在鸡中,原始生殖细胞 (PGC) 是基因敲入等高级基因组编辑的有效靶点。尽管已经建立了鸡 PGC 的长期培养系统,但仍有必要选择一种高效、精确的基因编辑工具来编辑 PGC 基因组,同时保持其对生殖系统的贡献能力。与传统用于生成敲入鸡的同源重组方法相比,成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR)/CRISPR 相关蛋白 9 (Cas9) 和 CRISPR 介导的精确整合到目标染色体 (CRIS-PITCh) 方法更胜一筹,因为供体载体更易于构建、基因组编辑效率高,并且不会选择目标细胞。在本研究中,我们利用 CRIS-PITCh 方法将荧光蛋白基因盒作为融合蛋白整合到鸡 PGC 的鸡血管同源物 ( CVH ) 基因座中,从而设计了敲入鸡 PGC。敲入 PGC 在体内和体外均表达荧光蛋白,便于对 PGC 进行追踪。此外,我们还表征了设计双敲入细胞系的效率。通过有限稀释获得敲入细胞克隆,并通过基因分型确认设计双敲入细胞系的效率。我们发现 82% 的分析克隆都成功敲入了两个等位基因。我们认为,从敲入 PGC 中生产模型鸡可用于各种研究,例如阐明鸡的生殖细胞命运和性别决定。
T细胞受体(TCR)曲目测序已成为理解宿主免疫系统中T细胞多样性和功能的强大工具。然而,尽管鸡在农业中的重要性和作为免疫学模型,但由于对TCR基因群的不完整基因组注释,鸡肉TCR曲目仍然很少理解。在这里,我们通过使用5'互补DNA末端(5'种族)TCR曲目测序的5'快速放大来解决这个关键问题。同时,我们增强了TCR变量(V)的基因组注释,多样性(D,仅存在于B和D基因座中),并在鸡基因组中加入(J)基因。为提高TCR注释的效率,我们开发了VJ-Gene-Finder,这是一种算法,旨在从脱氧核糖核酸(DNA)序列中提取VJ基因候选物。使用此工具,我们完成了所有已知鸡TCR基因座的全面注释,包括染色体上的A / D基因座。< / div>。进化分析表明,每个基因座通过长长同源单元的重复分别演变。为了定义健康鸡的基线TCR多样性并证明了该方法的可行性,我们表征了脾脏A / B / G / D TCR库。对曲目的分析揭示了在所有链中特异性V和J组合的优先用法,而总体特征是无偏曲线的特征。但是,B和D曲目主要是每只鸟的独特之处。我们观察到了A和G链曲目内的单个鸟类中的中等水平的共享互补性区域3(CDR3)clonotypes,包括最常见的clonotypes。总的来说,我们的TCR曲目分析使我们能够破译鸡T细胞的组成,多样性和功能。这项工作不仅代表了理解禽类T细胞生物学的重要一步,而且还将阐明宿主病原体相互作用,疫苗发育和鸟类免疫学的进化史。
年龄(天) 疫苗剂量/鸡 接种途径 日龄 马立克氏病 0.3 S/C 5-7 ND+IB 0.025 E/D 8-12 甘博罗 0.025 E/D 18-20 甘博罗 0.025 D/W 21-22 ND(拉索塔) 0.025 D/W 32-34 甘博罗 0.025 D/W 38-40 ND(拉索塔) 0.025 D/W 第 7 周 鸡痘 一针浸液 W/W 第 8 周 鼻炎 0.25 S/C, I/M 第 11 周 ND+IB 0.25 D/W 第 14 周 鼻炎 0.25 S/C, I/M 第 16 周 ND+IB+EDS 0.50 S/C, I/M每两个月 ND(Lasota) 0.50 D/W
目录 第 1 部分 教育和工作经历 4 第 1.1 部分 教育经历 4 第 1.2 部分 工作经历 4 第 2 部分 研究经费 5 第 2.1 部分 外部资助的研究补助金 5 第 2.2 部分 内部资助的研究补助金。 9 第 2.3 部分 (非研究)资金记录 9 第 3 部分 奖学金 10 第 3.1 部分 同行评审期刊出版物 10 第 3.2 部分 正在评审或待修订的同行评审期刊出版物。 22 第 3.3 部分 带有演示文稿的同行评审会议记录 23 第 3.4 部分 专利和披露 29 第 3.5 部分 受邀演讲或主题演讲。 30 第 3.6 节 无论文的会议报告(自 2017 年起) 33 第 3.7 节 书籍和书籍章节 36 第 3.8 节 其他出版物 36 第 3.9 节 国家和国际研究奖项和认可 37 第 3.10 节 地区和地方研究奖项和认可 37 第 3.11 节 受邀专家小组 37 第 4 节 教学、教学法和学生咨询 38 第 4.1 节 教授的课程 38 第 4.2 节 指导至完成学业的博士生 39 第 4.3 节 当前正在攻读的博士生。 40 第 4.4 节 访问学者和博士后 40 第 4.5 节 硕士生(论文选项) 41 第 4.6 节 本科生 42 第 5 节 服务 43 第 5.1 节 期刊编辑或副编辑 43 第 5.2 节 论文评审的期刊 43 第 5.3 节 国际和国家组织的领导职位 43 第 5.4 节 地区和地方组织的领导职位。 44 第 5.5 节 专业组织的成员资格 44 第 5.6 节 研究评审小组 44 第 5.7 节 内部委员会的领导职位。 45 第 5.8 节 其他服务成就 46
目标: 让学生理解 C 语言的基本概念 第一单元:C 语言概述:C 语言的历史 –C 语言的重要性 –C 语言的基本结构 – 编程风格 – 常量、变量和数据类型 – 变量的声明、存储类别 – 定义符号常量 – 将变量声明为常量、易失性 – 数据的溢出和下溢。 运算符和表达式:算术、关系、逻辑、赋值运算符 – 增量和减量运算符、条件运算符、位运算符、特殊运算符 – 算术表达式 – 表达式的求值 – 算术运算符的优先级 – 表达式中的类型转换 – 运算符优先级和结合性-数学函数 – 管理 I/O 操作:读写字符 – 格式化的输入、输出。 第二单元:决策和分支:if 语句、if...else 语句 – 嵌套 if ... else 语句 – Else if 阶梯 – Switch 语句 – ?: 运算符 – go to 语句。控制语句:While 语句 – do 语句 – for 语句 – 循环跳转数组:一维数组 – 声明、初始化 – 二维数组 – 多维数组 – 动态数组 – 初始化,UNIT-III:字符串:字符串变量的声明、初始化 – 读写字符串 – 字符串的算术运算 – 将字符串放在一起 – 比较 – 字符串处理函数 – 字符串表 – 字符串的功能。用户定义函数:需要 –
Prestwich 博士是植物抗病性、可持续农业和植物改良与转化替代方法领域的领先专家。Prestwich 博士在作物研究方面的长期经验与本提案和申请人的职业抱负完全吻合。她是生物地球与环境科学学院的首席研究员和植物科学系主任,目前教授 15 个本科生和 1 个研究生课程。她的研究兴趣包括:开发植物改良与转化替代方法 (CRISPR)、促进马铃薯系统的可持续发展以及在爱尔兰可持续植物生产中使用 CRISPR 技术。这些项目由欧洲的国家和国际机构资助。她是国际植物生物技术协会 60 年历史上第一位女主席。在她众多的研究成果中,她在马铃薯抗病方面的工作完美地补充了这个项目的目标。她在生物防治剂、促进植物生长的根瘤菌、微生物挥发性有机化合物 (mVOC) 方面的经验对本项目非常有价值,并将为进一步的资助提案提供机会。她在植物生物技术和分子生物学方面的经验与该项目特别相关,用于生产“非转基因”草莓植物。她超过 22 年的宝贵教学和研究经验将极大地有益于申请人的职业培训方面,并使她成为完美的导师。
摘要:在临床实践中,我们经常处理患有非酒精性脂肪性肝病 (NAFLD) 和 2 型糖尿病 (T2DM) 的患者。NAFLD 的病因主要与胰岛素抵抗 (IR) 和肥胖有关。同样,后者患者正在发展为 T2DM。然而,NAFLD 和 T2DM 共存的机制尚未完全阐明。考虑到这两种疾病及其并发症都具有流行病的规模,并显著影响寿命和生活质量,我们旨在回答哪种疾病首先出现,从而强调对它们的诊断和治疗的必要性。为了解决这个问题,我们介绍并讨论了这两种共存代谢疾病的流行病学数据、诊断、并发症和发病机制。由于缺乏统一的 NAFLD 诊断程序,并且这两种疾病都是无症状的,尤其是在其早期阶段,这个问题很难回答。总而言之,大多数研究人员认为 NAFLD 是第一种疾病,并开启了一系列最终导致 2 型糖尿病发展的情况。然而,也有数据表明 2 型糖尿病是在 NAFLD 之前发展的。尽管我们无法明确回答这个问题,但让临床医生和研究人员注意 NAFLD 和 2 型糖尿病的共存非常重要,以防止其后果。