。其他脂质合成酶,例如脑硫磺硫酸光转移酶,UDP-葡萄糖 - 葡萄糖 - 陶瓷葡萄糖基转移酶和CDP-胆碱-1,2-二酰基甘油胆碱磷酸酶磷酸酶也已在肌蛋白亚纤维上和微晶片中进行比较。纯化的髓磷脂被异icnic蔗糖密度梯度离心分离。四个髓磷脂亚馏分分别在0.55 m-(浅绿色蛋白级分),0.75 m-(重膜蛋白级分)和0.85 m-核(膜馏分)和一个颗粒中,分离并纯化。在所有年龄段,在重肌蛋白馏分中发现了总髓磷脂蛋白的70-75%,而在轻膜林馏分中恢复了2-5%的蛋白质,而在膜分数中约为7-12%。大多数半乳糖基转移酶与重膜蛋白和膜分数有关。所研究的其他脂质合成酶似乎不与纯化的髓磷脂或髓磷脂亚菌群相关,而是在微体积 - 膜分数中富集。在发育过程中,当动物大约20天大然后下降时,微粒体半乳糖基转移酶的特异活性达到了最大值。相比之下,在重膜蛋白和膜级分中,半乳糖基转移酶的特异活性比16天大的动物中微粒体膜高3-4倍。酶在重绿色蛋白级分中的特定活性随着年龄的增长而急剧下降。对各个年龄段的重髓蛋白和髓磷脂亚折原的化学和酶学分析表明,膜级分所含的蛋白质与脂质有关,而不是重膜蛋白分数。与胆固醇相比,膜级分在磷脂中也富集,并含有2':3'-循环核苷酸3'-磷酸水解酶,而与重蛋白质和轻质蛋白质级别相比。膜馏分缺乏髓磷脂碱性蛋白和蛋白质蛋白,并富含高分子量蛋白。在髓鞘化刚刚开始的时候,半乳糖基转移酶在重膜蛋白和膜级分中的特定定位表明它可能在髓鞘化过程中起作用。