XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search System杆状病毒
半纯化低致病性禽流感H9N2病毒-...
加入6孔板中并在28°C下孵育2小时（不摇晃）以形成单层。我们制备了8μL Cellfectin II 试剂（Gibco-10362-100）和1μg每种DNA样本，并根据Bac-to-Bac手册提供的指导进行孵育。去除培养基后，将DNA转染试剂复合物逐滴加入6孔板中。将板在28°C下孵育5小时。然后，在从细胞培养板中取出DNA样本后，向每个孔中加入3mL不含抗生素的新鲜培养基进行孵育。每隔24小时观察一次细胞病变效应（CPE）。感染后72-96小时收获P0重组杆状病毒，并进行噬斑测定（Bac-to-Bac手册）以检查滴度。收获P1和P2以增加重组杆状病毒的库存和滴度，用于蛋白质表达。
灭活和重组流感疫苗方案
二水合物、柠檬酸一水合物、新霉素、卡那霉素、氢化可的松、鸡蛋蛋白（≤0.4 mcg）、十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB)、甲醛 Fluarix Octoxynol-10 (TRITON X-100)、α-生育酚琥珀酸酯、聚山梨醇酯 80 (Tween 80)、氢化可的松、硫酸庆大霉素、卵清蛋白、甲醛、脱氧胆酸钠、磷酸钠缓冲等渗氯化钠 Flublok 氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、聚山梨醇酯 20 (Tween 20)、杆状病毒和草地贪夜蛾细胞蛋白、杆状病毒和细胞 DNA、Triton X-100 Flucelvax Madin-Darby 犬肾 (MDCK) 细胞蛋白、磷酸盐缓冲溶液、除 HA 以外的蛋白质、MDCK 细胞DNA、聚山梨醇酯 80、十六烷基三甲基溴化铵和 β-丙内酯、硫柳汞（多剂量瓶装）FluLaval 卵清蛋白、甲醛、脱氧胆酸钠、α-生育酚氢琥珀酸酯、聚山梨醇酯 80、硫柳汞（多剂量瓶装）、磷酸盐缓冲盐溶液。Fluzone High Dose 和 Fluzone
对细胞外病毒感染的细胞外囊泡的定量蛋白质组学分析
由于其出色的适用性生产复杂的生物药物产品，包括病毒样颗粒和亚基疫苗，杆状病毒/昆虫细胞表达系统已发展为生物技术行业中非常流行的生产平台。对于高生产率，病毒 - 细胞通信和病毒感染的有效传播至关重要，在这种情况下，细胞外囊泡（EV）可能起着重要作用。ev是小颗粒，被细胞用于传递生物活性化合物，例如蛋白质，脂质以及核酸向受体细胞进行细胞内通信。在哺乳动物细胞中的研究表明，EV的释放因许多病毒的感染而改变，最终限制或促进感染扩散。 在这项研究中，我们从未感染和杆状病毒感染TNMS42昆虫细胞中均具有同类和表征EV。 通过定量蛋白质组学分析，我们确定了超过3000吨。 TNM042细胞中的EV中的 Ni蛋白，其中400多个在杆状病毒感染后有显着差异。 随后的基因集富集分析表明，受感染培养物中电动汽车中与细胞外基质有关的蛋白质耗竭。 我们的发现显示杆状病毒感染时EV蛋白货物的显着变化，表明电动汽车作为应力标记的主要作用。 我们的研究可能会在设计新工具中进行监测和控制，以进一步改善杆状病毒/昆虫细胞表达系统内的生物药物生产。在哺乳动物细胞中的研究表明，EV的释放因许多病毒的感染而改变，最终限制或促进感染扩散。在这项研究中，我们从未感染和杆状病毒感染TNMS42昆虫细胞中均具有同类和表征EV。通过定量蛋白质组学分析，我们确定了超过3000吨。Ni蛋白，其中400多个在杆状病毒感染后有显着差异。随后的基因集富集分析表明，受感染培养物中电动汽车中与细胞外基质有关的蛋白质耗竭。我们的发现显示杆状病毒感染时EV蛋白货物的显着变化，表明电动汽车作为应力标记的主要作用。我们的研究可能会在设计新工具中进行监测和控制，以进一步改善杆状病毒/昆虫细胞表达系统内的生物药物生产。
识别X连锁抑制剂上的泛素化位点...
最初在杆状病毒中发现的凋亡蛋白（IAP）的抑制剂存在于从病毒到酵母再到人类的生物体中[1]。的特征是存在一到三个串联杆状病毒IAP重复序列（bir; a of。80 amino acid zinc finger motif ), there are currently eight human IAPs: neuronal apoptosis inhibitory protein (‘NAIP'), cellular IAP1, cellular IAP2, X-linked IAP (XIAP), melanoma-associated–IAP (‘ML- IAP'), IAP-like protein-2 (‘ILP-2'), survivin and BRUCE （BIR重复含泛素 - 偶联酶）（在[2]中进行了综述）。顾名思义，家庭的创始成员可以预防昆虫和哺乳动物细胞中的凋亡刺激[3,4]。在多种细胞过程中提出了进一步的IAP作用，包括对细胞分裂的控制[5]，以及许多不同的信号级联反应，例如转化生长因子β激活，C-JUN N末端激酶调节和核因子κB激活已提出涉及XIAP [6-8]。尽管有上述可能性，但最容易证明的XIAP功能是直接的caspase抑制剂。在人IAP中，XIAP是胱天蛋白酶和凋亡中最有效的抑制剂。例如，几个组显示了人XIAP直接抑制胱天蛋白酶3、7和9（在[2,9]中进行了综述）。XIAP包含三个串联BIR结构域，其次是C端环（非常有趣的新基因）域。XIAP的解剖尚未揭示第一个BIR结构域的功能（BIR1）。然而，具有N端连接器的第二个BIR结构域（BIR2）是必要的，并且足以抑制密切相关的executioner caspase 3和7 [4,10,11]，而第三个BIR域（BIR3）负责抑制启动器caspase 9 [10,12]。
使用 3M Harvest RC 色谱澄清剂从 HEK 洗涤剂裂解物中去除宿主细胞 DNA 的调查案例研究
腺相关病毒 (AAV) 是广泛用于递送基因疗法以治疗各种人类疾病的载体。截至 2024 年 3 月，美国 FDA（食品和药物管理局）已批准了 5 种基于 AAV 的疗法，并且正在进行 200 多项临床试验。1 生产 AAV 的方法包括在宿主细胞（例如 HEK293）中进行瞬时三重转染、基于杆状病毒的表达系统和无辅助病毒方法（例如单纯疱疹病毒 (HSV) 系统）。2 AAV 颗粒通常在细胞内，AAV 纯化过程通常始于通过洗涤剂裂解将病毒从宿主细胞中释放出来；该细胞裂解过程也经常将 hcDNA 释放到液体中。最终产品中存在 hcDNA 对经过处理的细胞构成了重大的安全隐患
novavax covid-19疫苗（2023-2024）RCG概况案例12岁及以上的
辅助辅助的Novavax疫苗包含由SF9（秋季军虫）昆虫细胞制成的SARS-COV-2尖峰蛋白的重组形式，该蛋白质受杆菌病毒和基质-M TM辅助剂的影响，该蛋白质含有cape的袋中的袋中含有袋鼠（Quillaja sapona sapona sapona molina）。其他成分包括胆固醇，磷脂酰胆碱，二氢磷酸钾，氯化钾，二氢二氢二氢二氢二钠，氯化钠，二钠磷酸氢钠肝素，二氢磷酸钠单氢磷酸盐，polydoshate polyhydrysrysbreybrebares酸盐， 80。 div>该疫苗还可以含有少量的杆状病毒，昆虫细胞蛋白和DNA。
绿皮书第 14a 章
英国最初批准用于初级疫苗接种的所有疫苗均针对原始 SARS-CoV-2 毒株的 S 蛋白；两种使用 mRNA 平台（辉瑞 BioNTech COVID-19 BNT162b2 疫苗（Comirnaty ® ）和 Moderna mRNA-1273 COVID-19 疫苗（Spikevax ® ）），两种使用腺病毒载体（阿斯利康 COVID-19 ChAdOx1-S 疫苗/Vaxzevria ® 和 Janssen COVID-19 疫苗 Ad26.COV2-S [重组]），一种使用重组 S 蛋白（在杆状病毒感染的昆虫细胞中生长）作为抗原，并添加 Matrix-M TM 佐剂（Novavax Nuvaxovid ®）。后一种佐剂包括两种源自树皮的皂苷。最近批准的加强疫苗（赛诺菲巴斯德，VidPrevtyn Beta ®）也使用重组 S 蛋白，但针对的是 Beta 变体并使用不同的佐剂（参见变体疫苗部分）。
二甲双胍、辛伐他汀和地高辛联合用于胰腺导管腺癌的靶向治疗
胰腺腺癌 (PDAC) 患者的 5 年生存率为 8%，是美国所有癌症中最低的。传统的化疗方案，例如基于吉西他滨和氟尿嘧啶的方案，通常只能延长数月的生存期。因此，迫切需要有效的精准靶向治疗来大幅提高生存率。我们利用一个平台开发了一种新的 FDA 批准药物组合，该组合将靶向胰十二指肠同源框 1 (PDX1) 和杆状病毒凋亡重复序列抑制剂 5 (BIRC5)，利用这些靶基因的超级启动子来查询 FDA 批准的药物库。我们确定并选择了二甲双胍、辛伐他汀和地高辛 (C3) 作为 FDA 批准药物的新组合，这些药物被证明可以有效靶向小鼠人类 PDAC 肿瘤中的 PDX1 和 BIRC5，且无毒性。
SF9单细胞克隆用于重组蛋白的产生。
1。Hong，M。Et。 al。，杆状病毒insect细胞系统的基因工程，以改善蛋白质的产生。 正面。 Bioeng。 Biotechnol。，2022。 2。 MA，H。等。 al。，Spodoptera frugiperda SF9细胞系是色夫病毒感染和病毒阴性细胞的异质种群：含有色齿病毒X基因变体和病毒阴性细胞Clone的细胞克隆的分离和表征。 病毒学，2019年。 3。 Brogee，P。，朝向C31INIT具有能力的SF9细胞系的发展。 UWSpace，2018年。 4。 Zitzmann，J。等。 al。，单细胞克隆可以选择更有生产力的果蝇Melanogaster S2细胞以进行重组蛋白表达。 生物技术。 REP。，2018。Hong，M。Et。al。，杆状病毒insect细胞系统的基因工程，以改善蛋白质的产生。正面。Bioeng。Biotechnol。，2022。2。MA，H。等。 al。，Spodoptera frugiperda SF9细胞系是色夫病毒感染和病毒阴性细胞的异质种群：含有色齿病毒X基因变体和病毒阴性细胞Clone的细胞克隆的分离和表征。 病毒学，2019年。 3。 Brogee，P。，朝向C31INIT具有能力的SF9细胞系的发展。 UWSpace，2018年。 4。 Zitzmann，J。等。 al。，单细胞克隆可以选择更有生产力的果蝇Melanogaster S2细胞以进行重组蛋白表达。 生物技术。 REP。，2018。MA，H。等。al。，Spodoptera frugiperda SF9细胞系是色夫病毒感染和病毒阴性细胞的异质种群：含有色齿病毒X基因变体和病毒阴性细胞Clone的细胞克隆的分离和表征。病毒学，2019年。3。Brogee，P。，朝向C31INIT具有能力的SF9细胞系的发展。UWSpace，2018年。4。Zitzmann，J。等。al。，单细胞克隆可以选择更有生产力的果蝇Melanogaster S2细胞以进行重组蛋白表达。生物技术。REP。，2018。REP。，2018。
BmSPP 是家蚕的一种抗病毒基因
SPP 是一种 GXGD 型膜内裂解天冬氨酰蛋白酶，具有 9 个跨膜结构域，可裂解疏水脂质双层中的跨膜蛋白（ 1 , 2 ）。SPP 在整个进化过程中表现出高度的保守性，广泛存在于各种真核生物中，包括真菌、原生动物、植物和动物（ 3 ）。它具有广泛的生物学功能：通过消除前体信号肽酶 (SP) 裂解后在内质网 (ER) 中积累的信号肽来调节 ERAD 通路（ 4 ）；与错误折叠的膜蛋白结合并形成参与体内自噬的大型寡聚复合物（ 5 ）；通过水解信号肽来控制正常的免疫监视，促进表位片段的释放，保护细胞免受自然杀伤细胞 (NK) 的攻击 ( 6 )；与病毒蛋白相互作用，影响病毒的加工和复制，或作为病毒逃避宿主免疫系统的手段 ( 4 , 7 – 9 )。敲低或抑制 SPP 会极大地影响生物体自身对病毒的抵抗力。SPP 介导的裂解负责将丙型肝炎病毒 (HCV) 核心蛋白引导到脂滴，这是病毒出芽和核衣壳组装的关键步骤。研究表明，使用抑制剂抑制 SPP 可以阻碍 HCV 增殖 ( 7 , 8 , 10 )。在感染过程中，单纯疱疹病毒 (HSV) 利用其糖蛋白 K (gK) 与 SPP 结合，促进 HSV-1 复制。SPP 诱导的敲除小鼠的病毒潜伏期显著缩短，使用 SPP 抑制剂后病毒复制也显著减少 ( 9 , 11 )。SPP 在猪瘟病毒 (CSFV) 核心蛋白的加工和成熟过程中起着重要作用，使用 (Z-LL) 2-酮抑制 SPP 可显著降低 CSFV 的活力 ( 12 )。这些实例凸显了 SPP 在病毒感染中的深远意义，表明针对宿主 SPP 可能是一种非常有效的抗病毒策略。家蚕（Bombyx mori）因其独特的吐丝特性而成为一种经济昆虫。然而，家蚕生产经常受到各种蚕业疾病的困扰。在这些疾病中，BmNPV 是最严重和最昂贵的病毒性疾病，导致严重的蚕业损失。考虑到 SPP 的特性，我们研究了编辑 BmSPP 是否可以提高家蚕对 BmNPV 的抵抗力。我们的预期是编辑 BmSPP 会产生抗性菌株。NPV 是一种存在于多种节肢动物中的杆状病毒，可感染 8 个目 600 多种昆虫，包括鳞翅目、膜翅目、双翅目、鞘翅目等（13）。它是一种具有双链环状 DNA 基因组的 DNA 病毒，因其基因组被包裹在杆状核衣壳中而得名（14）。BmNPV 在感染过程中产生两种类型的病毒颗粒：包涵体衍生病毒 (ODV) 和芽生病毒 (BV)。杆状病毒对宿主幼虫的感染是由 ODV 引起的，随后，BV 导致宿主的全身感染（15）。杆状病毒经口腔进入宿主，经前肠进入中肠，在中肠碱性环境中释放ODV。然后ODV直接与中肠细胞膜融合，释放核衣壳进入细胞质，导致原发性感染（14）。在宿主体内，病毒利用宿主自身的环境在宿主细胞内复制