摘要。表达标记蛋白的稳定细胞系和动物模型是研究细胞和分子行为的重要工具。已经应用了几种分子生物学技术来建立表达标记蛋白的细胞系,并取得了不同程度的成功和效率。在这里,我们应用 CRISPR/Cas9 将标记蛋白敲入内源基因位点的 5'UTR。通过这种 5'UTR 靶向敲入策略,建立了表达 Arl13b-Venus、Reep6-HA 和 EGFP-alpha-tubulin 的稳定细胞系,在抗生素选择的细胞中效率高达 50% 至 80%。敲入蛋白的定位与野生型细胞中内源蛋白的定位相同,并表现出均质表达。此外,从内源启动子敲入的 EGFP-alpha-tubulin 的表达在长期培养中是稳定的。我们进一步证明荧光信号足以进行长时间延时成像。在整个延时成像过程中,荧光信号清晰可见,并显示出特定的亚细胞定位。总之,我们的策略表明 5'UTR 是生成细胞系的合适位点,用于在哺乳动物细胞中稳定表达来自内源位点的标记蛋白。
延时照片捕捉了 SpaceX 猎鹰重型火箭从佛罗里达州 NASA 肯尼迪航天中心历史悠久的 39A 发射台升空的场景。太空系统司令部 (SSC) 及其任务合作伙伴于 2023 年 1 月 15 日东部时间下午 5:56(太平洋时间下午 2:56)准时升空,成功发射了美国太空军 (USSF)-67 任务。(照片由 SpaceX 提供)
一张延时照片捕捉了位于佛罗里达州NASA的肯尼迪航天中心的历史悠久的发射综合体中的SpaceX Falcon重型火箭的提升和上升。太空系统司令部(SSC)及其任务伙伴在下午5:56的准时升空后,成功发起了美国太空部队(USSF)-67任务。东部(太平洋2:56),2023年1月15日。(图片由SpaceX提供)
该领域研究主题的目的是进一步了解植入前胚胎的发展方式,并考虑用于评估胚胎生存能力的当前技术。如果我们可以加深对植入前胚胎发育期间发生的分子和细胞事件的理解,我们将更接近鉴定胚胎生存能力的新的潜在分子标记,这可能有一天可以用来增加体外受精的成功(IVF)。在小鼠胚胎或其他动物模型中发现了有关细胞和分子水平的人类胚胎发育的许多知识。因此,了解人类胚胎发育与其他动物模型之间的相似性和差异对于阐明人类胚胎发育过程中发生的分子步骤至关重要(Bissiere等人,2023年综述)。研究人员通常依靠培养的细胞系和干细胞来了解这些分子和细胞事件(White and Plachta,2020)。例如,OH等人。报告从猪胚泡中得出谱系特异性胚胎细胞系以评估基因表达。对于接受IVF的患者,传统上转移的胚胎选择过程取决于形态指标,最近,对细胞的遗传分析,例如对促性剂的非整倍性植入基因测试(PGT-A)(Harris等人,2021年)。有趣的是,在整个植入前胚胎的整个培养期内成像和特定的延时成像方面的进步为形态学研究提供了新的途径。例如,已经发表了有关通过IVF孕育的植入前胚胎中细胞质字符串(通过延时成像)的最新报道,这些胚胎试图将这种形态结构与胚泡质量和妊娠结局联系起来(Ma等,2022; Joo等,2023)。可以说,与胚胎延时成像相关的最尖端的研究是将人工智能(AI)应用于胚胎筛选。使用AI作为非侵入性胚胎筛查的手段是一个有希望的研究领域,但是在我们看到AI经常在诊所中使用之前,还需要学习更多(Jiang and Bormann,2023年)。
进步的成像技术大大提高了海洋视频和图像数据收集的速度。通常不会分析这些数据集的全部潜力,因为为多种物种提取信息非常耗时。这项研究证明了开源交互式机器学习工具Rootpainter的能力,可以快速准确地分析大型海洋图像数据集。在两个数据集中测试了根蛋白酶提取冷水珊瑚礁关联物种mycale Lingua的存在和表面积的能力:18 346个延时图像和1420个远程操作的车辆视频框架。与rootpainter集成的新纠正注释指标允许对何时停止模型训练并减少对手动模型验证的需求进行客观评估。使用Rootpainter创建了三个高度精确的M. Lingua模型,平均骰子得分为0.94±0.06。转移学习有助于两个模型的产生,将分析效率从6倍提高到16倍,比手动注释的延时图像快6倍。从两个数据集中提取表面积测量值,从而将来研究海绵行为和分布。向前迈进,交互式机器学习工具和模型共享可以大大提高图像分析速度,协作研究以及我们对生物多样性中时空模式的理解。
如果发生断电并在短时间内恢复,则可能会损坏连接到逆变器的电器。空调等电器至少需要 2-3 分钟才能重新启动,因为必须有足够的时间来平衡系统中的制冷剂气体。为防止此类损坏,请查看空调手册以了解它是否配备延时功能。如果没有,此逆变器可能会触发过载故障并终止所有输出以保护您的电器。但是,这仍然可能导致空调内部损坏。
监测,验证和会计(MVA)对于确保安全和长期的地质碳存储至关重要。地震监测是一种关键的MVA技术,它利用地震数据来推断Co 2饱和岩石的弹性特性。在地下存储储存库和潜在泄漏区域中CO 2的可靠会计需要准确的岩石物理模型。然而,基于常规生物 - 加斯曼方程的广泛使用的CO 2岩石物理模型可以大大低估CO 2饱和度对地震波的影响,从而导致不准确的会计。我们通过考虑多孔岩石中地震速度的应力依赖性和岩石框架上的CO 2的压力依赖性的两种影响,从而开发出准确的CO 2岩石物理模型。我们使用Kimberlina-1.2模型(以前提出的加利福尼亚州的地质碳存储位点)验证了我们的CO 2岩石物理模型,并使用我们的新岩石物理方法创建了延时弹性属性模型。我们将结果与使用常规生物加斯曼方程获得的结果进行了比较。我们的创新方法比Biot-Gassmann结果产生弹性特性的变化更大。使用我们的CO 2岩石物理模型可以复制实验室观察到的剪切波降低速度。我们的岩石物理模型增强了延时弹性波建模的准确性,并使用地震监测实现了可靠的CO 2会计。
2.2 供热管道传热动力学模型供热管道动态特性是指同一管道内热水入口温度和出口温度与时间的耦合关系,是描述热网蓄热特性的关键。在管道内,入口处的水温变化会缓慢延伸到出口,温度传递的延时基本与热水流过管道的时间相同。另外,由于管道内热水温度与环境温度存在差异,在流动过程中会有热量损失,导致水温下降。供热管道横截面积如图3所示,其中Δt为调度周期长度。
在 BMT,我们将数字孪生定义为“实物资产、流程 / 人员 / 地点 / 系统 / 设备的虚拟表示,当输入或提供真实世界数据时,可以做出有效决策,从而优化相关系统的性能和效用”。一组软件模型和模拟,辅以实时(或延时)测量数据,可以实现明智的决策过程。孪生首先是学习系统,由实时从传感器收集的数据驱动。下面提供了船舶数字孪生的示例组件结构,展示了如何将设计过程中的数字模型和文档与实物资产数据输入相结合,以提供智能决策支持、见解和优势。