A dynamic subpopulation of CRISPR-Cas overexpressers allows Streptococcus pyogenes to rapidly respond to phage Marie J. Stoltzfus 1 , Rachael E. Workman 1 , Nicholas C. Keith 1 , Joshua W. Modell 1 * 1 Department of Molecular Biology & Genetics, Johns Hopkins University School of Medicine, Baltimore, MD 21205, USA *Correspondence: jmodell1@jhmi.edu摘要许多CRISPR-CAS系统,可为细菌提供适应性免疫,以防止噬菌体,在其本土宿主中受到转录抑制。如何根据需要诱导CRISPR-CAS的表达,例如在噬菌体感染期间,人们对此仍然了解不足。在链球菌为链球菌中,一种非典型的指南RNA TRACR-L指导Cas9自动燃烧自己的启动子。在这里,我们描述了具有破坏Cas9结合并导致CRISPR-CAS过表达的单个突变的细胞的动态亚群。CAS9通过提高TRACR-L目标部位的突变率来积极扩大该人群。过表达者表现出更高的记忆形成率,旧记忆的效力更强,并且相对于野生型细胞具有更大的记忆存储能力,而野生型细胞非常容易受到噬菌体感染的影响。然而,在没有噬菌体的情况下,CRISPR-CAS过表达会降低健身。我们建议CRISPR-CAS过表达者是噬菌体防御中的关键参与者,使细菌种群能够对噬菌体的快速转录反应,而无需任何一个单元格中的短暂变化。引言有效的免疫系统必须迅速识别和破坏外国威胁,同时避免宿主内的类似主题。细菌编码了越来越多的免疫效应子来防御噬菌体(噬菌体)和质粒,但是这些系统如何平衡免疫力和自身免疫仍然是一个悬而未决的问题。CRISPR-CAS系统可为细菌提供针对异物核酸的适应性免疫,已作为转化基因编辑工具,但是在许多细胞类型中,CAS核酸酶的异源过表达是有毒的1-4。在其本地宿主中,CRISPR-CAS系统通常在没有噬菌体或其他压力源的情况下被转录抑制。尽管这种抑制能够减轻自身免疫性,但尚不清楚(i)原生CIRSPR-CAS启动子是否足够强大以在其解除抑制状态下引起自身免疫性以及(ii)如何根据需要暂时诱导CRISPR-CAS表达。在某些细菌和古细菌物种中,CRISPR-CAS表达对噬菌体感染的直接反应增加了5-9。但是,对噬菌体感染的任何反应都是与相对较短的裂解周期的种族,这可能会限制这种反应的效用。另一种策略是在噬菌体到来之前增加CRISPR-CAS的表达。的确,许多CRISPR-CAS阻遏物受环境信号的调节,可能会预测噬菌体感染,包括种群密度,包络压力和营养供应10-13。然而,噬菌体感染可能会或可能不会先于这些信号,我们想知道是否可能存在更可靠的机制来为噬菌体感染制备细胞。CRISPR-CAS免疫包括三个阶段:适应,生物发生和干扰。在适应性链球菌中II-A型系统,30 bp的噬菌体DNA或“间隔者”中被从噬菌体中捕获,并将其掺入CRISPR阵列的5'末端,并将
根据欧盟的永久性结构化合作 (PESCO) 安排(这是欧盟安全与防务政策 (CSDP) 的一部分),立陶宛和其他几个成员国于 2018 年创建了网络快速反应小组和网络安全互助 (CRRT) 项目。这些团队通常是军事和民间组织之间的合作。立陶宛领导 CRRT PESCO 项目,该项目目前由七个参与国(比利时、克罗地亚、爱沙尼亚、荷兰、波兰、罗马尼亚和斯洛文尼亚)和五个观察员国(芬兰、法国、希腊、意大利和西班牙)组成。CRRT 的领导层每年在参与国之间轮换,立陶宛保持共同领导职能。尽管该项目自成立以来已经进行了多次网络演习,但第一次 CRRT 于 2022 年 2 月下旬启动,以支持乌克兰,但由于俄罗斯地面入侵而从未部署。1
摘要:大脑 - 计算机界面(BCIS)广泛用于严重身体残疾患者的控制应用中。一些研究人员的目的是开发实用的脑控制轮椅。基于稳态的视觉诱发电势(SSVEP)的现有脑电图(EEG)基于BCI是为了控制设备控制的。这项研究利用了可靠的现有系统的快速响应(QR)代码视觉刺激模式。使用提出的带有四个可振动频率的视觉刺激模式生成四个命令。此外,我们采用了SSVEP特征提取的相对功率谱密度(PSD)方法,并将其与绝对PSD方法进行了比较。我们设计了实验来验证所提出系统的效率。结果表明,所提出的SSVEP方法和算法在实时处理中产生的平均分类精度约为92%。对于通过基于独立的控制模拟的轮椅,提议的BCI控制需要比键盘控制的时间大约五倍以进行实时控制。使用QR码模式的建议的SSVEP方法可用于基于BCI的轮椅控制。然而,由于长期连续控制,它因视觉疲劳而受到影响。我们将在严重的身体残障人士中验证和增强拟议的轮椅控制系统。
摘要。在供应链中计算机化和竞争竞争的增长趋势会导致不确定性和快速变异性,这使零售商和制造商水平的决策都做出了决定。在本文中,在战略客户存在的情况下,在非敏捷条件下开发了两种双层stackelberg模型(BLSM)。我们本文中的主要新颖方法是考虑在连续游戏中相互竞争的两个级别,以确定具有和没有敏捷能力的最佳生产和订单数量和价格。此外,使用Karush-Kuhn-Tucker(KKT)方法简化了两个提出的模型。然后,由于现有的不确定参数,它们通过可靠的优化(RO)技术进行了重塑。为了更好地评估模型的效率和适用性,它们已在实际情况下实施,并进行了比较和分析结果。
brivaracetam(BRV)是Racetam集团中的一个AED,被发现是与相关的Racetam Drug Levetiracetam(LEV)的类似物。3两种药物具有相似的作用机理,具有选择性和高亲和力,以结合与突触囊泡蛋白2a的结合,但它们的药理特征可能有所不同。3 BRV被加拿大卫生部批准为辅助疗法,用于管理不受常规治疗不满意控制的成年癫痫患者的部分发作性癫痫发作。4 Cadth常见药物审查(CDR)评估发现,基于四个多中心安慰剂对照的随机试验的证据,与安慰剂相比,BRV的癫痫发作频率的降低明显更大。5在没有头部试验的情况下,有关BRV与LEV的比较疗效和安全性的证据是有限的。3间接治疗比较发现,LEV和BRV在功效和不良事件(AE)之间没有统计差异 - 总体和非行为 - 除了头晕以外,这种情况以高剂量的BRV水平显着较高。6的行为不利事件(BAE)似乎在BRV中比LEV少。3,8,9
在2020年之前,新型病毒大流行的威胁无处不在,但在很大程度上被忽略了。在2019年冠状病毒病(Covid-19)大流行前12个月,我们的团队获得了流行病准备创新联盟(CEPI)的资助,以建立并验证基于我们的专有分子夹具次基疫苗开发的快速响应管道。在2019年的整个过程中,我们对我们的系统进行了两次模拟测试,用于快速抗原生产,以针对两种潜在的新兴病毒病原体,Achimota paramyxovirus和Wenzhou Mammarenavirus进行了模拟测试。对于每种病毒,我们表达了膜融合蛋白的一小部分重组变体,并筛选出表达水平,产物均匀性以及预期的三聚体前融合构象的存在。从这项练习中学到的教训为我们对Covid-19的反应铺平了道路,我们的候选抗原目前正在I期临床试验中。
1 Akyilmaz,E。,Yorganci,E。&Asav,E。铜离子会激活酪氨酸酶吗?溶液的生物传感器模型。生物电化学78,155-160,doi:10.1016/j.bioelechem.2009.09.007(2010)。2 Wang,J。电化学葡萄糖生物传感器。Chem Rev 108,814-825,doi:10.1021/cr068123a(2008)。3 Ghasemi-Varnamkhasti,M。等。使用生物电子舌头监测啤酒的衰老。食品控制25,216-224,doi:10.1016/j.foodcont.2011.10.020(2012)。4 Mishra,R。K.,Dominguez,R。B.,Bhand,S.,Munoz,R。&Marty,J。L.一种新型的基于自动流动流动性生物传感器,用于测定牛奶中有机磷酸盐农药。Biosens Bioelectron 32,56-61,doi:10.1016/j.bios.2011.11.028(2012)。5 Chambers,C。E.,Visser,M。B.,Schwab,U。&Sokol,P。A.囊性纤维化患者的粘液性呼吸道分泌物中N-酰胺类内酯的鉴定。FEMS Microbiol Lett 244,297-304,doi:10.1016/j.femsle.2005.01.055(2005)。6 Conroy,P。J.,Hearty,S.,Leonard,P。&O'Kennedy,R。J.基于生物传感器的应用的抗体生产,设计和使用。Semin Cell Dev Biol 20,10-26,doi:10.1016/j.semcdb.2009.01.010(2009)。7 Wang,J。基于肽核酸(PNA)识别层的DNA生物传感器。评论。Biosens Bioelectron 13,757-762,doi:doi 10.1016/s0956-5663(98)00039-6(1998)。
紧急管理社区敏锐地意识到映射技术(地理信息系统(GIS),遥感和全球定位系统(GPS))在支持应急操作方面的潜力(Mileti 1999,Cutter 2001)。尽管有这种认识,但对地理技术在应急响应中的应用和经验的系统知识在某种程度上受到限制。9月11日对世界贸易中心的袭击以及纽约市EOC的丧失提供了评估地理技术对灾难性灾难事件的使用的机会。掌握这些信息,我们可以开始确定可以告知其他社区的问题,并希望增加有关GIS和相关地理技术如何改善紧急准备和响应能力的知识基础。
2009年,国际发展研究中心(IDRC)邀请加勒比电信联盟(CTU)进行政策研究,旨在提供证据,以支持为加勒比海ICT开发制定合理的政策。 由IDRC资助,加勒比ICT政策快速响应计划(RRI)是CTU的第一个项目。 它代表了扩大活动的新阶段,并且CTU的推动力增加了其促进该地区促进ICT发展的任务。 加勒比海面临着许多威胁和挑战其社会和经济稳定。 暴露于气候变化的影响,增加犯罪活动,签约农业部门以及全球经济危机的影响正在侵蚀该地区的全球竞争力,并威胁着社会和经济可行性。 完全认识到这些威胁,加勒比政府致力于基于知识和信息来建立竞争优势。 他们已经承认,创建,共享和使用知识的能力必须成为塑造未来发展的推动力。 大多数人都认为有必要将其国家转移到知识社会和经济中,但是,尽管在电信市场的自由化后期,ICT大量支出,但该地区仍无法在推进基于ICT的发展议程方面取得重大进展。 许多人都同意,解决此问题的基本组成部分是需要基于证据的政策制定。 这反过来需要执行相关的区域研究。2009年,国际发展研究中心(IDRC)邀请加勒比电信联盟(CTU)进行政策研究,旨在提供证据,以支持为加勒比海ICT开发制定合理的政策。由IDRC资助,加勒比ICT政策快速响应计划(RRI)是CTU的第一个项目。它代表了扩大活动的新阶段,并且CTU的推动力增加了其促进该地区促进ICT发展的任务。加勒比海面临着许多威胁和挑战其社会和经济稳定。暴露于气候变化的影响,增加犯罪活动,签约农业部门以及全球经济危机的影响正在侵蚀该地区的全球竞争力,并威胁着社会和经济可行性。完全认识到这些威胁,加勒比政府致力于基于知识和信息来建立竞争优势。他们已经承认,创建,共享和使用知识的能力必须成为塑造未来发展的推动力。大多数人都认为有必要将其国家转移到知识社会和经济中,但是,尽管在电信市场的自由化后期,ICT大量支出,但该地区仍无法在推进基于ICT的发展议程方面取得重大进展。许多人都同意,解决此问题的基本组成部分是需要基于证据的政策制定。这反过来需要执行相关的区域研究。加勒比ICT政策快速响应计划(RRI)是一个有力的响应。CTU设想RRI将构成更大的区域推动力,以朝着加勒比海ICT行业的基于证据的政策发展。因此,我们希望该计划的结果(无论是全部还是部分地通过)将有助于为所涉及的主题领域的政策制定过程提供信息。CTU认识到,如果没有我们许多合作伙伴和利益相关者的亲切支持,这项倡议是不可能的。我要通过提供大量财务和其他支持来表示对IDRC的有机会进行该项目的机会。我还想向区域利益相关者社区的意见以及我对审查委员会成员的诚挚感谢和感谢,他们的努力在确保这项倡议是最高标准方面的努力至关重要。最后,我衷心感谢项目协调员Renique Murray先生和CTU工作人员的成员,他们的不懈努力使该计划的这一阶段取得了成功。当前的全球气候需要一个区域反应,这将超越讨论,这使我们采取了有意义的行动。因此,CTU敦促成员认真考虑这些发现,并强烈提倡采取行动。我们期待看到用于制定和实施推进该地区基于ICT的开发议程的结果的结果。CTU立场准备帮助其成员实施每个项目的建议。
nasa.gov › api › citations › downloads PDF 作者:D Mandl · 2005 · 被引用次数:4 — 作者:D Mandl · 2005 被引用次数:4 need for dynamic coordinated multi-sensor observations ... "Cell tower".com to sat.Funded by NMP ...These algorithms operate on the hyperspectral data to.