摘要:创建转基因微生物的“无标记”策略避免了潜在的抗生素抗性基因向其他微生物传播的问题。已经建立的策略,用于设计绿色Microalga衣原体的叶绿体基因组(= plastome)Reinhardtii,涉及使用在钥匙光合作用基因中携带质体突变的受体菌株恢复光合作用功能。在最小培养基上进行转化菌落的选择,使得只有在转基因DNA上进行的野生型拷贝代替突变基因的细胞才能具有光营养的生长。然而,由于使用有限的光敏性表型的突变株,这种方法可能会遭受效率问题,而在最小培养基上的生长缓慢以及未转换的细胞草坪的缓慢倒退。此外,这种光营养的救援往往依靠现有的突变体,这些突变体不一定是转化和靶向转基因插入的理想的:携带点突变的突变体可以轻易恢复,而那些没有删除的突变体不扩展到预期的转基因插入部位,这会引起缺乏过境的救援线的群体,从而引起了缺乏过境的线索。为了改善和加速C. renhardtii的转换管道,我们创建了一个新颖的受体线Hnt6,该系列在PSAA的外显子3中携带了工程删除,该删除编码了光学系统I(PSI)的核心亚基之一。我们使用荧光素酶报道器演示了HNT6的应用。这种PSI突变体是高度光敏的,可以通过在含乙酸乙酸酯的培养基上选择轻耐性,而不是在最小培养基上的光营养生长来更快地恢复转化菌落。缺失延伸到PSAA-3上游的位点,该位点是用于转基因插入的中性基因座,从而确保所有回收的菌落都是包含转基因的转化体。
™ ( 合成的crRNA 和tracrRN) 和重组的Cas9 蛋白可以形成特核糖核蛋白复合物(RNP) 。 直接转染sgRNA-Cas9 RNP 可以避免质体DNA 嵌入宿主基因组, 也可进一步增强和扩展CRISPR 基因修饰技术的应用。 早期的报导表明, 与转染Cas9 质体相比, 利用sgRNA-Cas9 RNP 转染的基因组修饰具有更高的特异性(Juris et al. 2015, Kim et al., 2014, Lin et al. 2015, Liang et al. 2015) 。 此外, sgRNA- Cas9 RNP 技术在细胞治疗应用中也具有更好的愿景, 比如近期成功获得基因插入的人类原代T 细胞(Schumann et al. 2015) 。
国防部 (DOD) 正在改变其业务方式,以应对快速发展的威胁。传统的空间开发风险规避方法倾向于高性能卫星系统,基于优化设计和缓慢的星座更新速度。这通常只生产足够的产品来更换长寿命航天器,并在航天器的使用寿命超过初始预测时进行定期调整。这种方法限制了技术插入的机会,不鼓励对长期生产效率的资本投资,并且无法解释在积极冲突期间可能发生的人员流失。为了避免这些限制,国家安全太空企业应考虑采用持续生产敏捷性 (CPA) 方法,该方法侧重于在短时间内(例如五年)交付整个星座,并立即按照计划开始补给过程。
无线专业套件由一个或多个插入主板的主板和无线电板组成。可用的无线电板,每个无线电板都有不同的硅实验室设备,具有不同的操作频段。由于主板设计用于使用不同的无线电板,因此在无线电板上完成了从设备引脚到主板功能的实际引脚映射。这意味着每个无线电板都有自己的销钉映射到无线专业套件功能,例如按钮,LED,显示器,EXP标头和突破垫。由于每个无线电板的销映射都不同,因此请咨询正确的文档很重要,该文档显示了插入的无线电板的套件功能。
“ Micar7是周到的设计和出色的工程学的产物”,Antion首席执行官Marco Alessandrini博士博士说。“我们着手开发多模式细胞疗法,不仅可以解决CD7阳性恶性肿瘤中的临床未满足需求,而且还克服了可能损害治疗功效的重大挑战。在开发MICAR7中,我们意识到了出色的工程效率,从而产生了> 99%的生产后纯度,这意味着产品中的所有细胞都具有所有修改。从安全的角度来看,由于所有调制均来自仅需要单个有效载荷插入的单个基因构建体,因此染色体畸变的风险有限,其他多重基因组工程模式也是如此。此外,MICAR7 T细胞在功能性的体外测定和体内模型中表现出色。”
DNA链的合成仍然是DNA存储系统中最昂贵的一部分。因此,要使DNA存储系统更加实用,必须优化合成过程中使用的时间和材料。我们考虑了最常见的合成过程,其中多个DNA链与一个共同的交替超台式并行合成,一次是一个核苷酸。合成时间或合成周期的数量由这种共同超台式的长度确定。在此模型中,我们设计的第四纪代码可以最大程度地减少可以纠正缺失或插入的合成时间,这是基于数组的合成中最普遍的错误类型。我们还提出了将二进制字符串编码为这些代码的多项式时间算法,并表明速率接近容量。
TDC.Leenay:原代 T 细胞是一种很有前途的治疗性基因组编辑细胞类型,因为它们可以在体外有效地进行工程改造,然后转移到患者体内。该数据集包括对来自 15 名供体的原代 CD4+ T 细胞进行 CRISPR-CAS9 敲除实验的 DNA 修复结果 [ 82 ]。对于来自 553 个基因的 1,521 个独特基因组位置中的每一个,都提供了 20 个核苷酸的指导序列以及 3 个核苷酸的 PAM 序列。预测包括 5 个修复结果:插入的 indel 读取分数、平均插入长度、平均删除长度、indel 多样性、移码修复结果分数。建议的数据拆分:随机拆分;评估:MAE;单位:长度为 #、分数为 %、多样性为位;许可证:CC BY 3.0。
一个困难的基因组编辑目标是大型遗传构建体的位点特异性插入。我们在此描述了 GENEWRITE 系统,其中 Cas 内切酶的位点特异性靶向活性与人类逆转录转座子 LINE-1 的 ORF2p 蛋白的逆转录酶活性相结合。这是通过提供两种 RNA 来实现的:一种靶向 Cas 内切酶活性的向导 RNA 和一种编码所需插入的适当设计的有效载荷 RNA。我们使用大肠杆菌作为开发和部署的简单平台,表明通过适当的有效载荷设计和辅助蛋白的共表达,GENEWRITE 可以使用所述方法将大型遗传有效载荷插入精确位置,尽管存在脱靶效应。基于这些结果,我们描述了在更复杂的系统中实施 GENEWRITE 的潜在策略。
摘要。Cleansky2项目Solifly正在为航空应用开发更多的结构电池。本文提出了结构整合的概念以及评估结构电池整合对CFRP固体层压板机械性能的影响的方法,考虑到结构电池插入的尺寸和形状以及通过层压层厚度的位置考虑到其位置。已经实施了有限元仿真的完全参数,计算有效的数值策略来评估机械性能,并且首次随着细胞几何形状和集成位置的变化,矩阵损伤的首次开始。使用数字图像相关性和声学发射,获得了SB细胞成分和细胞原型的第一个机械表征数据。讨论了对功能分离组件的SB集成概念的优势和权衡的初步评估。
图1:(a)描述用于检测非参考TE 97插入的读取图信息的图表。简短读取与参考基因组对齐,并读取98,其中一个在对参考基因组中读取,而另一个读取为TE序列99(不一致的映射读取)或读取一对在参考和TE 100序列之间分配的,而TE 100序列(分裂读数)被量化。(b)Teforest管道的概述。输入和输出101个文件显示在椭圆形中,管道中的重要分支点显示在钻石中,管道的102个计算步骤显示在矩形中。(c)IGV中显示的TE插入周围的103个对齐模式的示例。将映射到基因组中其他地方的TE序列104中以颜色显示。105