分子研究的重要步骤之一是DNA提取。使用试剂盒或沸腾技术开发了许多用于细菌DNA提取的方法。对于沸腾技术,可以使用水浴,热块和微波炉进行加热。微波炉是使用微辐射光线的工具。本研究旨在确定微波辐射对细菌DNA的影响。本研究中使用的分离株是将接种到NB培养基中的B.J.T.A.2.1分离株。微波暴露进行0、30和90秒。使用QIAAMP DNA迷你试剂盒分离培养物。 从PCR RAPD产物的电泳DNA带中分析了暴露于微波炉后的DNA质量。 细菌的微波暴露会导致DNA的变化。 PCR RAPD反应使用暴露于微波的细菌中的分离DNA产生有关电泳结果的新频带。 细菌暴露在微波炉上的时间越长,新的DNA带模式的越亮和较厚。 微波暴露于细菌培养物会影响分离的DNA。 培养物暴露于微波炉时的时间越长,新的DNA带模式的越亮和较厚。 关键字:微波炉,分子,DNA,细菌培养物。从PCR RAPD产物的电泳DNA带中分析了暴露于微波炉后的DNA质量。细菌的微波暴露会导致DNA的变化。PCR RAPD反应使用暴露于微波的细菌中的分离DNA产生有关电泳结果的新频带。细菌暴露在微波炉上的时间越长,新的DNA带模式的越亮和较厚。微波暴露于细菌培养物会影响分离的DNA。培养物暴露于微波炉时的时间越长,新的DNA带模式的越亮和较厚。关键字:微波炉,分子,DNA,细菌
3. 确认盒式磁带上的接收者身份后,从盒式磁带中取出 AMTAGVI 输液袋。检查盒式磁带标签上的患者标识符是否与 AMTAGVI 输液袋标签上的患者标识符匹配,并将接收者的身份与 AMTAGVI 输液袋标签上的患者标识符匹配。如果有任何差异,请联系 Iovance Biotherapeutics, Inc.,电话:1-833-400-IOVA。4. 解冻前检查每个袋子是否有破损或裂缝。解冻前检查针尖端口是否有损坏。如果袋子损坏或受损,请勿输液,并联系 Iovance Biotherapeutics, Inc.,电话:1-833-400-IOVA。5. 解冻时,请按照当地指南将输液袋放入第二个可密封的袋子(最好是无菌的),以防泄漏并保护端口免受污染。 6. 使用水浴或干解冻法在约 35°C 至 39°C 的温度下解冻 AMTAGVI,直至输液袋中看不到冰或冷冻内容物。从开始解冻到解冻完成的总时间不应超过 10 分钟。 7. 立即从解冻装置中取出袋子。从可密封的塑料袋中取出输液袋并擦干。输液前请勿清洗、旋转或将 AMTAGVI 重新悬浮在新的培养基中。 8. 解冻后,尽快注射每袋 AMTAGVI。如果需要,AMTAGVI 可在室温(18°C 至 25°C)下保存不超过 3 小时。请勿重新冷冻或冷藏解冻的产品。 9. 输液前,检查解冻输液袋的内容物。如果可见细胞团块,请在输液前倒置袋子轻轻混合袋子的内容物。如果需要,轻轻按摩袋子以分散细胞团块。如果输液袋损坏或泄漏,或出现其他损坏,请勿输注袋中的物质。AMTAGVI 输注
所有离心步骤均在室温下执行。确保使用的离心管能够承受所需的离心力。用Norgen的血浆/血清细胞无循环的DNA纯化试剂盒提供的自旋柱被优化可与台式离心机一起使用,并且不适用于真空设备大多数标准的台式台式微型离心机将容纳Norgen的Micro和Mini Spin柱。离心诺根的自旋柱以比该过程中建议的高速速度可能影响DNA产量。以比该过程中建议的速度低的离心NORGEN的自旋柱不会影响DNA产量。但是,在较低速度下离心可能需要更长的时间才能通过旋转柱进行•清洁,一次性手套应始终戴上处理试剂,样品,移液器,一次性管等时,应始终戴上固定柱。建议经常更换手套以避免污染。确保所有溶液在使用前都处于室温下,并且没有形成沉淀物。如有必要,请加热解决方案并充分混合,直到解决方案再次变得清晰。通过将24毫升的96-100%乙醇(用户提供)加到包含浓缩溶液WN的瓶子中,准备溶液WN的工作浓度。这将给出42毫升的最终体积。瓶子上的标签具有一个可以检查的盒子,以表明已添加了乙醇。这将给出最终的128毫升。将水浴或加热块预热至60°C。通过将90 ml的96-100%乙醇(用户提供)加入含有浓缩洗涤溶液a的瓶子来准备清洗溶液A的工作浓度。瓶子上的标签具有一个可以检查的盒子,以表明已添加了乙醇确保样品未经过一个以上的冷冻周期,因为这可能会导致DNA降解。此套件适合于从肝素,EDTA或柠檬酸盐收集的血液中制备的新鲜或冷冻血清或血浆分离DNA。如果任何解决方案都不经过指定离心时间内的自旋柱,请再旋转1-2分钟,直到溶液完全通过列。不超过离心速度,因为这可能会影响DNA产量。冷冻血浆(从肝素,EDTA或柠檬酸酯管上收集的血液)或血清样品应在处理前在400 x g(〜2,000 rpm)下离心2分钟。仅处理清晰的上清液,因为直接处理冷冻样品,可能会遇到列堵塞。
6 设备和耗材 ................................................................................................................................................................................................ 9 6.1 概述 ................................................................................................................................................................................................ 9 6.2 灭菌和其他加热设备 ................................................................................................................................................................ 10 6.2.1 概述 ...................................................................................................................................................................................... 10 6.2.2 高压灭菌器 ............................................................................................................................................................................. 10 6.2.3 培养基制备器 ............................................................................................................................................................. 11 6.2.4 蒸锅,包括沸水浴 ............................................................................................................................................. 12 6.2.5 灭菌炉 ............................................................................................................................................................................. 12 6.2.6 微波炉 ............................................................................................................................................................................. 13 6.2.7 加热板和加热套 ............................................................................................................................................................. 14 6.2.8气体燃烧器或金属线焚化炉 ...................................................................................................................................................... 14 6.3 控温设备和监控装置 ...................................................................................................................................................... 15 6.3.1 概述 ...................................................................................................................................................................................... 15 6.3.2 培养箱 ...................................................................................................................................................................... 15 6.3.3 恒温控制浴槽 ...................................................................................................................................................... 16 6.3.4 加热块 ............................................................................................................................................................................................................................. 17 6.3.5 冰箱和冷藏室 ...................................................................................................................................... 18 6.3.6 冷冻柜和深度冷冻柜/超低温冷冻柜 ................................................................................................ 19 6.3.7 温度监测设备,包括自动记录仪 ............................................................................................. 19 6.3.8 天平和重量稀释器 ...................................................................................................................................... 20 6.4 定量接种设备 ............................................................................................................................................. 21 6.4.1 移液器和移液器 ............................................................................................................................................. 21 6.4.2 分配器 ............................................................................................................................................................. 22 6.4.3 螺旋滴定仪 ............................................................................................................................................................. 24 6.5 防护柜 ............................................................................................................................................................................................. 24 6.5.1 描述 ............................................................................................................................................................................................. 24 6.5.2 使用 ............................................................................................................................................................................. 25 6.5.3 清洁和消毒 ............................................................................................................................................................. 25 6.5.4 维护和检查 ............................................................................................................................................................. 26........................................... 19 6.3.7 温度监测设备,包括自动记录仪 ...................................................................................................... 19 6.3.8 天平和重量稀释器 ........................................................................................................................................ 20 6.4 定量接种设备 ...................................................................................................................................................... 21 6.4.1 移液器和移液器 ...................................................................................................................................................... 21 6.4.2 分配器 ...................................................................................................................................................................... 22 6.4.3 螺旋滴管 ...................................................................................................................................................................... 23 6.4.4 连续稀释器 ...................................................................................................................................................................... 24 6.5 保护柜 ............................................................................................................................................................................. 24 6.5.1 描述 ............................................................................................................................................................................. 24 6.5.2 使用................................................................................................................................................................................................ 25 6.5.3 清洁和消毒 ................................................................................................................................................................ 25 6.5.4 维护和检查 ................................................................................................................................................................ 26........................................... 19 6.3.7 温度监测设备,包括自动记录仪 ...................................................................................................... 19 6.3.8 天平和重量稀释器 ........................................................................................................................................ 20 6.4 定量接种设备 ...................................................................................................................................................... 21 6.4.1 移液器和移液器 ...................................................................................................................................................... 21 6.4.2 分配器 ...................................................................................................................................................................... 22 6.4.3 螺旋滴管 ...................................................................................................................................................................... 23 6.4.4 连续稀释器 ...................................................................................................................................................................... 24 6.5 保护柜 ............................................................................................................................................................................. 24 6.5.1 描述 ............................................................................................................................................................................. 24 6.5.2 使用................................................................................................................................................................................................ 25 6.5.3 清洁和消毒 ................................................................................................................................................................ 25 6.5.4 维护和检查 ................................................................................................................................................................ 26................................ 21 6.4.2 分配器 ...................................................................................................................................................................................... 22 6.4.3 螺旋滴定器 ................................................................................................................................................................................ 23 6.4.4 连续稀释器 ................................................................................................................................................................................ 24 6.5 保护柜 ...................................................................................................................................................................................... 24 6.5.1 描述 ...................................................................................................................................................................................... 24 6.5.2 使用 ...................................................................................................................................................................................... 25 6.5.3 清洁和消毒 ...................................................................................................................................................................... 25 6.5.4 维护和检查 ...................................................................................................................................................................... 26................................ 21 6.4.2 分配器 ...................................................................................................................................................................................... 22 6.4.3 螺旋滴定器 ................................................................................................................................................................................ 23 6.4.4 连续稀释器 ................................................................................................................................................................................ 24 6.5 保护柜 ...................................................................................................................................................................................... 24 6.5.1 描述 ...................................................................................................................................................................................... 24 6.5.2 使用 ...................................................................................................................................................................................... 25 6.5.3 清洁和消毒 ...................................................................................................................................................................... 25 6.5.4 维护和检查 ...................................................................................................................................................................... 26........................................................................................................................... 25 6.5.4 维护与检查 ................................................................................................................................................ 26........................................................................................................................... 25 6.5.4 维护与检查 ................................................................................................................................................ 26
磁共振引导聚焦超声 (MRgFUS) 是一种非侵入性治疗方法,它结合了聚焦超声和磁共振成像两项技术。超声波束穿透软组织,在 MRI 的引导和监测下,可聚焦于目标部位。超声波使目标组织局部温度升高,导致凝固性坏死,同时不伤害周围的正常结构。每次超声产生的超声波都指向一个焦点,该焦点的最大焦点体积直径为 20 纳米,高度/长度为 15 纳米。这会导致温度快速升高,足以在焦点处实现组织消融。除了提供引导外,相关的 MRI 还可以提供在线温度成像,提供温度“图”,可进一步确认消融治疗的治疗效果并允许实时调整治疗参数。美国食品药品监督管理局 (FDA) 已批准 ExAblate® MRgFUS 系统 (InSightec, Inc.,以色列海法) 用于四种适应症;治疗子宫肌瘤 (平滑肌瘤),缓解骨转移性肿瘤相关疼痛,治疗药物难治性特发性震颤和震颤为主的帕金森病。超声设备专门设计为与 MR 磁体兼容,并集成到标准临床 MRI 单元中。它包括一个患者桌,桌上有一个支架,支架将聚焦超声换能器放置在水浴或轻油浴中。该设备的某些型号具有可拆卸支架;只有某些类型的支架可用于缓解转移性骨癌相关疼痛。子宫肌瘤 (平滑肌瘤) 是影响育龄人群的最常见疾病之一。子宫肌瘤的症状包括月经过多、盆腔压力或疼痛。目前可用于治疗有症状的子宫肌瘤的方法包括子宫切除术、腹部肌瘤切除术、腹腔镜和宫腔镜肌瘤切除术、激素治疗、子宫动脉栓塞术和观察等待。子宫切除术和各种肌瘤切除术被视为标准治疗。对于治疗与骨转移相关的疼痛,MRgFUS 治疗的目的是破坏肿瘤周围骨表面的神经。转移性骨病是癌症疼痛的最常见原因之一。现有的治疗方法包括保守措施(例如按摩、运动)和药物治疗(例如止痛药、双膦酸盐、皮质类固醇)。对于对这些治疗没有反应的患者,标准治疗是外照射放射治疗 (EBRT)。然而,相当一部分患者在放疗后仍有残留疼痛,这些患者需要替代治疗方法。 MRgFUS 也正在研究用于治疗其他肿瘤,包括纤维瘤、乳腺肿瘤、前列腺肿瘤和脑肿瘤。特发性震颤是最常见的运动障碍。它通常影响手和手臂,也可能影响头部和声音,很少影响面部、腿部和躯干。它在患者中是异质性的,频率、幅度、加重原因和与其他神经系统缺陷的关联各不相同。特发性震颤的神经病理学尚不确定,一些证据表明它位于脑干和小脑。如果患者因震颤而出现间歇性或持续性残疾,则初始治疗采用药物(β受体阻滞剂或抗惊厥药)。对于药物难治性患者,可以提供手术(深部脑刺激或丘脑切开术),尽管观察到不良事件发生率很高。
紫罗兰色红胆葡萄糖(VRBG)琼脂脱水且现成的培养基1-在食物,动物饲料和环境样品中检测和列举肠杆菌科的使用和枚举。2 – C OMPOSITION - TYPICAL FORMULA * ( AFTER RECONSTITUTION WITH 1 L OF WATER ) DEHYDRATED AND READY - TO - USE MEDIUM Peptone 7.0 g Yeast extract 3.0 g Sodium chloride 5.0 g Bile salts No.3 1.5 g Glucose 10.0 g Neutral red 30.0 mg Crystal violet 2.0 mg Agar 15.0 g *The formula may be adjusted and/or supplemented to meet the required performances 标准。3-方法的含量和解释肠杆菌科的解释通常被食品制造商视为卫生指标,因此用于监测采取的预防措施的有效性。这也反映在肠杆菌科作为卫生指标的几种国家和国际标准或标准中。紫罗兰色胆汁葡萄糖(VRBG)琼脂是由摩森植物1设计的,用于枚举肠杆菌科,通过将葡萄糖添加到紫罗兰红胆汁乳糖琼脂中。Mossel等人后来的作品。2,3证明可以省略乳糖,从而导致称为VRBG琼脂的配方。紫罗兰色红胆葡萄糖琼脂,以进行探测和枚举,并采用富集前的步骤,并采用肠杆菌科的MPN技术,当期望寻求的微生物预计需要复苏,并且预计需要的数量低于100次以下或每米级测试。葡萄糖的同化会导致培养基的酸化,因此胆汁盐和中性红摄取的沉淀。ISO 21528-2 5推荐使用倒板技术枚举肠杆菌科,而预计所需的菌落数量为每毫升100毫升或测试样品的每克。肽为细菌生长提供了重要的生长因子;酵母提取物是用于生长刺激的B-VITAMINS复合物的来源。氯化钠保持渗透平衡。培养基依赖于选择性抑制性成分晶体紫和胆汁盐,这些含量抑制了革兰氏阳性细菌的生长以及指标系统葡萄糖和中性红色的生长。肠杆菌科以红色粉红色至红色紫色菌落的生长,周围是红色降水带。非葡萄糖发酵罐(例如,假单胞菌,阿科杆菌,阿尔卡吉尼等)表现出透明的无色菌落。除肠杆菌科以外的一些革兰氏阴性细菌可能会生长,但可能受到覆盖程序的限制。4a -d介质制剂(脱水培养基)悬浮41.5 g在1000毫升冷纯净的水中。热量频繁搅动以完全溶解。不要自压盐,也不要过热。冷却至47-50°C,混合并分布成无菌培养皿。4B- d的介于培养基(准备就绪 - 使用烧瓶 /试管)的液体液化液在100±2°C或温度控制的水浴(100°C)中的高压釜中烧瓶 /管的含量。或者,可以将瓶子或管子放入装有水的罐子中,该水放在热板上并煮沸。在加热之前稍微松开盖,以允许压力交换。冷却至47-50°C,然后将培养基倒入无菌条件下的无菌培养皿中。5-疗程特征脱水的培养基外观绿色紫色,细,均匀,自由流动的粉末溶液和准备好的中等外观紫罗兰,在20-25°C时清除最终pH 7.4±0.2 6- M M M原始物质 - 包装