alx1是一种含同源域的转录因子,是棘皮动物中骨骼生成的高度保守调节剂。在海胆中,ALX1在分化胚胎原代间充质细胞(PMC)中起着核心作用,并积极调节这些细胞表达的大多数生物矿化基因的转录。ALX1基因通过重复而产生,并通过41 - 氨基酸基序(D2域)获得了与其旁系同源物(ALX4)不同的骨骼发育功能。alx1和alx4含有谷氨酰胺-50成对型同源域,它们在体外优先与alindromic结合位点相互作用。染色质免疫沉淀测序(CHIP-SEQ)研究表明,ALX1在体内与腔植物和一半位点结合。为了解决这种明显的差异并探索D2结构域的功能,我们使用了与SP-MTMMPB关联的内源性顺式调节模块,SP-MTMMPB是一个编码PMC特定金属蛋白酶的基因,用于分析ALX1的DNA结合特性。我们发现,Alx1在含有一半位点的TAAT上形成了二聚体复合物,该机制与众所周知的二聚体位点上的机制不同。我们使用转基因报告基因测定法分析了一半位点在体内的功能作用,并证明了两个具有部分冗余功能的位点对于SP-MTMMPB CIS-顺式调节模块的PMC特异性活性至关重要。最后,我们表明D2结构域在体外影响了Alx1的DNA结合特性,这表明该基序的免除可能促进了新的转录靶标的获取,并因此是一种新颖的发展功能。