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大型底栖无脊椎动物环境DNA 监测技术规范
推荐采用市售商品化的DNA提取纯化试剂盒。如使用CTAB法提取DNA所需试剂如下： a) 乙二胺四乙酸二钠（Na 2 EDTA，C 10 H 14 N 2 O 8 Na 2 ·2H 2 O）。 b) 氢氧化钠（NaOH）。 c) EDTA 溶液：ρ（EDTA）=0.02 mol/L：称取5.8448 g EDTA 溶于适量超纯水中，NaOH 固体调节pH 至8.0，定容至1000 mL，121℃灭菌18 min，冷却后常温保存。 d) 三羟甲基氨基甲烷（Tris，C 4 H 11 NO 3 ）。 e) 浓盐酸：ρ（HCl）=1.19 g/mL。 f) Tris-HCl 溶液：ρ（Tris-HCl）=0.1 mol/L：称取15.76 g Tris-HCl 溶于适量超纯水中，浓盐酸调pH 至8.0，定容至1000 mL，121℃灭菌18 min，冷却后常温保存。 g) 十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）。 h) 氯化钠（NaCl）。 i) CTAB 提取液：称取4 g CTAB 和16.38 g NaCl，分别溶于适量超纯水中，加入0.02 mol/L EDTA 溶 液（5.3 c）8 mL 和0.1 mol/L Tris-HCl 溶液（5.3 f）20 mL，定容至200 mL，121℃灭菌18 min， 冷却后常温保存。 j) Tris 饱和酚（pH=8.0）。 k) 三氯甲烷（CHC l3 ）。 l) 异戊醇（C 5 H1 2O ）。 m) 酚氯仿：Tris 饱和酚、氯仿和异戊醇按25:24:1 体积比配制。 n) 乙酸铵（CH 3 COONH 4 ）。 o) 乙酸铵溶液，ρ（CH3COONH4）=7.5 mol/L：称取5.78 g 乙酸铵溶于10 mL 超纯水中。 p) 乙酸钠（CH 3 COONa·3H 2 O）。 q) 乙酸钠溶液，ρ（CH 3 COONa）=3 mol/L：称取102.06 g 乙酸钠溶于适量超纯水中，冰醋酸调节pH 至5.2，定容至250 mL，121 ℃灭菌18 min； r) 无水乙醇（C 2 H 6 O）。 s) 冰乙酸（C 2 H 4 O 2 ）。 t) 蛋白酶K：400 U/mL。 u) 超纯水：经121 ℃，0.1 MPa 灭菌30 min，无细菌无DNA 酶。
超声联合载药微泡改善肿瘤微环境增强免疫疗效的研究进展*
免疫检查点分子阻断剂 （ immune checkpoint blockade ， ICB ） 是肿瘤免疫治疗的有效策略之一 ， 其中靶向程序 性死亡受体 -1 （ programmed death receptor-1 ， PD-1 ） / 程 序性死亡配体 -1 （ programmed death-ligand 1 ， PD-L1 ） 的单克隆抗体主要在 TME 中发挥调节免疫细胞功能 的作用。 CD8 + T 细胞是抗肿瘤反应中极具破坏性的 免疫效应细胞群 ， 其浸润到 TME 的密度是影响免疫 检查点阻断治疗结果的预测指标 [ 18 ] 。研究表明 ， PD- 1/PD-L1 检查点抑制剂与化疗药物联合使用是治疗晚 期非小细胞肺癌的有效方法 ， 然而其在肝癌 、 前列腺 癌等实体肿瘤中效果并不理想 [ 19 ] 。为了增强 PD-L1 抗体免疫治疗疗效 ， Li 等 [ 20 ] 开发了一种偶联抗 PD- L1 单克隆抗体和负载多西紫杉醇 （ docetaxel ， DTX ） 多 功能微泡系统 ， 联合超声空化效应增加肿瘤细胞的凋 亡率和 G2-M 阻滞率 ， 还可以通过促进 CD8 + T 和 CD4 + T 细胞的增殖 、 降低细胞因子 VEGF 和 TGF-β 的水平来增强抗肿瘤作用。为了提高 PD-L1 抗体在 肝癌中的治疗效果 ， Liu 等 [ 21 ] 设计了一种携带 PD-L1 抗体和二氢卟吩 e6 （ chlorin e6 ， Ce6 ） 的靶向纳米药物 递送系统 ， 该类靶向纳泡可通过 PD-L1 抗体主动靶向 作用 ， 促进 Ce6 在肿瘤部位的聚集与释放 ， 并通过超 声介导 Ce6 声敏效应促进肿瘤细胞凋亡 、 诱导肿瘤细 胞发生免疫原性死亡 ， 同时通过 PD-L1 抗体对 PD- 1/PD-L1 信号通路的阻断促进 CD8 + T 在肿瘤组织中 浸润 ， 两者协同发挥抗肿瘤免疫反应。为了增强肿瘤 内部免疫细胞渗透 ， Wang 等 [ 22 ] 提出一种将 PD-L1 靶 向的 IL-15 mRNA 纳米疗法和 UTMD 结合的治疗策 略 ， 通过声孔效应特异性地将 IL-15mRNA 转染到肿 瘤细胞中 ， 激活 IL-15 相关的免疫效应细胞 ， 同时阻 断 PD-1/PD-L1 通路 、 诱导免疫原性死亡进而启动强 大的全身免疫反应。 3.3 超声联合载药微泡调节 TME 免疫抑制状态
盆底功能障碍女性盆底肌肉强度评估：信度与相关性研究
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盆底功能障碍女性盆底肌肉强度评估：信度与相关性研究
括约肌。盆底功能障碍 (PFD) 是指一组与 PFM 或结缔组织有关的疾病，包括盆腔器官脱垂 (POP)、尿失禁和/或肛门失禁以及性交困难。5 尽管评估 PFM 功能很困难，1,6 测量 PFM 强度、耐力和神经肌肉激活对于 PFD 女性的临床评估至关重要，以便指导治疗。5 目前没有测量 PFM 强度和耐力的黄金标准，但已使用了许多工具来实现此目的。1,5 阴道测压法测量最大阴道挤压压力，并且已被证明在 7,8 和 7,9,10 个评分者之间都是可靠的，然而，它受腹内压的影响很大。5 阴道测力也用于测量 PFM 强度。测力是通过窥器进行的，该窥器测量 PFM 收缩产生的前后峰值力，并且似乎具有很强的评分者内 11,12 和评分者间一致性，13,14 但是，尚未研究市售测力的可靠性和并发有效性。阴道触诊 1,8,9,14 – 19 价格低廉，在临床实践中广泛用于评估 PFM 收缩的质量、力量和耐力。但是，它是主观的并且评分者间可靠性较差。9,10,16 改良的牛津评分量表是手动评估 PFM 强度的常用量表。1 肛提肌测试 20,21 是目前西班牙、法国和比利时医院物理治疗评估方案中使用的一种阴道触诊方法，尚未通过 PFM 强度或激活度测量进行验证。肛提肌测试使用与改良牛津评分标准相同的 6 分制评分标准来量化 PFM 强度，但通过确保 PFM 激活能够持续和重复（表 1）进一步考虑收缩的质量。
底栖栖息地测绘指南
本文件是美国国家海洋和大气管理局 (NOAA) 沿海服务中心的经验、智慧和应用研究的产物。联邦、州和地方层面的许多个人都为本文件做出了贡献。作者特别要感谢北卡罗来纳州博福特 NOAA 沿海渔业和栖息地研究中心的 Randolph Ferguson 博士和 Lisa Wood，感谢他们为开发原始 NOAA 沿海变化分析计划：区域实施指南文件所做的努力以及他们对底栖生物测绘的持续支持。佛罗里达州鱼类和野生动物委员会、佛罗里达海洋研究所的 Frank Sargent 和马萨诸塞州环境保护部的 Charles Costello 一直是 NOAA 在沿海服务中心的底栖生物测绘工作的坚定支持者。他们对沿海环境问题的长远观点和务实态度使本文件受益匪浅。圣约翰河和南佛罗里达水资源管理区的 Robert Virnstein 博士和 Becky Robbins 分别通过合作项目工作帮助形成了这些方法。作者还要感谢 NOAA 沿海服务中心的工作人员，特别是 Dorsey Worthy 博士和 Steve Raber 的领导，感谢他们使本文档成为可能。
葛底斯堡警察局
第3章 - 一般操作。。。。。。。。。。。。。。。。。。33 300-对力的抵抗 /使用响应。。。。。。。。。。。。。34 301-使用力审查板。。。。。。。。。。。。。。。。。43 302-手铐和约束。。。。。。。。。。。。。。。。。46 303-控制设备。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。51 304-进行的能量装置。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。56 305-涉及军官的枪击事件和死亡。。。。。。。。。。。63 306-枪支。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。72 307-车辆追求。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。82 308-脚追随。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。95 309-官员对电话的反应。。。。。。。。。。。。。。。。。100 310-家庭暴力。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。104 311-搜索和癫痫发作。。。。。。。。。。。。。。。。。。。110 312-虐待儿童。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。113 313-成人虐待。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。120 314-歧视性骚扰。。。。。。。。。。。。。。。。。126 315-失踪人员。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。131 316-公共警报。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。138 317-受害者和证人协助。。。。。。。。。。。。。。。。141 318-仇恨犯罪。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。144 319-行为标准。。。。。。。。。。。。。。。。。。。146 320-信息技术使用。。。。。。。。。。。。。。。。。153
