在本研究中,使用了能够选择性地与被荧光染色的单链目标DNA(荧光DNA)结合的单链DNA修饰的2种大小和材质不同的探针粒子(金纳米粒子,Probe1;聚苯乙烯微粒,Probe2),尝试通过用激光照射含有这些粒子的溶液,利用光的力量(光诱导力)以及由该力引起的光诱导对流,使目标DNA和探针粒子局部集中,从而加速DNA双链的形成。结果发现,经过5分钟的光照,探针1和2的凝集物形成约数十μm大小,荧光DNA被聚集并捕获在凝集物的间隙中。还发现,与探针颗粒表面的DNA牢固结合的互补碱基序列(匹配DNA)越强,发出的荧光信号就越强(图2左)。特别地,本研究中使用的微粒经历了“米氏散射”,即当微粒的尺寸与激光波长相当时,光会发生强烈散射的现象。这种增加的光功率可用于提高浓缩效率。此外,由于光力增加时组装体变得更加稳定,因此人们认为可以实现迄今为止难以实现的固液界面光诱导双链形成的加速。通过利用该机制,我们实现了 7.37 fg/μL 的检测限,成功以比传统数字 PCR 方法(检测限:约 200 fg/μL)高一到两个数量级的灵敏度检测 DNA(图 2,右)。通常情况下,由于互补 DNA 分子之间碰撞的概率较低,在如此稀释的 DNA 溶液中形成双链需要很长时间。异探针光学浓缩法对 DNA 的检测之所以具有高灵敏度和快速性,被认为是由于通过显著增加聚集体内的局部 DNA 浓度,加速了这些极少量 DNA 双链的形成。此外,我们证明了通过用光照射金纳米粒子并利用产生的光的热量(光热效应)来松散双链键并增加键断裂的概率,来自聚集体的荧光信号表现出极高的碱基序列特异性,从而能够清楚地检测和识别24个碱基长的目标DNA中仅含有单个碱基的突变,包括位置依赖性(图3)。仅使用聚苯乙烯(Probe2)的情况,在所用激光的波长(1064nm)下几乎没有光热效应,因为与探针是同一类型,所以称为“同源探针”,否则称为异源探针。
摘要:核酸在蛋白质合成过程中起着至关重要的作用,而蛋白质合成是细胞遗传调控的核心。这个过程涉及 DNA、RNA 和核糖体协调工作的复杂机制。DNA(脱氧核糖核酸)起着遗传蓝图的作用,储存蛋白质合成的信息。通过转录过程,DNA 在细胞核中转录成信使 RNA(核糖核酸)(mRNA)。mRNA 将遗传密码携带到细胞质中,核糖体在细胞质中充当翻译中心。核糖体与转移 RNA(tRNA)一起读取 mRNA 上的密码子序列,以确定将组装成多肽的氨基酸序列。这个称为翻译的过程涉及 mRNA、tRNA 和核糖体之间复杂的相互作用,以确保产生的蛋白质符合遗传指令。此外,microRNA、核糖开关等非编码RNA在转录后调控基因表达中也发挥着重要作用。对DNA、RNA和核糖体机制的深入了解为生物技术和医学带来了巨大的机遇,例如基因治疗和基于RNA的药物开发。因此,对核酸作用的分析成为探索分子生物学和遗传学的重要基础。关键词:蛋白质合成、遗传调控、核酸
摘要 DNA 聚合酶以模板指导的方式催化脱氧核苷酸添加到 DNA 引物上。模板指导的要求将这些酶与其他不利用模板的核苷酸转移酶(如末端脱氧核苷酸转移酶)区分开来。寡核苷酸底物用于表征来自各种原核生物和真核生物来源的 DNA 聚合酶进行的新型非模板核苷酸添加反应。通过在高分辨率变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳分析反应产物,其中脱氧核苷酸被添加到平端 DNA 底物的 3' 羟基末端。来自 Ihermus aguaticus 的 DNA 聚合酶、来自鸡胚的聚合酶 a、大鼠聚合酶 B、来自禽类髓母细胞瘤病毒的逆转录酶和来自酿酒酵母的 DNA 聚合酶 I 都进行平端添加反应。该反应需要双链 DNA 底物,但不需要模板链的编码信息。这些结果表明,模板指令不是 DNA 聚合酶催化核苷酸转移反应的绝对要求。
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标准参考材料(SRM)2372a主要用于用于人类基因组脱氧核糖核酸(DNA)法医定量材料的价值分配。SRM 2372a由pH 8.0水缓冲液中的三种特征良好的人基因组DNA材料组成。这些成分来自人类Buffy Coat样品,并标记为A,B和C。A组分A由单个男性供体的基因组DNA组成。成分B由单个女供体的基因组DNA组成。分量C由基因组DNA的重量混合物(1个男性供体的1份男性供体)组成。SRM 2372A已获得拷贝数和DNA浓度(NG/µL)的认证。SRM的一个单位由每个分量的一个无菌0.5 ml小瓶组成,每个小瓶含有大约50μl的DNA溶液。这些小瓶中的每一个都被标记,并用颜色编码的螺丝盖密封。
•自然而然地获得了这种抗药性(委员会将确定它是否是一项重大行动,并根据需要与NIH科学政策办公室(OSP)进行沟通); •转移的抗药性基因与替代替代治疗的药物有关(第二,第3,第4条或第5行药物) - 委员会将确定拟议的研究是否有资格作为主要行动; •该药物是几年前使用的,但不是当今的首选治疗方法(可能是发展中国家唯一的治疗方法); •该药物仅用于治疗很小的人群(即那些针对前线药物有特定禁忌症的人)•使用抗生素耐药性病原体菌株也需要注册(即使您没有创建它们) - 请向生物安全委员会提交注册表
Bio 252-核酸方法(4 cr。)课程描述为学生提供了生物技术行业就业所需的高级实验室技能。专注于使用基本和专业的实验室设备和技术,例如溶液化学,细胞培养,DNA提取和分析,蛋白质提取和分析。强调实验室安全,文档,质量控制和标准操作程序的使用。讲座3小时。实验室3小时。每周总共6个小时。一般课程目的本课程旨在提供核酸和用于研究DNA的许多技术的介绍。学生将重新引入分子生物学的基本概念,包括DNA结构和功能,以及基因表达的过程和控制。将涵盖DNA科学的基本工具和技术,包括DNA分离和纯化(包括质粒DNA),凝胶电泳,DNA限制/指纹分析和克隆(克隆的转化和筛选)。还将花费很大一部分时间,包括涵盖新的DNA技术,包括聚合酶链反应(包括实时PCR),DNA测序,DNA指纹(使用AFLP和Microsatellite Techniques)和微阵列。学生将使用DNA Sequencer/Analyzer将这些技术集成到小组研究项目中。学生将被介绍到生物信息学领域。这些DNA技术应用于生物技术的不同领域(即取证,医学,环境科学等)将讨论。课程先决条件/准则先决条件:Bio 250和Bio 253,带有“ C”或BOTER或Biotechnology Program Program Plongermiss clightsermiss course Coursemission课程目标,并在完成课程后,学生将能够:
对于淋巴结转移的结肠直肠癌 (CRC),术后辅助化疗已被证实可抑制复发,IDEA 研究表明,氟嘧啶类抗癌药物联合奥沙利铂 6 个月是标准疗法 (Shi et al., 2017)。此前,对氟尿嘧啶联合亚叶酸钙 (5FULV2) 疗法的疗效进行了评估,IMPACT 研究表明,与未治疗组相比,复发率被抑制了 18% (国际结肠癌试验 (IMPACT) 联合研究的研究人员,1995),口服尿嘧啶/替加氟/Yuzel 与卡培他滨也显示出等效性 (Twelves et al., 2005)。因此,预测氟嘧啶酶的作用具有重要的临床意义,并且已经开展了各种研究。另一方面,目前尚无临床研究证明 5-氟尿嘧啶 (5-FU)/亚叶酸钙联合伊立替康 (FOLFIRI) 与分子靶向疗法 (Allegra 等,2011;Alberts 等,2012) 或 FOLFIRI 作为辅助化疗 (Saltz