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World File Search System核酸酶
高级核酸酶 - 属于载体 - 载体 - ...
慢病毒载体（LV）的有效且健壮的下游加工对于产生高质量的基因治疗载体至关重要。在LV生产中使用的传统核酸酶通常会导致最终药物中的次优载体回收和较高的残留DNA水平。该项目旨在识别和整合替代核酸酶，即盐活性核酸酶（SAN）和中盐活性核酸酶（M-SAN），将其纳入OXB的LV制造工作流程中，以增强矢量恢复并提高整体产品质量。对替代核酸酶（例如最佳pH）（参见图A）和盐缓冲液（参见图B）条件的关键特征进行了评估，并将其纳入下游过程（请参见图C），并与传统的基于核酸酶的下游过程进行了比较。我们的发现表明，在典型的LV制造条件下，使用SAN和M-SAN的使用表现出卓越的活动。值得注意的是，在纯化过程中掺入替代核酸酶会减少载体聚集，并在挑战性的无菌过滤步骤中提高了载体恢复左右的载体恢复。最重要的是，这些核酸酶的掺入导致最终药物中残留DNA的水平明显较低，以解决基因治疗应用的关键质量属性。
nuc-off核酸酶和DNA去除喷雾
图1。在去除RNase和dNase中，MP生物医学Nuc-Off核酸酶和DNA去除喷雾剂和竞争者T溶液的性能比较。A. RNase消除。在室温下孵育5分钟，将4μl的去除试剂和不同量的RNase（以1μl为单位）的混合物孵育；之后，加入1μlRNA，并在室温下进一步孵育15分钟，然后在含有甲醛的琼脂糖凝胶中变性和最终混合物的电泳。B. DNase消除。在室温下孵育4μl的去除试剂和不同量的DNase（以1μl）的混合物5分钟；之后，将1μl10X反应缓冲液和1μgDNA和无核酸酶的水加入总体积10μl，并在室温下进一步孵育15分钟，然后是最终混合物的琼脂糖凝胶电泳。C.去除试剂对DNA稳定性的影响。在室温下孵育15分钟，将4μl的去除试剂和1μl基因组DNA的混合物进行孵育，然后通过琼脂糖凝胶电泳进行分析。D.去除试剂对RNA稳定性的影响。在室温下孵育4μl的去除试剂和1μlRNA的混合物，然后变性添加含有甲醛的琼脂糖凝胶电泳。此处显示的图仅供参考，它可能会根据不同的实验条件而有所不同。
特异性 ARCUS 核酸酶可消除乙肝病毒
本演示文稿包含前瞻性陈述，任何相关演示文稿也可能包含前瞻性陈述，其含义符合 1995 年《私人证券诉讼改革法》。本演示文稿和任何相关演示文稿中包含的所有与历史事实无关的陈述均应被视为前瞻性陈述，包括但不限于关于慢性乙型肝炎持久抗原消失和功能性治愈的目标、临床和监管开发以及我们平台和产品候选物的预期功效和治疗益处、ARCUS 的益处以及使用 ARCUS 的潜在扩展和开发、对我们的运营计划和业务战略的期望、实现关键里程碑和额外合作，以及对我们的流动性和为运营费用和资本支出要求提供资金的能力的期望。在某些情况下，您可以通过“目标”、“预期”、“方法”、“相信”、“考虑”、“可能”、“估计”、“期望”、“目标”、“打算”、“看起来”、“可能”、“使命”、“计划”、“可能”、“潜在”、“预测”、“项目”、“承诺”、“应该”、“目标”、“将”、“会”等术语或其否定词以及类似的词语和表达来识别前瞻性陈述。
工程化的 AsCas12a 核酸酶有助于快速...
Cas12a 特异性的参考文献：Kim 等人。Nat Biotech 2016，Kleinstiver 等人。Nat Biotech 2016，Strohkendl 等人。Mol Cell 2018，Swarts 等人。Biochem Soc Trans 2019
微球菌核酸酶（MNase）用于1
2生物学系，约翰·霍普金斯大学（Johns Hopkins University），3400 N. Charles St.，235 Mudd Hall，Baltimore，MD 21218 6美国马里兰州巴尔的摩市7 8 *应向其通信。 peter.sarin@helsinki.fi， +358-2941-59533 92生物学系，约翰·霍普金斯大学（Johns Hopkins University），3400 N. Charles St.，235 Mudd Hall，Baltimore，MD 21218 6美国马里兰州巴尔的摩市7 8 *应向其通信。peter.sarin@helsinki.fi， +358-2941-59533 9
重组NLS-SPCAS9-NLS（CAS9）核酸酶解决方案
产品描述：Akron的重组NLS-SPCAS9-NLS（CAS9）核酸酶解决方案均遵循所有相关的辅助材料指南。下游纯化过程使用多步矫正方法，不使用亲和力标签，以最大程度地减少外源杂质，并确保提供高度纯化和活性的物质以进行进一步的制造应用。Akron的Cas9核酸酶是单链，162 kDa，非糖基化的DNA核酸内切酶，在大肠杆菌中表达。氨基酸序列来自链球菌链球菌，蛋白质结构已通过在蛋白质的N-和C-末端添加核定位序列（NLS）改变了蛋白质结构。将NLS添加到蛋白质结构中确保您的RNP复合物有效地导入细胞核。
重组人核糖核酸酶抑制剂（RNH1）
序列 SLDIQSLDIQCEELSDARWAELLPLLQQCQVVRLDDCGLTEARCKDISSALRVN PALAELNLRSNELGDVGVHCVLQGLQTPSCKIQKLSLQNCCLTGAGCGVLSST LRTLPTLQELHLSDNLLGDAGLQLLCEGLLDPQCRLEKLQLEYCSLSAASCEPL ASVLRAKPDFKELTVSNNDINEAGVRVLCQGLKDSPCQLEALKLESCGVTSDN CRDLCGIVASKASLRELALGSNKLGDVGMAELCPGLLHPSSRLRTLWIWECGI TAKGCGDLCRVLRAKESLKELSLAGNELGDEGARLLCETLLEPGCQLESLWVK SCSFTAACCSHFSSVLAQNRFLLELQISNNRLEDAGVRELCQGLGQPGSVLRV LWLADCDVSDSSCSSLAATLLANHSLRELDLSNNCLGDAGILQLVESVRQPGC LLEQLVLYDIYWSEEMEDRLQALEKDKPSLRVIS
crispr核酸酶脱靶活动和缓解策略
CRISPR的发现允许特定地点的基因组修饰成为现实，现在该技术正在许多人类的临床试验中应用。迄今为止，这项技术在诊所表现出了令人印象深刻的效率，但仍有可能产生CRISPR核酸酶活性的意外在靶向效果的潜力。已经开发出了各种基于计算机的预测工具和经验得出的实验方法，以识别最常见的意外效果 - 与指南RNA同源的基因组位点的小插入和缺失。然而，最近报道了大规模的畸变，例如易位，倒置，缺失，甚至铬虫。使用当前的工作流，表明该领域的主要需求很难检测。在这篇综述中，我们总结了基于潜在的测序解决方案，这些解决方案即使在出现的低频下也可以检测到这些大规模效应。此外，使用CRISPR的许多当前临床试验涉及患者自己的干细胞的体内隔离，改良和重新置换。但是，对基因组编辑工具的直接，体内传递的兴趣越来越大。该策略有可能解决不适合过时操作的细胞类型中的疾病，但体内编辑只有一个预期的结果 - 在感兴趣的细胞类型中靶向编辑。CRISPR活性在意外细胞类型中（无论是在靶点还是靶点）中都是可实现种系传播的组织中的主要安全和道德关注。在这篇综述中，我们总结了当前编辑和交付工具的优势和劣势，以及对脱离目标和离组织CRISPR活动检测的潜在改进。我们还概述了潜在的缓解策略，这些策略将确保CRISPR的安全保持效率的步伐，如果该技术要实现其全部翻译潜力，这是必要的要求。
CRISPR相关核酸酶的化学和光学控制
在其他几种情况下需要控制CAS9活动的控制。首先，长时间的CAS9活性是对原发性细胞和干细胞的遗传毒性，因为双链DNA断裂已被证明会诱导高水平的细胞凋亡，从而导致编辑的细胞数量较少，并且潜在的肿瘤症克隆的潜在选择[11，12]。第二，在种系编辑中，镶嵌物（例如，不同细胞中的基因型异质性）是由分裂细胞中的不均匀Cas9活性引起的，可以通过将Cas9的活性限制为狭窄的时间窗口[13，14]。第三，CAS9包装用于腺相关病毒（AAV）E介导的输送可能是有毒的，可以通过关闭CAS9来解决此限制[15]。最后，对CAS9的控制对于在多种情况下的基因驱动器中特别有用，包括控制超级孟德尔遗传的程度和致命特征的促进性[16]。小分子和光通常用于精确控制酶活性。在这里，我们回顾了对CRISPR E CAS技术的化学和光学控制的不同方法，重点是基本的分子机制，它们的优势和缺点以及他们提供的控制程度。
最小可编程核酸酶 TnpB 的快照发布
“刚刚发表的《自然》新论文是长期不懈努力的结果，展示了立陶宛科学家在生命科学领域的潜力以及他们成为该领域领军人物的能力。这项研究揭示了 TnpB 基因剪刀的结构和机制，为进一步针对性地改造 TnpB 复合物以将其转化为治疗遗传疾病的治疗工具奠定了基础，”V. Šikšnys 教授说。