1. 简介 观察当代城市场景,我们可以看到城市是一个支离破碎、充满冲突的空间。一方面,我们保存着古老的遗产,有时过于严格,正如马克·奥格所说,“我们为了展示而保存” 1 ,另一方面,我们经常“破坏”较近的遗产,因为它们本来就不具有价值。雷姆·科尔哈斯在 2010 年威尼斯双年展上举办的名为 Cronocaos 的展览中描述了这种介于保存与破坏之间的城市状态。库哈斯将世界划分为“彻底改变的区域和彻底静止的区域” 2 。这两种态度虽然截然相反,但都可能导致城市的荒废状态。在这种情况下,如何“继承”废墟的问题变得非常重要。事实上,在当代城市中,我们经常可以发现未完成的形式和未解决的叙述,我们可以找到不同的废墟。它们似乎构成了城市的难题。相反,根据安东尼·维德勒的说法,废弃的地方在叙事景观中扮演着主要角色:它们展示了叙事时间的断点和一系列不同的可能性。“废墟到底是什么?它是被遗弃在自然中的人类建筑,城市废墟的特征之一就是它们狂野的外观:它们是充满希望和未知的地方”3。对瓦尔特·本雅明来说,过去是由“一片废墟”组成的,“废墟”是一种永恒的、不可避免的状态。时间、战争、自然灾害在每个时代都产生并将继续产生废墟,促使人们思考如何处理它们。这个词的词源来自拉丁语 ruina ,来自 ruĕre ,意思是“沉淀、逆转”,揭示了废墟的变化本质,它是由不同原因引发的变革性动态的永无定论的结果,这些原因导致建筑形式和作用的衰落,但同时也发展出新的平衡,为设计的诠释想象力打开了大门。废墟包含记忆、蜕变和想象力,但正如词源所示,它还包含破坏、灭绝、狂怒和暴力的感觉。它讲述了时间、遗迹或破坏的影响如何导致“镜面建筑逆转” 5 ,从而失去结构逻辑,但也讲述了同样的瓦解如何开启一套新的规则组织,正如格奥尔格·齐美尔所说:“一个全新的形式单位,它是荒诞的、没有设计的、不连贯的,其性质是程序性的” 6。在当代城市,我们可以找到废墟的不同变体:例如遗迹;分层的废墟;城市废墟;碎片;未完成的或“从诞生之日起的废墟”;有人居住的废墟;直到马克·奥热(Marc Augè)或弗朗哥·普里尼(Franco Purini)展示的建筑工地作为废墟的悖论。这种状况强调了古代遗迹与越来越近的遗迹的连续并列:古代碎片上的新遗迹。所有这些都是“现代的遗迹”,因为正如 Augé 所写:“遗迹的存在源于其外观” 7 。当代建筑项目需要面对这组遗迹。正如 Alberto Ferlenga 所写:“这些大量的碎片和残破的物品在今天代表着一个巨大的项目机会,如果将其与插入的地方联系起来,它们可以构成整个景观的巨大资源” 8 。
补充方法 DNA 分离 使用自动 DNA 提取仪按照其协议(chemagic MSM I,PerkinElmer,美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)从血液样本中分离 DNA。 使用试剂盒“EZ1&2 DNA Tissue”(Qiagen,德国希尔登)按照协议使用自动 DNA 提取仪 EZ1 Advanced XL(Qiagen)从羊膜细胞和绒毛中分离 DNA。 染色体微阵列(CMA) 使用 SureTaq DNA 标记试剂盒(Agilent,美国加利福尼亚州圣克拉拉)标记 DNA,并根据制造商的说明在 GenetiSure Cyto 4x180K CGH 微阵列(Agilent)上进行杂交。使用 InnoScan 910 AL 扫描仪(Innopsys,Carbonne,法国)扫描载玻片,并使用分析程序 Mapix(Innopsys)和 CytoGenomics 版本 5.1.2.1 和 5.3.0.14(Agilent)进行处理。使用参考基因组 GRCh38 评估数据。染色体分析和荧光原位杂交使用标准方法从肝素血样以及绒毛和羊膜细胞培养物中进行中期制备。简而言之,将来自肝素血样的细胞培养在含有植物血凝素作为有丝分裂原的 LymphoGrow 培养基(CytoGen,Sinn,德国)中,羊膜细胞培养在 Amniogrow plus 培养基(Cytogen,Sinn,德国)中,CVS 细胞培养在 Chang 培养基 D(Fujifilm,Minato,日本)中。固定后,将中期细胞滴到载玻片上,然后在 60 °C 下干燥过夜。使用核型分析系统 Ikaros(MetaSystems,德国阿尔特鲁斯海姆)通过 GTG 显带评估中期染色体的扩散情况。对于 FISH 分析,使用 Empire Genomics(美国纽约州布法罗)的探针 RP11-213E22-green 和 RP11-577D9-orange(7 号染色体)以及 RP11-358H10-green 和 RP11-241M19-orange(16 号染色体)。所有探针均按照制造商的说明使用。使用 Isis 数字成像系统(Metasystem Inc.,德国阿尔特鲁斯海姆)分析图像。 PCR 和测序 在适用的情况下,确认并进一步指定 OGM 分析中的断点,方法是使用 MinION 测序仪(Oxford Nanopore,英国牛津)进行第三代长距离测序,或使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher Scientific,美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)进行 Sanger 测序。引物是根据 Dremsek et al., 2021 中描述的策略设计的。为了将引物定位得尽可能靠近预期的断点,OGM 数据和 CMA 数据都融入了其设计中。为了分析P1,进行了长距离PCR(连接点B/D*的扩增子:正向引物:5'-ggaggacaattttatcccccaggg-3'和反向引物:5'-gtgagccgtgagtttgccactat-3';连接点D*/B*的扩增子:正向引物:5'-tcgttgacggtgaaatgctacgt-3'和反向引物:5'-gcagataacggagtgaggaaggc-3')。PCR扩增后,使用引物 5' -acagctcactatagcagataggtgt- 3'、5' - ttgcatcaggaacatgtggacct- 3'、5' -ctggtcacaggcgcaaatcaaag- 3'、5' -gtcagcaaaggagagaagcagct- 3' 和 5' - gcaggttggctctttcccaagta- 3' 制备连接点 B/D* 的扩增子(大小为 4 kbp)进行 Sanger 测序。使用引物 5' -agggaaaagagatgtgtaaaatactgt- 3', 5' -agatgaggaagggcatctgac- 3', 5' -tcaagttgtcattgtggtgaatt- 3', 5' - cagatgccagcgctaagacgat- 3', 5' -aggttattacacacccctcct- 3', 5' -tgttcattatcactggccatcaga- 3', 5' -aaggggaaacctcctgctactct- 3', 5' - tgcacccactaacgtgtcatcta- 3', 5' -gggttggttccaagtctttgcta- 3', 5' -gctgaaactggatcccttcctta- 制备连接点 D*/B* 的扩增子(大小为 13 kbp),进行 Sanger 测序。 3'、5' -tgtagggacatggatgaaattgg- 3' 和 5' -ccaaacaccgcatattctcactc- 3'。为了分析 P3,进行了长距离 PCR(正向引物:5' -ttaccacgaaagagcaaacggtga- 3' 和反向引物:5' - aacgttattccttccagtcacccac- 3')。PCR 扩增后,根据制造商的方案(SQK -LSK109,Oxford Nanopore),制备 9 kbp 大小的扩增子以在 MinION 106D 流动槽上进行测序。对于家族检测,建立了 PCR,使用倒位特异性引物 5' -tgcctctgcttaataggaagttttgg- 3' 和 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3'(产生 1247 bp 扩增子),以及野生型引物 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3' 和 5' -ctgttgaaggacacaagctctggc- 3'(产生 778 bp 扩增子)(见 S.3)。MLPA 分析进行多重连接依赖性探针扩增 (MLPA) 以验证在 CMA 中检测到的增益并测试亲属的携带者状态。对于 MLPA,将 DNA 与探针杂交并根据制造商的说明进行扩增。使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher)对扩增的 DNA 进行片段分析,并使用 SeqPilot(JSI,德国埃滕海姆)分析程序处理数据。用于所呈现的临床病例的 MLPA 探针组是 P034-B2、P035-B1(P1)和 P216-C1(P3)(MRC-Holland,荷兰阿姆斯特丹)。5' -tgtagggacatggatgaaattgg- 3' 和 5' -ccaaacaccgcatattctcactc- 3'。为了分析 P3,进行了长距离 PCR(正向引物:5' -ttaccacgaaagagcaaacggtga- 3' 和反向引物:5' - aacgttattccttccagtcacccac- 3')。PCR 扩增后,根据制造商的方案(SQK -LSK109,Oxford Nanopore),制备 9 kbp 大小的扩增子以在 MinION 106D 流动池上进行测序。对于家族检测,建立了 PCR,使用倒位特异性引物 5' -tgcctctgcttaataggaagttttgg- 3' 和 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3'(产生 1247 bp 扩增子),以及野生型引物 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3' 和 5' -ctgttgaaggacacaagctctggc- 3'(产生 778 bp 扩增子)(见 S.3)。MLPA 分析进行多重连接依赖性探针扩增 (MLPA) 以验证在 CMA 中检测到的增益并测试亲属的携带者状态。对于 MLPA,将 DNA 与探针杂交并根据制造商的说明进行扩增。使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher)对扩增的 DNA 进行片段分析,并使用 SeqPilot(JSI,德国埃滕海姆)分析程序处理数据。用于所呈现的临床病例的 MLPA 探针组是 P034-B2、P035-B1(P1)和 P216-C1(P3)(MRC-Holland,荷兰阿姆斯特丹)。5' -tgtagggacatggatgaaattgg- 3' 和 5' -ccaaacaccgcatattctcactc- 3'。为了分析 P3,进行了长距离 PCR(正向引物:5' -ttaccacgaaagagcaaacggtga- 3' 和反向引物:5' - aacgttattccttccagtcacccac- 3')。PCR 扩增后,根据制造商的方案(SQK -LSK109,Oxford Nanopore),制备 9 kbp 大小的扩增子以在 MinION 106D 流动池上进行测序。对于家族检测,建立了 PCR,使用倒位特异性引物 5' -tgcctctgcttaataggaagttttgg- 3' 和 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3'(产生 1247 bp 扩增子),以及野生型引物 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3' 和 5' -ctgttgaaggacacaagctctggc- 3'(产生 778 bp 扩增子)(见 S.3)。MLPA 分析进行多重连接依赖性探针扩增 (MLPA) 以验证在 CMA 中检测到的增益并测试亲属的携带者状态。对于 MLPA,将 DNA 与探针杂交并根据制造商的说明进行扩增。使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher)对扩增的 DNA 进行片段分析,并使用 SeqPilot(JSI,德国埃滕海姆)分析程序处理数据。用于所呈现的临床病例的 MLPA 探针组是 P034-B2、P035-B1(P1)和 P216-C1(P3)(MRC-Holland,荷兰阿姆斯特丹)。
乳胶算法部门:线和页面断裂指南============================================================================= = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = =当与乳胶中的长期算法一起工作时,它不得不跨越多页。通常不建议通过分解文档流,有时您需要对布局进行更多控制。在本文中,我们将探讨如何插入线路断裂,页面断裂和任意空格。###简介打破线条的最简单方法是创建一个新段落。这是通过在代码中留一条空线来实现的。但是,单线断裂是文本中的空间,而离开空线开始了一个新段落。###线断裂有几种方法可以在乳胶中插入线路断裂。除了标准段落中断外,我们还将介绍两个命令: *`\\`(两个后斜线):此命令与段落中断相似。*`\ ewline`:此命令还插入了一个线路,但并未缩进文本。*`\ hfill \ break`:组合这两个命令允许对线断裂进行更多控制。###页面中断到插入页面中断,我们有两个选项: * \ clearPage`:此命令启动一个新页面,然后冲洗出任何堆叠的浮动元素,例如表或图形。在上面的示例中,同一图像被插入三次,证明了这一点。*`\ newPage`:此命令也启动了一个新页面,但并未清除浮动元素。通过掌握这些行和页面断路命令,您将对乳胶文档的布局进行更多控制。如果不需要,则可以使用ewpage。该过程涉及将图像插入空页面中,然后继续使用指定断点下方的文本。该文档使用乳胶命令演示如何插入白色空间和线路断裂。当插入线路断裂时,文本仍未注明。为了实现线断路,使用了特定的命令:\ ewline本段不包含任何信息,但我们正在探索线路断裂。通过组合\ hfill,\ break和ewpage之类的命令,可以将图像放在新页面上,同时试图适合文本流。可以使用命令\ hSpace插入水平空格。\ hfill命令插入一个空白,该空间伸展以填充可用空间。其他命令,例如\ hrulefill和\ dotfill创建水平统治者和点的弦,而不是空白空间。对于垂直空白空间,这两个语法都与它们的水平对应物相似。命令基于指定的长度插入垂直空间,而\ vfill则允许创建一个空白,该空间伸展以填充可用的垂直空间。也有命令,例如\ smallskip,\ medskip和\ bigskip,它们会根据文档类型和可用空间添加不同数量的垂直空间。此外,两个后斜线后面是星号(*)可以在命令的点上断线。此外,还可以防止强制线路断开后的页面断开,而是在不填充当前线的情况下将其打破,这可能会导致格式不佳,即使无法正确处理。为了填充线条,通过使用如下所示,可以使用它与EWLINE类似的效果,并且可以通过使用它来实现。该高级乳胶选项用于线路断路,允许在命令点上断开,其数字作为参数表示其优先级为0到4(其中0表示它很容易忽略,并且4可以确保其完成)。当使用此线路休息选项时,乳胶的目的是产生最佳的换行符。有关更多信息的进一步读取,请参见:基于常规\ loop和\ endloop组合的副本,允许使用带注释的loop \ aroop(和\ endAloop)的\ break添加了修改,该算法可以使用\ break break break(and \ endaloop),但使用添加的参数进行注释。这不是唯一可能的修改:将文档类设置为文章,并且包装算法和算法与修改一起使用。一个新的命令\断裂定义为状态,其次是算法break。此外,命令\ aloop和\ endaloop是基于常规\ loop和\ endloop创建的,但带有添加参数以进行注释。讨论了这些命令的进一步自定义及其在算法中的应用。