终生的海马神经发生由驻留在齿状回(DG)的亚细胞区域的多能成人神经干细胞(ANSC)池维持。指导NSC从发育状态到成人国家的过渡的机制尚不清楚。我们通过使用基于Nestin的报告基因小鼠在Cyclin d2中表明ANSC池是通过Cyclin D2依赖性增殖在生命的第一周中建立的。不存在细胞周期蛋白D2不会影响齿状回的正常发育,直到出生,但可以防止产后形成径向神经胶质样的ANSC。此外,逆转录病毒命运映射显示,ANSC是在出生后不久位于齿状回的前体的现场出生的。综上所述,我们的数据确定了至关重要的时间窗口和前体划分的空间位置,该划分产生了ANSC的持续人群,并证明了Cyclin D2在此过程中的核心作用。
摘要 身体色素沉着限制了体内成像,因此也限制了生物医学纵向研究的开展。一种绕过这一障碍的可能性是使用色素沉着突变体,这种突变体常用于斑马鱼和青鳉等鱼类。为了解决衰老的根本原因,短命的非洲鳉鱼 Nothobranchius furzeri 最近被确立为模型生物。尽管寿命短暂,但 N. furzeri 显示出哺乳动物衰老的典型迹象,包括端粒缩短、衰老细胞积聚和再生能力丧失。本文,我们报告了通过同时失活三个负责色素沉着的关键基因座来生成透明的 N. furzeri 系。我们证明这种名为 klara 的稳定系可用作不同应用的工具,包括行为实验和通过将荧光团整合到 cdkn1a (p21) 基因座来建立衰老报告基因,并在体内显微镜下复制所得系。
它们的活性如何结合起来控制 RNA 表达仍不清楚。在这里,我们设计了一种高通量报告基因检测方法,称为 ExP STARR-seq(增强子 x 启动子自转录活性调控区测序),并用它来检查人类 K562 细胞中 1,000 个增强子和 1,000 个启动子序列的组合兼容性。我们确定了增强子-启动子兼容性的简单规则:大多数增强子以相似的量激活所有启动子,并且内在增强子和启动子活性相乘地结合起来决定 RNA 输出(R 2 =0.82)。此外,两类增强子和启动子显示出微妙的优先效应。管家基因的启动子含有内置的激活基序,例如 GABPA 和 YY1 等因子,这降低了启动子对远端增强子的反应性。可变表达基因的启动子缺乏这些基序,对增强子表现出更强的反应性。总之,对增强子-启动子兼容性的系统评估表明,通过增强子和启动子类别调整的乘法模型可以控制人类基因组中的基因转录。
了解蛋白质表达动力学对于对细胞分化的机械理解至关重要。我们研究了NGN3的动力学,NGN3的动力学是胰腺内分泌发育至关重要的转录因子,包括其功能和解码机制。敲击内源性报告基因表明,Ngn3蛋白的表达在人IPS衍生的内分泌祖细胞中具有13小时的周期性振荡,并且随着细胞与β样细胞和α样细胞的分化而被关闭。增加NGN3蛋白的稳定性会导致一个宽的表达峰,而不是振荡,而较大的峰到槽变化。这导致早熟的内分泌与β样细胞和α样细胞以及关键NGN3靶基因的早熟表达。对动力学,数学建模和生物信息学的单细胞分析表明,NGN3振荡的解码是通过折叠式检测通过不一致的前馈基序进行的,该基序解释了正常和早熟的分化。我们的发现表明振荡性NGN3动力学控制分化的时机,但不能控制命运规范。
抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)是一种抗体作用机理,通过该抗体,病毒感染或其他疾病的细胞针对细胞介导的免疫系统(例如天然杀伤细胞)的成分来破坏。ADCC报告基因生物测定是一种生物发光的记者测定,用于在ADCC作用机理(MOA)测定中量化通过治疗抗体药物在途径激活途径激活的生物学活性。可以使用ADCC生物测定效应器单元,传播模型(A – C)(Cat。G7102)进行ADCC记者生物测定,此处描述了该模型,该模型允许在独特的购买协议下进行单元格库和传播。该测定方法结合了一种简单的添加混合阅读格式和优化的协议,以提供较低的可变性和高精度的生物测定。这些性能特征使生物测定法适合在抗体药物研究,开发和制造批次释放中应用。
在过去的二十年中,荧光转录和翻译报告基因已被用来绘制各种植物组织中 NAP 基因和蛋白质的活性图谱[10-12]。此外,反应成分之间的蛋白质 - 蛋白质相互作用 (PPI) 和蛋白质 - DNA 相互作用网络也已建立[13-16]。这些研究定性地揭示了每个信号蛋白家族的功能,并建立了生长素驱动基因激活的通用机制模型。然而,众所周知,植物组织对生长素的反应极其多样;例如,高浓度的生长素会抑制根的生长,却促进下胚轴的生长[17-19]。这表明单靠定性信息不足以解释不同的生长素敏感性和细胞/组织特异性反应。生长素反应的动态和多样性可以通过细胞蛋白质丰度、PPI/蛋白质-DNA相互作用亲和力、复杂化学计量、周转率等进行加密。在此,我们认为系统定量分析生长素反应是生长素研究的下一个前沿。
摘要。背景/目标:三重阴性乳腺癌(TNBC)是一种积极的乳腺癌类型,化疗靶标有限。这项研究评估了新型Imidazo [2,1-B]基于奥恶唑的抑制作用迅速加速的纤维肉瘤(RAF)抑制剂,KIST0215-1和KIST0215-2,对上皮细胞转化和TNBC肿瘤的抑制作用。材料和方法:进行了免疫印迹,BRDU掺入分析,报告基因测定和软琼脂测定分析。体内效应。结果:KIST0215-1和KIST0215-2抑制了EGF在MDA-MB-231细胞中诱导的RAFS-MEK1/2-ERK1/2信号传导途径,这抑制了C-FOS转录活性和激活剂蛋白-1反式激活活性。KIST0215-1和KIST0215-2还防止了EGF诱导的JB6 C141小鼠表皮细胞的肿瘤转化,并始终抑制BALB/C小鼠中4T1细胞形成的肿瘤的生长。结论:使用KIST0215-1和KIST0215-2抑制RAF激酶是治疗TNBC的有前途的化学治疗策略。
输送系统以监测和控制药物分子的释放。喹酮甲基消除多年来已被用作独特的适配器,以控制刺激反应系统的自动性特性。7基于奎因酮或偶氮酮甲基化学的分子适配器的表现就像反应性基团和报告基因部分之间的稳定垫片,并且在拉动触发器时可以进行1,4-,1,6或1,8型消除反应。8结果是形成喹酮甲基物种和记者组的释放。9使用P-氨基苄醇(PABA)衍生物,当适当的刺激产生游离胺时,会发生1,6电子级联反应,从而释放出在苯二元位置结合的片段(方案1A)。然而,这种自使性过程依赖于包含具有高核氨基糖特征的官能团的分子,即有一个P K A#9.0(方案1A)。10
摘要。胃癌 (GC) 是全球范围内导致大量死亡的疾病。尽管人们在治疗该癌症方面做出了巨大努力,但 GC 患者的生存率仍然不尽人意。越来越多的证据表明 miR-29c-3p 可抑制癌症进展。然而,miR-29c-3p 在 GC 中的作用机制仍未完全明确。因此,本研究旨在分析 miR-29c-3p 在 GC 中的潜在机制。结果显示 miR-29c-3p 在 GC 组织和细胞系中明显下调。功能实验表明 miR-29c-3p 抑制了 GC 细胞恶性行为。此外,生物信息学分析和双荧光素酶报告基因检测表明 MEST 是 miR-29c-3p 的靶向靶点。救援试验进一步证明 MEST 参与了 miR-29c-3p 在 GC 中的功能。综上所述,miR-29c-3p/MEST信号通路抑制胃癌恶性表型的形成,靶向该信号通路可能成为治疗胃癌的新方法。关键词:胃癌,miR-29c-3p,MEST,增殖,迁移,侵袭引言
摘要。– 目的:揭示 miRNA-1246 通过结合 CX-CR4 并下调其水平影响 RCC 增殖和迁移能力的作用。患者和方法:测定 40 例 RCC 组织和邻近正常组织中 miRNA-1246 和 CXCR4 的相对水平。通过双荧光素酶报告基因检测确认 miRNA-1246 和 CXCR4 之间的结合关系。评估 miRNA-1246 和 CXCR4 调节的 RCC 增殖和迁移能力。结果:miRNA-1246 在 RCC 组织和细胞系中下调。过表达 miRNA-1246 会减弱 786-O 和 769-P 细胞的增殖和迁移能力。 CXCR4 是 miRNA-1246 的直接靶点,其水平受 miRNA-1246 负向调控。CXCR4 的沉默可抑制肾细胞癌的增殖和迁移。结论:MiRNA-1246 通过下调 CXCR4 来减弱肾细胞癌的增殖和迁移能力。MiRNA-1246/CXCR4 轴可能是肾细胞癌的潜在治疗靶点。