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基于 CRISPR/Cas9 的多拷贝整合系统用于黑曲霉中的蛋白质生产
丝状真菌黑曲霉因其高蛋白质分泌能力而闻名，是同源和异源蛋白质生产的首选宿主。为了进一步提高黑曲霉的蛋白质生产能力，我们制备了一组专用的蛋白质生产菌株，其在基因组的预定位置包含多达 10 个葡糖淀粉酶着陆位点 (GLS)。这些 GLS 取代了编码大量存在或编码不需要的功能的酶的基因。每个 GLS 都包含葡糖淀粉酶基因 (glaA) 的启动子和终止子区域，该基因是黑曲霉中表达最高的基因之一。整合多个基因拷贝（通常通过随机整合实现）可提高蛋白质产量。在我们的方法中，GLS 允许使用 CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑快速进行靶向基因替换。通过在每个 GLS 中引入相同或不同的独特 DNA 序列（称为 KORE 序列）并设计 Cas9 兼容的单向导 RNA，人们能够选择目标基因在哪个 GLS 整合。通过这种方式，可以轻松快速地制备一组具有不同目的基因拷贝数的相同菌株，以比较蛋白质生产水平。为了说明其潜力，我们成功地利用表达平台生成多拷贝 A. niger 菌株，该菌株产生 Penicillium expansum PatE::6xHis 蛋白，催化棒曲霉素生物合成的最后一步。表达 10 个拷贝 patE::6xHis 表达盒的 A. niger 菌株在培养基中产生约 70 lg mL 1 PatE 蛋白，纯度略低于 90%。
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在这种情况下，Embrapa一直活跃于农业中数字化转型的筛查，涉及开发动物和蔬菜生产中数字监测和自动化系统的研究小组，通常与其他技术平台集成在一起，例如牲畜，牲畜，牲畜和森林整合系统（ILPF）。在这里脱颖而出，例如，巴西农业综合企业系统（Sibarar）（Castro等，2023），该系统使用区块链资源来确保农业保管链中信息的完整性。另一个示例是Bov-Trace API（Bergier等，2023），该API在Agroapi Embrapa平台上实施，该平台组织和综合了一组最小相关的可食用性信息，并确保了DA-
Igo List_for 2025海洋会议（2024年12月16日）.pdf
实体和组织已收到常设邀请，以观察者的身份参加会议和大会的工作1。非洲发展银行2。非洲联盟3。在拉丁美洲和加勒比海禁止核武器禁止的机构4。亚马逊合作条约组织5。安第斯山脉社区6。安迪斯开发公司7。阿拉伯国家（联盟）8。东盟+3个宏观经济研究办公室9.亚非法律咨询组织10。亚洲发展银行11。亚洲森林合作组织12。亚洲基础设施投资银行13。加勒比国家协会14。东南亚国家协会15。黑海经济合作组织16。加勒比社区17。中美洲经济整合银行18。中美洲整合系统19.中亚地区经济合作研究所20。中欧倡议21。集体安全条约组织22。商品共同基金23。独立国家联邦24。联邦秘书处25。讲葡萄牙的国家社区
太空安全的未来：美国三十年战略
参谋学院毕业，获得海军战争学院国家安全和战略研究硕士学位，在麻省理工学院 (MIT) 完成研究，并荣获海军战争学院杰出研究生领导奖。卡特赖特将军在海军陆战队中独树一帜，他曾担任美国战略司令部司令，后被提名并任命为参谋长联席会议第八副主席，是美国第二高军官。在担任两届总统政府副主席的四年任期内，卡特赖特将军不断与各种不断发展的敌人进行军事行动，因其技术敏锐性、对未来国家安全概念的远见以及以鼓励创造力和激发创新的方式整合系统、组织和人员的敏锐能力而广受认可，这些方式在战略威慑、核扩散、导弹防御、网络安全和自适应采购流程等领域激发了创新。
来自印度的地衣属内的内胆素真菌多样性
1。简介地衣是Mycobiont和Photobiont（藻类和/或蓝细菌）群落的高度整合系统。地衣真菌需要特定的光片以发展共生表型。类似于植物组织的地衣thallus为多种微生物提供了一个有趣的生物学环境（Zhang等，2016）。除了它们的主要共生体外，地衣还具有地衣真菌，内醇真菌以及可培养和不可培养的不可培养的非肉质细菌（Biosca等，2016; Muggia et al。，2014）。以来，地衣的历史可以追溯到超过6亿年（Yuan等，2005），如今，它们在地球上约有10％的陆地生态系统，地衣及其合作伙伴中占据了共生的成功风格（Papazi等，2015）。然而，地衣是微生物多样性的未置换栖息地。为了更好地理解微生物的生物学并将其独特的基因用于技术，研究较少研究的环境条件和栖息地是有利可图的（Suryanarayanan等，2017）。
在与计算机整合时激发自我意识
近期的人机交互 (HCI) 研究突出了一种新范式，即从传统的命令-响应交互转向技术与人体的“集成”。人机集成 (HInt) 研究领域及其“融合”子部分不再将人与计算机视为两个独立的实体，而是旨在将计算机与用户集成为“一个人类技术组合”，以增强人类的能力 [3、21、62、66]。这一目标包括多个层面的整合：（1）物理整合，即将技术置于身体内部或身体上[62]；（2）功能整合，将技术参与认知功能，以协助或恢复该功能；（3）体验整合，即技术通过某种方式被感受，成为用户对（a）自己（自我体验）和/或（b）世界（世界体验）的反思性（即显性）体验或前反思性（即隐性）体验的一部分。研究表明，技术的物理或功能整合并不一定会导致体验整合[29, 37, 63, 82]。具体而言，研究发现，技术通常被体验为“其他”的东西，要么感觉完全自主（“整合（为我）做了那件事”），要么由用户反思性地控制（“我让整合做了那件事”）[8]，这与传统的命令 - 响应类型的交互有关。除了这些体验之外，研究人员现在感兴趣的是如何将整合系统与用户的自我体验联系起来，以引出诸如“我做了那件事（用我的身体）”这样的陈述（图 1）[20，37，62]。正如我们将要论证的那样，这一步要求我们超越将自我体验仅仅视为反思性的自我判断（“我用我认为是我的身体的东西做了那件事”），也将其视为前反思的自我感觉（“我用感觉是我的身体的东西做了那件事”）。两者之间的区别将在第 3 部分进一步阐述）。引出前反思的自我感觉非常重要，因为没有自我感觉的身体和认知整合系统在某些情况下已被证明会产生不愉快、脱离身体或分离的体验，尽管它们能够提高功能和表现[5，37，61，63，82]。例如，研究人员发现，通过电肌肉刺激 (EMS) 用计算机控制参与者双手的系统通常会让用户感到“害怕”，感觉好像他们“被人推”或“被黑客攻击”[61,82]。同样，对假肢和脑植入物的采访表明，有些人感觉他们的假肢或脑植入物是一个外来物体，而不是他们自己的一部分——即使他们是成功的用户 [28,29,63]。用户经常会报告假肢“碍事”或不可用，需要付出太多努力才能使用，最终导致用户放弃该技术或对它的保护性降低[17,63]。研究人员认为，激发自我意识可以消除这种破坏性体验，并改善保护性行为[17]和可用性期望[26,27,63]，并有助于避免用户出现不必要的自我分离[5,29,37]（见图2）。
练习和经验，ISSN 1895-1767，http：//www.scpe ...
摘要。为了提高智能语音互动机器人的准确性，作者提出了一种基于深度学习的研究意图识别方法。通过介绍GloveBibgru自己的注意分类预测模型，构建了意图识别功能模块，并采用ROS分布式体系结构来整合系统功能模块，从而实现了人与机器之间的智能语音交互。模拟结果表明，使用该方法的语音意图识别具有更高的精度。与基于DCNN模型，CNN-LSTM模型和GRU自我注意力模型的意图识别方法相比，识别精度高于8。02％，4。06％和2。分别为13％，并且在特征提取方面具有更好的识别效果，与基于Bilstm模型的传统提取方法相比，BigRU的训练时间缩短了四倍，从而导致了较高的训练能力。根据实验发现，使用建议的意图识别方法开发了语音交互系统，在理解用户英语语音命令方面保持了高度的准确性和效率。平均准确率为89.72％，识别时间始终低于0.35秒，很明显，该方法适用于现实世界中的语音相互作用。基于手套的意图识别方法可以将注意力用于智能语音机器人中的英语语音互动。
金融发展在尼泊尔经济增长中的作用
抽象的经济增长和金融发展密切相关。它们之间的相互作用至关重要，并引起了研究人员的极大关注。这项研究试图研究1975年至2012年之间尼泊尔经济增长与金融发展之间的关系。本文使用了增强的Dickey-Fuller和Philips-Perron测试来测试单位根，协整测试的存在，以检查长期关系和Granger因果关系测试以找出因果关系。此外，还应用了向量误差校正方法来找出调整速度和关系的动力学。经验证据证实，金融发展会导致经济增长。实际上，金融发展是在短期动态方面的经济增长的原因，而经济增长从长期来看可以维持金融发展。根据经验发现，本研究建议在金融体系中启动改革计划，以巩固和提高金融体系的效率和有效性，并应对新兴的变化。因此，它不仅要求整合系统，这不仅是为了实现经济增长与金融发展之间的积极加强，而且还要巩固危机后的韧性和可持续性。关键词：金融发展，经济增长，协整和因果关系分类：C51，E44，E47，G34，O11
伊朗案例研究
摘要 最近的研究表明，发电、海水淡化和工业气体生产的整合可以显著降低成本并大规模生产清洁能源。另一方面，随着人口的增长，交通运输已成为燃料和能源的主要消耗者，导致能源需求增加、总成本增加和污染物成分增多。在本文中，基于优化方法和线性模型模拟，研究了将交通运输部门合并到整合系统对 2050 年能源生产和总成本的影响（5 年为一个时间步长）。建模分为三种情景：a) 整合情景、b) 当前政策情景和 c) 综合整合情景。可再生能源系统被视为发电、海水淡化、工业气体和交通运输部门的能源供应商。结果表明，增加交通运输部门对将最终成本从 41 欧元/兆瓦时降低到 36 欧元/兆瓦时有显著影响，这归因于此次合并导致发电量增加和发电技术价格大幅下降。此外，各种可再生能源技术在能源生产中的份额表明，在综合情景中，收入份额，尤其是太阳能光伏，比综合情景增加了 2%。结果显示，与综合情景相比，安装容量增长了 32%，与 CPS 情景相比增长了 90%。关键词：可再生能源；存储技术；运输系统；能源平准化成本。