已测试至少20 nt。探针可以用3´或5´生物素/Desthiobiotin亲和力组设计,用于链霉亲和素富集(NEB#S1421)。为了获得最佳结果,受保护的DNA:RNA杂交区应为4或5个核苷酸
在本文中,我们在严格的定量信息流(QIF)(QIF)的框架中分析了LDP与舒适的组合,以及有关推理攻击产生的弹性的原因。qif自然捕获随机机制作为信息理论通道的(组合),从而可以以自然的方式精确建模各种推理攻击,并在这些攻击下测量私人信息的泄漏。我们利用K -RR机制与Shuflim模型的特定组合的对称性来实现准确表达泄漏的封闭公式。,我们提供了公式,这些公式显示了如何改善当地模型中泄漏的保护,并研究了泄漏的行为,以表现出LDP机制的隐私参数的各种值。
组合片段的序列和所得的吸光度光谱用于开发计算模型,以预测片段的进一步组合,从而导致其他新型颜色。用适配器(TwistBioscience®,South San Francisco,CA)重新排序基因片段,以进行扩增,并使用Q5®热启动High Fidelity 2X Master Mix(NEB#M0494)在50 µL反应中放大了PCR,并使用Spri®Beads清洁,并在100 µL水中洗净。使用Opentrons OT-2,将包含目的地矢量的主混合物和15 µL Nebridge Golden Gate组件套件(BSAI-HFV2)的组件组件组装在4°C温度模块上,然后通过涡旋将其混合在甲板上。然后,液体处理程序在没有温度控制的情况下将主混合物分布在96孔板上。使用OT-2,在3小时以上(总计576个零件)的过程中,将每个组件的6个零件移动。然后将板密封,并进行37°C的30个循环1分钟16°C 1分钟,然后在60°C的最终持有5分钟。2 µL转化为20 µL T7 Express Compation E.Coli。5 µL的稀释或浓缩转化铺在LB KAN上,并在37°C下生长过夜。菌落生长后,将它们从孵化器中取出,并允许在台式上开发颜色过夜,然后在4°C的冰箱中发育。
组合片段的序列和所得的吸光度光谱用于开发计算模型,以预测片段的进一步组合,从而导致其他新型颜色。用适配器(TwistBioscience®,South San Francisco,CA)重新排序基因片段,以进行扩增,并使用Q5®热启动High Fidelity 2X Master Mix(NEB#M0494)在50 µL反应中放大了PCR,并使用Spri®Beads清洁,并在100 µL水中洗净。使用Opentrons OT-2,将包含目的地矢量的主混合物和15 µL Nebridge Golden Gate组件套件(BSAI-HFV2)的组件组件组装在4°C温度模块上,然后通过涡旋将其混合在甲板上。然后,液体处理程序在没有温度控制的情况下将主混合物分布在96孔板上。使用OT-2,在3小时以上(总计576个零件)的过程中,将每个组件的6个零件移动。然后将板密封,并进行37°C的30个循环1分钟16°C 1分钟,然后在60°C的最终持有5分钟。2 µL转化为20 µL T7 Express Compation E.Coli。5 µL的稀释或浓缩转化铺在LB KAN上,并在37°C下生长过夜。菌落生长后,将它们从孵化器中取出,并允许在台式上开发颜色过夜,然后在4°C的冰箱中发育。
摘要 - 一种秘密共享洗牌(SSS)协议使用随机的秘密置换列出了一个秘密共享的向量。它发现了许多应用程序,但是它也是一个昂贵的操作,通常是性能瓶颈。Chase等。 (Asiacrypt'20)最近提出了一种高效的半honest两方SSS协议,称为CGP协议。 它利用有目的设计的伪随机相关性,可促进沟通高效的在线洗牌阶段。 也就是说,在许多现实世界中的应用程序方案中,半诚实的安全性不足,因为洗牌通常用于高度敏感的范围。 考虑到这一点,最近的作品(CANS'21,NDSS'22)试图通过恶意安全性增强CGP协议,而不是经过身份验证的秘密销售。 但是,我们发现这些尝试存在缺陷,恶意对手仍然可以通过恶意偏离来学习私人信息。 本文提出的具体攻击证明了这一点。 那么,问题是如何填补空白并设计恶意安全的CGP洗牌协议。 我们通过引入一组轻量级相关检查和减少泄漏机械性来回答这个问题。 然后,我们将技术应用于经过身份验证的秘密股票来实现恶意安全。 值得注意的是,我们的协议虽然提高安全性,但也是有效的。 在两党设置中,实验结果表明,与半honest版本相比,我们恶意安全的协议引入了可接受的开销,并且比MP-SPDZ库中的最先进的恶意安全SSS协议更有效。Chase等。(Asiacrypt'20)最近提出了一种高效的半honest两方SSS协议,称为CGP协议。它利用有目的设计的伪随机相关性,可促进沟通高效的在线洗牌阶段。也就是说,在许多现实世界中的应用程序方案中,半诚实的安全性不足,因为洗牌通常用于高度敏感的范围。考虑到这一点,最近的作品(CANS'21,NDSS'22)试图通过恶意安全性增强CGP协议,而不是经过身份验证的秘密销售。但是,我们发现这些尝试存在缺陷,恶意对手仍然可以通过恶意偏离来学习私人信息。本文提出的具体攻击证明了这一点。那么,问题是如何填补空白并设计恶意安全的CGP洗牌协议。我们通过引入一组轻量级相关检查和减少泄漏机械性来回答这个问题。然后,我们将技术应用于经过身份验证的秘密股票来实现恶意安全。值得注意的是,我们的协议虽然提高安全性,但也是有效的。在两党设置中,实验结果表明,与半honest版本相比,我们恶意安全的协议引入了可接受的开销,并且比MP-SPDZ库中的最先进的恶意安全SSS协议更有效。
质粒DNA的产率和质量受质粒拷贝数,质粒大小,插入毒性,宿主应变,抗生素选择,生长培养基和培养条件的影响。对于大肠杆菌的标准克隆菌株,我们建议使用新鲜条纹的选择板中的单个菌落来接种标准的生长培养基,例如LB(Luria-Bertaini)培养基。培养物通常在37°C和200-250 rpm的血管中生长,该容器允许曝气(Erlenmeyer烧瓶或滚筒上的Erlenmeyer烧瓶或培养管),并在12-16小时后收获,因为培养物从对数生长到固定相的培养过渡。这是质粒DNA含量最高的时间。LB中的培养物通常在3-6之间的最终OD 600中饱和,但生长至饱和度通常会导致细胞裂解。结果,质粒的产量和质量降低,并增加不需要的宿主染色体DNA的可能性增加。使用丰富的培养基(例如2x YT或TB)在较短的时间内会产生更高的生物量。如果选择用于生长,则应对准备中使用的培养时间和细胞数量进行调整以纠正这些差异,并避免矩阵过载并降低DNA的产量和质量。
