【产品简介】 本产品是从高度耐热菌 Thermus aquaticus 中克隆其 DNA 聚合酶基因,原核表达后经柱层析纯化获得的超纯、高效、耐热 DNA 聚合 酶, SDS-PAGE 显示为一条 94kD 的蛋白条带。该酶除具有 5 ' -3 ' DNA 聚合活性外,还具有少量的 5 ' -3 ' DNA 外切活性,但不 具有 3 ' -5 ' DNA 外切活性(校读活性),适用于常规 PCR 扩增。 M5 HiPer plus Taq DNA Polymerase 扩增得到的 PCR 产物含有 3'-A 碱基,可直接用于 TA 克隆 ( 聚合美 TOPO-TA 克隆载体货号: MF019 或 MF020) 。
摘要 外泌体是纳米级的细胞外囊泡,在细胞间通讯中起着重要作用,携带可影响生理和病理过程的蛋白质、脂质和 RNA 等生物分子。纯外泌体的分离对于基础研究和临床应用(包括诊断和治疗)都至关重要。传统的外泌体分离技术(例如超速离心)缺乏特异性并且可能产生不纯的样品,因此显然需要先进的分离技术。基于配体的外泌体亲和纯化 (LEAP) 柱层析是一种利用针对外泌体表面标志物的特定配体的新方法,为外泌体分离提供了一种高度特异性、温和且可扩展的方法。这篇小型综述探讨了 LEAP 层析的机制、优点和临床应用潜力,强调了其在基于外泌体的诊断和治疗中日益增长的重要性。
针对己糖激酶 2 (HK2) 的小分子抑制剂的研发极大地吸引了癌症药物研发领域的注意力。然而,针对己糖激酶 (HK) 特定异构体的选择性抑制剂的研发仍然是一项艰巨的挑战。在这里,我们提出了一种多药效团建模方法,用于设计针对 HK2 的配体,对 FaDu 和 Cal27 口腔癌细胞系具有显着的抗增殖作用。分子动力学 (MD) 模拟表明,原型配体对 HK2 表现出更高的亲和力。除此之外,我们提出了一种可持续的合成途径:一种环保的单步工艺,通过在无过渡金属条件下以优异的产率在环境温度下将酯与胺直接酰胺化来促进,然后采用避免柱层析分离技术分离已鉴定的先导生物活性化合物(H2),该化合物表现出细胞周期停滞和细胞凋亡。我们观察到 HK2 的抑制导致线粒体膜电位丧失和线粒体自噬增加,这是一种潜在的抗癌作用机制。先导 H2 还减少了球体的生长。总之,这些结果表明,原型先导化合物具有抗癌潜力的 HK2 抑制的概念验证。
b'genation 的 C3 和 C2 位尚未开发。在此,我们报道了一种无催化剂获取 1-芳基 2,3-二碘咔唑 [7,8] 的方法,其中涉及碘转位(方案 1D)。值得注意的是,我们的方案允许在三个连续位置 [9] 即 C1、C2 和 C3 对咔唑核心进行可控官能化。环化前体 (碘吲哚基)炔醇 1a \xe2\x80\x93 n 是使用已知程序由适当的吲哚-2-甲醛制备的。[5] 我们的旅程始于研究苯基取代炔醇 1a 作为模型底物的反应(表 1)。 [10] 我们研究了 1a 与几种碘化试剂(如 I 2 、NIS、ICl 和 Ipy 2 BF 4 )的反应。在碳酸钠存在下,在异丙醇中,在 15 °C 下使用 ICl [11] 可有效实现串联碘环化-碘移位。使用 1.1 倍过量的 ICl 可得到三环 2a ,产率为 50%(表 1,条目 5),而使用 2.5 倍过量的 ICl 可得到所需的杂环,产率为 60%(表 1,条目 3)。通过对粗反应混合物进行 TLC 和 1 H NMR 分析观察到总转化率,未检测到副产物或聚合反应。然而,在柱层析纯化 2,3-二碘-咔唑 2a 的过程中观察到一些分解,这可能是导致分离产率适中的原因。值得注意的是,重排的 1-苯基-2,3-二碘-咔唑 2a 是唯一的区域异构体。使用有机碱代替 K 2 CO 3 或不同的溶剂'
参考文献:1. 存档数据,Grifols。2. Hughes RAC、Donofrio P、Bril V 等;代表 ICE 研究组。静脉注射免疫球蛋白(10% 辛酸盐色谱纯化)治疗慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根神经病(ICE 研究):一项随机安慰剂对照试验。Lancet Neurol。2008;7(2):136-144。3. GAMUNEX®-C(免疫球蛋白注射剂 [人],10% 辛酸盐/色谱纯化)处方信息。Grifols。4. FDA 批准免疫球蛋白产品用于 CIDP。Neurology Today。2008;8(19):1-35。5. Lebing W、Remington KM、Schreiner C、Paul HI。通过辛酸盐灭活病毒和柱层析产生的新型静脉免疫球蛋白(IGIV-C,10%)的特性。Vox Sang。2003;84(3):193-201。6. Alonso W、Vandeberg P、Lang J 等人。免疫球蛋白皮下注射,人 20% 溶液。生物制品。2020;64:34-40。7. Schwab I、Nimmerjahn F。静脉免疫球蛋白疗法:IgG 如何调节免疫系统?Nat Rev Immunol。2013;13(3):176-189。8. Bertolini J。用于治疗用途的血浆蛋白的纯化。引自:Simon TL、McCullough J、Snyder EL、Solheim BG、Strauss RG 编辑。 Rossi 输血医学原理,第 5 版。John Wiley & Sons;2016:302-320。9. Latov N、Deng C、Dalakas MC 等。慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根神经病对静脉注射免疫球蛋白的临床反应时间和过程。Arch Neurol。2010;67(7):802-807。
噬菌体 DNA 分离试剂盒产品说明书 产品编号 46800 Norgen 的噬菌体 DNA 分离试剂盒提供了一种快速方法,可从在液体培养的细菌中繁殖的噬菌体中分离和纯化总 DNA。无需使用苯酚、氯仿或氯化铯即可分离 DNA。基于旋转柱的程序速度很快,可在 45 分钟内完成。该试剂盒可高效处理少量噬菌体上清液 (1 mL)。纯化的 DNA 具有最高的完整性,可用于多种下游应用,包括南方印迹、限制性片段长度多态性 (RFLP)、测序、克隆和实时 PCR。Norgen 的纯化技术 纯化基于旋转柱层析。无需使用苯酚、氯仿或氯化铯,即可优先从其他细胞成分(如蛋白质)中纯化噬菌体 DNA。该程序的起始材料是澄清的噬菌体上清液,该上清液已从液体培养物中的细菌碎片中分离出来。首先,使用提供的裂解缓冲液 B 通过热和化学裂解过程裂解噬菌体颗粒(请参阅第 4 页的流程图)。将异丙醇添加到裂解物中,然后将溶液加载到旋转柱上。Norgen 的旋转柱以取决于离子浓度的方式结合核酸,因此只有 DNA 会与柱结合,而大多数 RNA 和蛋白质会在流过中被去除。然后用提供的洗涤溶液 A 洗涤结合的 DNA 以去除任何残留杂质,并用洗脱缓冲液 B 洗脱纯化的总 DNA。纯化的总噬菌体 DNA 具有最高的完整性,可用于许多下游应用。试剂盒组件
噬菌体 DNA 分离试剂盒产品说明书 产品编号 46800 Norgen 的噬菌体 DNA 分离试剂盒提供了一种快速方法,可从在液体培养的细菌中繁殖的噬菌体中分离和纯化总 DNA。无需使用苯酚、氯仿或氯化铯即可分离 DNA。基于旋转柱的程序速度很快,可在 45 分钟内完成。该试剂盒可高效处理少量噬菌体上清液 (1 mL)。纯化的 DNA 具有最高的完整性,可用于多种下游应用,包括南方印迹、限制性片段长度多态性 (RFLP)、测序、克隆和实时 PCR。Norgen 的纯化技术 纯化基于旋转柱层析。无需使用苯酚、氯仿或氯化铯,即可优先从其他细胞成分(如蛋白质)中纯化噬菌体 DNA。该程序的起始材料是澄清的噬菌体上清液,该上清液已从液体培养物中的细菌碎片中分离出来。首先,使用提供的裂解缓冲液 B 通过热和化学裂解过程裂解噬菌体颗粒(请参阅第 4 页的流程图)。将异丙醇添加到裂解物中,然后将溶液加载到旋转柱上。Norgen 的旋转柱以取决于离子浓度的方式结合核酸,因此只有 DNA 会与柱结合,而大多数 RNA 和蛋白质会在流过中被去除。然后用提供的洗涤溶液 A 洗涤结合的 DNA 以去除任何残留杂质,并用洗脱缓冲液 B 洗脱纯化的总 DNA。纯化的总噬菌体 DNA 具有最高的完整性,可用于许多下游应用。试剂盒组件