图 2:在 K-562 细胞中通过电穿孔优化 HDR 介导的报告基因敲入。A. LMNA -EGFP 供体质粒单独电穿孔,浓度增加,显示非特异性 EGFP 表达量较低。Cas9 蛋白:crRNA:tracrRNA 电穿孔,LMNA -EGFP 供体质粒浓度增加,显示 EGFP 表达相关增加。B. 放大倍数增加后,HDR 介导的敲入样本中 EGFP 表达的定位与 LMNA 的预期一致,位于细胞核中,并与 Hoechst 染色共定位。C. HDR 介导的敲入细胞群的流式细胞术分析显示,随着 DNA 供体质粒数量的增加,EGFP 表达增加高达 32%。单独 DNA 供体质粒对照的相应分析显示所有剂量的 EGFP 表达均低于 0.5%(未显示数据)。
fi g u r e 1用eribulin治疗的乳腺癌病例。(a)用eribulin治疗的乳腺癌病例的总体存活。Kaplan-临时分析用嗜中性粒细胞与淋巴细胞比率(NLR)<3对埃里布林治疗的患者的总生存率分析<3对≥3。(b)人类白细胞抗原(HLA)I类分子的免疫组织化学(IHC)染色。使用抗HLA I类抗体的苏木精和曙红(HE)染色和IHC染色的代表性图像。放大倍数,×200。两例在eribulin治疗前后分析。案例1是59岁(Y.O.)女性,侵入性导管癌(IDC)病例。案例2是56岁的女性IDC案例。alc,绝对淋巴细胞计数; CI,置信区间;人力资源,危险比; PR,孕酮受体;恢复,实体瘤的反应评估标准; TTP,进展的时间。
•在1932年,西门子和Halske的恩斯特·拉布克(Ernst Lubcke)从原型电子显微镜中构建和获得图像,应用了Rudenberg专利应用中描述的概念。五年后(1937年),该公司资助了恩斯特·鲁斯卡(Ernst Ruska)和博多·冯·博里斯(Bodo von Borries)的工作,并雇用了赫尔穆特·鲁斯卡(Helmut Ruska)(恩斯特的兄弟)为显微镜开发应用程序,尤其是使用生物学标本。同样在1937年,曼弗雷德·冯·阿登(Manfred Von Ardenne)率先扫描电子显微镜。第一个实用的电子显微镜由Eli Franklin Burton和学生Cecil Hall,James Hillier和Albert Prebus于1938年在多伦多大学建造。西门子在1939年产生了第一个商业传输电子显微镜(TEM)。尽管当代电子显微镜能够进行两百万驱动器的放大倍数,但作为科学仪器,它们仍然基于Ruska的原型。
总学时:56 单元 1. 微生物学的简介、历史和范围 14 小时 1. 微生物和生命起源。 2. 微生物学的历史发展 - 自然发生和生物发生理论。 安东尼·冯·列文虎克、爱德华·詹纳、拉扎罗·斯帕兰扎尼、路易斯·巴斯德、约瑟夫·利斯特、罗伯特·科赫、亚历山大·弗莱明、贝耶林克、维诺格拉茨基和伊万诺夫斯基的贡献。 3. 印度科学家对微生物学领域的贡献。 4. 作为一门现代和相关健康科学的微生物学范围。 5. 微生物学的分支。 单元 2. 微生物学中使用的仪器和染色技术 14 小时 显微镜 1. 显微镜原理 - 分辨力、数值孔径、焦距和放大倍数 2. 显微摄影原理。 3. 工作原理和应用 a) 简单和复合显微镜 b) 暗场显微镜 c) 荧光显微镜 d) 电子显微镜 -TEM 和 SEM
位点特异性 DNA 裂解 (SSDC) 是许多细胞过程中的关键步骤,对基因编辑至关重要。这项工作描述了一种能够同时测量许多单个 DNA 分子中的 SSDC 的动力学分析。在微流体流道中制备珠子束缚的底物 DNA,每个底物 DNA 都包含目标序列的单个副本。外部磁铁对顺磁珠施加弱力。通过使用宽视野、低放大倍数物镜在暗场成像下可视化微珠,可以监测多达 1,000 个单个 DNA 的完整性。注射限制性内切酶 NdeI 会启动裂解反应。视频显微镜用于通过观察相关珠子向上移动并移出物镜焦平面的帧来记录每个 DNA 裂解的确切时刻。逐帧珠子计数量化反应,指数拟合确定反应速率。该方法允许在单个实验中收集单分子 SSDC 反应的定量和具有统计意义的数据。
1。周期表2。组和周期3。开发周期表4。Mendeleev的周期表5。原子和同位素6。质量和原子编号7。电子配置8。组0 9。第1组10。组7 11。能量类型12。能量商店的变化13。能量计算14。使用等式15。真核和原核细胞16。亚细胞结构17。使用显微镜18。计算放大倍数19。权力和能量20。效率21。干细胞22。有丝分裂23。第1组和7个元素的属性24。写作和平衡等式25。病原体 - 细菌,病毒,真菌和原生动物26。身体防御机制27。白细胞28。疫苗接种,抗体和止痛药29。药物开发和测试30。离子和共价键31。小而巨型共价结构的特性32。金属粘结33。石墨烯和富勒烯34。电流和电荷35。系列和平行电路,测量电流和电势差36。电阻
辐射分析。如先前的研究所示,在健康个体中,蠕动波克服了LE的高音调,尽管胃中的压力升高,但尽管胃中的压力升高,尽管胃中的压力升高,但仍将推注进入胃中。因此,不可能在健康人中看到合同的LES。GERD中的炎症过程削弱了蠕动波的力,导致LES收缩和钡被困在收缩的上和下食管括约肌之间。食管中钡和不包含对比剂的胃中的钡之间的距离等于LES的长度。成人LE的真实长度范围为3.2至4.2 cm(3.60±0.08 cm)。3然而,在X光片上,由于投影放大倍数,所有值都大于真实值。对于平均患者大小和标准射击条件,投影失真系数为0.72。如果在X光片上可见第一个腰椎,则可以准确计算投影失真系数。它等于L-1(成人2.2 cm)的真实高度与X光片的高度之比。相对于标准的最小极限的LES缩短表示GERD。3-5
图2。适应性的光学设置(A)照明系统(顶部)和管镜(底部)。灯由1 W白色的LED提供,该LED可以单独使用或带有磁连接的冷凝器。也可以添加RGB LED环以提供Darkfield照明。显微镜使用标准显微镜镜头,该镜头通过3D打印的管镜安装在覆盆子Pi HQ摄像机上。管镜包括一个光学双线,用于场校正。(b)使用40倍物镜镜头和不同的照明方式示例图像。tardigrade仅用LED(左上),冷凝器(右上角),Darkfield投影仪完全(左下)(左下)或一半的投影仪进行照明,或者是斜胶带的一半,以进行扩散(即克里斯蒂安森照明或伪动物;右下)。(c)使用带有和不带F50双重透镜的40倍物镜镜头获得的图像质量进行比较。没有冷凝器光(通常用于低放大倍数),不需要多余的镜头。使用冷凝器(右下角)时,可以实现图像质量的实质性提高。
该弯曲磁体光束线自 1995 年 2 月开始运行,用于表征光学元件(镜子、光栅、多层、探测器等)能量范围为 50-1000 eV。虽然它主要用于 EUV 投影光刻的多层反射光学元件的精密反射测量,但它具有广泛的测量能力。光学元件由单色仪、反射计和重新聚焦镜组成,以在样品上提供一个小点。单色仪是一种非常紧凑、无入口狭缝、变线距平面光栅设计,其中机械刻划光栅在高放大倍数工作的球面镜的会聚光中运行。镜子的像差通过线间距变化进行校正,因此光谱分辨力 λ / ∆λ 受 ALS 光源尺寸限制,约为 7000。波长通过简单旋转具有固定出口狭缝的光栅进行扫描。反射计能够将样品定位在 10 µ m 以内,并将其角位置设置为 0.002 °。基于 LABVIEW™ 的软件为用户提供了方便的界面。反射计通过差动泵与光束线分开,可在半小时内抽空。辅助实验站可以安装在反射计后面。结果证明了光束线的性能和操作便利性。© 1996 美国物理学会。
原理:复合显微镜具有透镜的组合,可以增强放大力和分辨能力。要检查的样品或物体通常安装在透明的载玻片上,并位于冷凝器镜头和客观镜头之间的试样阶段。从底座上的一束可见光束由冷凝器透镜聚焦到样品上。物镜镜头拾取样品传递的光,并创建了称为主管内主图像的样品的放大图像。此图像再次被眼镜镜头或目镜放大。当需要更高的放大倍率时,低功率聚焦后旋转鼻子,以使较高功率(通常为45倍)的目标与幻灯片的照明部分保持一致。偶尔需要很高的放大倍数(例如观察细菌细胞)。在这种情况下,采用了油浸入物镜(通常为100倍)。公共光显微镜也称为明亮场显微镜,因为在明亮的磁场中产生了图像。图像看起来更暗,因为标本或物体比周围环境更密集并且有些不透明。通过或物体的光的一部分被吸收。应用:复合显微镜在各个领域广泛用于一系列应用,因为它们可以放大小样品以仔细观察。化合物显微镜的一些最常见的应用是: