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全基因组 CRISPR 筛选揭示了家蚕细胞活力和抗非生物和生物胁迫所必需的基因
高通量基因筛选是一种强大的方法，可用于在全基因组范围内研究基因功能并识别对某些压力负责的基因。在这里，我们开发了一种 piggyBac 策略，可将汇集的 sgRNA 文库稳定地递送到细胞系中。我们使用这种策略在家蚕细胞中进行基于全基因组成簇的规律间隔短回文重复技术 (CRISPR)-Cas9 的筛选。我们首先构建了一个包含 94,000 个 sgRNA 的单向导 RNA (sgRNA) 文库，该文库靶向 16,571 个蛋白质编码基因。然后，我们使用 piggyBac 转座子在 BmE 细胞中生成敲除集合。我们确定了 1006 个在正常生长条件下对细胞生存至关重要的基因。在已确定的基因中，82.4%（829 个基因）与七种动物物种中的必需基因同源。我们还确定了 838 个基因，它们的缺失促进了细胞生长。接下来，我们分别使用温度和杆状病毒对生物或非生物胁迫进行了针对特定环境的阳性筛选，从每个筛选中确定了几个关键基因和途径。总之，我们的结果为家蚕基因组的功能注释和解释导致各种条件的关键基因提供了一个新颖而通用的平台。这项研究还展示了在非模式生物中进行全基因组 CRISPR 筛选的有效性、实用性和便利性。
两个同源吲哚-3-乙酰胺 (IAM) 水解酶基因是拟南芥中 IAM 的生长素效应所必需的
吲哚-3-乙酰胺 (IAM) 是某些植物病原菌中第一个被证实的生长素生物合成中间体。外源施用 IAM 或通过过表达拟南芥中的细菌 iaaM 基因产生 IAM 会导致生长素过量产生表型。然而，植物是否使用 IAM 作为生长素生物合成的关键前体仍不确定。在此，我们报告了从正向遗传筛选中分离拟南芥中的 IAM 水解酶 1 (IAMH1) 基因，该筛选用于显示正常生长素敏感性的 IAM 不敏感突变体。IAMH1 有一个相近的同源物，名为 IAMH2，位于拟南芥 IV 染色体上 IAMH1 的旁边。我们使用我们的 CRISPR/Cas9 基因编辑技术生成了 iamh1 iamh2 双突变体。我们发现，IAMH 基因的破坏使拟南芥植物对 IAM 处理产生抗性，同时也抑制了 iaaM 过表达表型，这表明 IAMH1 和 IAMH2 是拟南芥中将 IAM 转化为 IAA 的主要酶。iamh 双突变体没有表现出明显的发育缺陷，这表明 IAM 在正常生长条件下在生长素生物合成中不起主要作用。我们的研究结果为阐明 IAM 在生长素生物合成和植物发育中的作用奠定了坚实的基础。
长链非编码 RNA TUG1 是 TGF-β/TWIST1/EMT 介导的结直肠癌细胞转移所必需的
摘要 结直肠癌 (CRC) 是全球癌症死亡的主要原因之一，而转移是 CRC 相关死亡的主要原因。转化生长因子-β (TGF- β) 不仅在调节正常结肠中起着重要作用，而且在 CRC 的发展和转移中也起着重要作用。然而，TGF- β 不被认为是理想的治疗靶点，因为它根据肿瘤阶段表现出促肿瘤发生和抗肿瘤发生的活性。因此，找到可以靶向损害 CRC 转移的 TGF- β 下游信号传导成分非常重要。在这里，我们表明 TGF- β 促进 CRC 迁移并上调长链非编码 RNA 牛磺酸上调基因 1 (TUG1) 的表达。TUG1 敲低抑制了体外 CRC 细胞的迁移、侵袭和上皮 - 间质转化 (EMT)，并降低了体内 CRC 肺转移。 TGF- β 诱导转移，而 TUG1 敲低则抑制了这种作用。此外，TGF- β 不能逆转 TUG1 敲低的抗转移作用。这些数据表明 TUG1 是 TGF- β 的下游分子。此外，TWIST1 表达随着 TGF- β 处理而增加，而 TUG1 敲低则降低了 CRC 细胞中的 TWIST1 表达。TWIST1 敲低抑制了 CRC 细胞的侵袭和 EMT；这些作用不受同时敲低 TUG1 的影响，表明 TWIST1 是 TUG1 的下游介质。此外，TUG1 在 CRC 患者中显著过表达。总之，TGF- β 通过 TUG1/TWIST1/EMT 信号通路促进 CRC 转移。TUG1 可能是抑制 TGF- β 通路激活治疗 CRC 的一个有希望的药物靶点。
LncRNA HBL1 是人类多能干细胞心脏发生过程中全基因组 PRC2 占据和功能所必需的 - PMC
在人类心脏发生中如何相互作用仍然难以捉摸。在这里，我们发现人类特异性心脏制动 lncRNA 1 (HBL1) 与人类多能干细胞 (hPSC) 中的两个 PRC2 亚基 JARID2 和 EED 相互作用。JARID2、EED 或 HBL1 的缺失显著增强了心脏从 hPSC 的分化。HBL1 耗竭破坏了全基因组的 PRC2 占据和必需心脏发生基因上的 H3K27me3 染色质修饰，并广泛增强了未分化 hPSC 和后来分化中的心脏发生基因转录。此外，ChIP-seq 显示在 HBL1 和 JARID2 hPSC 中 62 个重叠心脏发生基因上的 EED 占据率降低，表明心脏发生基因的表观遗传状态由多能性阶段的 HBL1 和 JARID2 决定。此外，在心脏发育后，HBL1 的细胞质和细胞核部分可以通过保守的“microRNA-1-JARID2”轴进行串扰，从而调节心脏发生基因转录。总体而言，我们的研究结果阐明了 HBL1 在引导 PRC2 功能在人类早期心脏发生过程中的不可或缺的作用，并扩展了 HBL1 的细胞质和细胞核部分可以协调人类心脏发生的 lncRNA 的机制范围。
接种肺炎球菌结合疫苗时，中性粒细胞是保护性抗体反应和宿主防御感染所必需的
（未经同行评审认证）是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者此版本于 2020 年 2 月 5 日发布。；https://doi.org/10.1101/2020.02.04.934380 doi：bioRxiv preprint
Klebanow＆Associates Covid-19疫苗筛查和同意书名称： *健康部报告所必需的报告：出生日期：性别：Primar
Klebanow＆Associates covid-19疫苗筛查和同意书名称： *健康部报告所必需的报告：出生日期：性别：性别：主要电话号码（患者或监护人）：种族：地址：地址：种族：COVID-19在过去的两个星期中，您对Covid-19的测试呈阳性吗？□□2。您在过去的10天发烧，发冷，咳嗽，呼吸急促，呼吸困难，□□□□□□□系情，肌肉或身体疼痛，头痛，味觉或气味的新丧失，喉咙痛，鼻子酸痛，鼻子酸痛，鼻子酸痛，鼻子，恶心，呕吐，呕吐或腹泻？3。您对这种疫苗的先前剂量还是对包括聚乙烯乙二醇在内的该疫苗的任何成分有严重的过敏反应？4。您对任何药物，食物，疫苗或乳胶有严重的过敏反应吗？□□5。您是否携带Epi-pen来紧急治疗过敏反应？□□6。您是免疫功能低下还是在影响您的免疫系统的药物上？□□7。您是否患有出血障碍，还是您的血液稀释剂/稀释药物？□□8。您是否接受过抗体疗法或康复等离子体的治疗，用于Covid-19□□在过去的90天（3个月）中？如果是，最后剂量的日期：9。您是否接受过任何Covid-19-19疫苗的剂量？此外，我在此同意Klebanow＆Associates管理Covid-19-19疫苗和报告给Immunet，并按照当地，州和联邦政府的其他要求。如果是，您收到的哪个制造商的□□疫苗在什么日期：__________________________________我证明我是：（a）患者和至少18岁； （b）患者的法定监护人，并确认患者至少12岁；或（c）有权同意上述患者的疫苗接种。我了解该产品尚未获得FDA的批准或许可，但已在EUA下被FDA授权使用，以防止Covid-19，以在12岁及以上的个人中使用Covid-19。我知道，无法预测与接收疫苗有关的所有可能的副作用或并发症。我了解与上述疫苗相关的风险和福利，并已收到，阅读和/或向我解释了我选择接收的Covid-19疫苗上的紧急使用授权概况说明书，这也可以在Klebanow＆Associates网站上找到。我还承认，我有机会提出问题，并以我的满意回答了这些问题。我承认并同意在管理后约15分钟（在某些情况下30分钟）在疫苗接种位置进行观察，以防万一发生任何立即反应。代表我自己，我的继承人和个人代表，我在此发布了管理疫苗（Klebanow＆Associates）及其所有责任或所有责任的所有者，董事，管理人员，董事，管理人员，雇员和代理商的提供者，无论是已知或与以上列表有关的任何与之相关的疫苗与管理有关的方式有关。我了解这种疫苗需要两次剂量，尽管Klebanow＆Associates将努力获得足够的剂量以完成两个剂量系列，但由于我们控制范围以外的限制，可能会有无法预测的疫苗供应问题，因此我们办公室可能无法使用所要求的剂量。我知道，尽管提供的疫苗是免费的，但我的保险将被收取疫苗管理费用。Signature of Patient or Authorized Representative: _______________________________ Date: _______________ For Minors, Print Name and Relationship of Authorized Representative: ___________________________________ OFFICE USE ONLY : Patient temp: _______________ Pfizer FIRST dose given □ Date of administration: ____________________ Pfizer SECOND dose given □ Initials: ____________________
并非所有电极通道都是必需的：仅从受刺激的大脑区域进行知识转移即可实现脑电图情绪识别
情感脑机接口 (aBCI) 的情绪识别在人机交互中引起了广泛关注。由于能够实时检测大脑活动且可靠性高，因此主要使用在一个数据库中收集和存储的脑电图 (EEG) 信号。然而，受试者之间的 EEG 个体差异很大，使得模型无法跨对象共享信息。新的标记数据是为新受试者单独收集和训练的，这需要花费大量时间。此外，在跨数据库收集 EEG 数据期间，会向受试者引入不同的刺激。视听刺激 (AVS) 通常用于研究受试者的情绪反应。在本文中，我们提出了一种大脑区域感知域自适应 (BRADA) 算法，以不同的方式处理听觉和视觉大脑区域的特征，从而有效地解决受试者之间的差异并缓解数据库之间的分布不匹配。BRADA 是一个与现有迁移学习方法配合使用的新框架。我们将 BRADA 应用于跨主题和跨数据库设置。实验结果表明，我们提出的迁移学习方法可以改善效价唤醒情绪识别任务。
对疟原虫传播所必需的生育基因进行系统性筛查，揭示了不同真核生物性别的保守方面
Claire Sayers，1、2、3 Vikash Pandey，1、2 Arjun Balakrishnan，1、2 Katharine Michie，4 Dennis Svedberg，5、7 Mirjam Hunziker，1、2 Mercedes Pardo，6 Jyoti Choudhary，6 Ronnie Berntsson，5、7 和 Oliver Billker 1、2、8、* 1 瑞典分子感染医学实验室，于默奥大学，于默奥，瑞典 2 于默奥大学分子生物学系，于默奥，瑞典 3 新南威尔士大学生物医学学院，悉尼，新南威尔士州，澳大利亚 4 新南威尔士大学 Mark Wainwright 分析中心，悉尼，新南威尔士州，澳大利亚 5 于默奥大学医学生物化学和生物物理学系，于默奥，瑞典 6 癌症研究所研究，英国伦敦 Chester Beatty 实验室 7 瑞典于默奥大学瓦伦堡分子医学中心 8 主要联系人 *通信地址：oliver.billker@umu.se https://doi.org/10.1016/j.cels.2024.10.008
ZSWIM8 能破坏许多小鼠 microRNA 的稳定性，并且是胚胎正常生长发育所必需的。Charlie Y. Shi 1,2,3 , Lara E. Elcavage 1,2,3
ZSWIM8 能破坏许多鼠类微小 RNA，并且是胚胎正常生长和发育所必需的 Charlie Y. Shi 1,2,3 , Lara E. Elcavage 1,2,3 , Raghu R. Chivukula 4 , Joanna Stefano 1,2,3 ,
舰船招募处公告第92号2024年1月18日自卫队等舰船...
及合同复印件（含收据）。 （过去5年内最近的5件。不足5件时，则全部认定，没有记录时可以省略。） B.能够证明您拥有制造该物项所必需的下列设备或同等设备的文件： （a）制造对象物项所必需的生产设备 （b）测量仪器、测试设备、特殊工具、检查所必需的设备等 （c）存储所需的借出物项、委托物项及政府供应物项的仓库 C.能够证明您拥有制造该物项所必需的下列系统和能力的文件： （a）能够制造标准和质量所要求的物项及连接设备。 （a）需要取得专利或其他工业产权（包括许可）的，相关专利或其他工业产权