Arizona Lithium Limited (ASX: AZL, AZLO, AZLOA, OTC: AZLAF) (“Arizona Lithium”, “AZL” or “the Company”) , a company focused on the sustainable development of two large lithium development projects in North America, the Big Sandy Lithium Project (“ Big Sandy ”) and the Prairie Lithium Project (“ Prairie ”), is pleased to announce it has从草原项目中生产了电池级碳酸盐,该项目已由盐厂独立验证。碳酸锂是由2023年11月至2024年2月在草原项目上运营的ILIAD飞行员的DLE洗脱液生产的。dle洗脱液被送往加拿大温哥华的盐厂设施,在那里它被转换为碳酸盐级电池级。图1显示了产生的电池级碳酸锂的样品。图2显示了过程流程图,以便从草原项目到电池级碳酸盐。图3说明了盐水测试设施中的碳酸盐和清洗设备。
图5a。lipo 2 f 2的色谱图在KOH洗脱液中。在DI水中未处理的1G/L Lipo 2 F 2(顶色谱图)显示出具有明显的尾巴和边缘的水解产物。使用量增加的NaOH处理相同的样品,显示出更高程度的水解。
。WB(80%ETOH)。(*)3。您需要将其与UB混合到PCR产品。•如果UB不混合,直到UB完全反应,则可以降低纯化效率。•加入Bu e e e e e e e e ef bu o o a和样品后,将其轻轻移动约4至5次。4。在EB使用前将列送给列以删除ETOH。(*)。根据 pcr产品纯化目的选择二聚体去除条件,高收率条件和凝胶提取。 (凝胶提取通过高产量方法进行)6。 为提高凝胶提取的效率,我们使用高质量的琼脂糖。 •将凝胶块放入UB中,完全溶解在50〜65℃中,然后将其添加到列中。 •在琼脂糖凝胶中的百分比百分比中,在纯化时将UB超过6倍。 7。 DNA柱绑定您可以在获得更高的屈服DNA之前使用heldbbs获取列。 8。 当周围温度降低时,可以确定 UB。 在这种情况下,在微波炉或干烤箱中加热后使用。 9。 当 DNA洗脱时,EB在50°C下预热10分钟,洗脱将提高效率。 (特别是对于大型DNA片段)10。 请参阅Cadalog的Q.C数据页,以获取其他高收益率。 (*)仅当您使用WB为80%EtOH 时才pcr产品纯化目的选择二聚体去除条件,高收率条件和凝胶提取。(凝胶提取通过高产量方法进行)6。为提高凝胶提取的效率,我们使用高质量的琼脂糖。•将凝胶块放入UB中,完全溶解在50〜65℃中,然后将其添加到列中。•在琼脂糖凝胶中的百分比百分比中,在纯化时将UB超过6倍。7。DNA柱绑定您可以在获得更高的屈服DNA之前使用heldbbs获取列。8。UB。在这种情况下,在微波炉或干烤箱中加热后使用。9。DNA洗脱时,EB在50°C下预热10分钟,洗脱将提高效率。(特别是对于大型DNA片段)10。请参阅Cadalog的Q.C数据页,以获取其他高收益率。(*)仅当您使用WB为80%EtOH
细胞,并重悬于裂解中(20 mM Tris,500 mM NaCl和10 mM Imidazole,pH 8.0),并补充了“完整的蛋白酶抑制剂鸡尾酒”(Merck,CAT,CAT#11697498001)。重悬于重悬酶后,苯并酶核酸酶(默克,CAT#E1014-5KU,每40 ml裂解物10μl)和溶菌酶(默克,CAT#10837059001,1 mg/ml裂解物),并加入冰上30分钟。细胞在Avestin乳液C-5均质器(15-20 kpsi)上被破坏,并通过离心(15,000 g,4°C,15分钟)去除不溶性细胞碎片。在10°C下进行所有随后的色谱步骤。清除的裂解物被加载在5 ml Histrap FF柱上(Cytiva,Cat#17525501)。将树脂用10列的洗涤液(裂解效果)洗涤(但使用20 mM咪唑)洗涤,并用10列的洗脱体洗脱蛋白(裂解效果,但用250毫米咪唑)洗脱。馏分合并,并在透析中稀释至25 mL(250 mM KCl,20 mM HEPES和1 mM DTT和1 mM EDTT和1 mM EDTA,pH 8.0)。使用透析膜管透析在10°C下透析,使用分子量切割为6-8 kDa(光谱/POR标准级再生纤维素,宽23毫米)的透析膜管。1-2小时后,将透析液替换,透析继续过夜。第二天,将透析样品在10 mM HEPE(pH 8)中稀释了两倍(pH 8),并立即加载在5 mL HITRAP肝素HP柱(Cytiva,CAT,CAT#17040601)上,并用Bu效率a(20 mM Hepes,150 mm Hepes,150 mm KCl,pH 8.0)。关注的分数被汇总并上升。将树脂用2柱体积洗涤,并使用bu虫B(20 mM Hepes,2m kcl,pH 8.0)的线性梯度在12柱体积上洗脱蛋白质。含量为2 mL;通过在120 mL SuperDex200凝胶滤光管(Cytiva#28989335)上注射上浓缩样品,以50 mM磷酸钠,300 mM NaCl,300 mM NaCl,0.1 mm EDTA,pH 7.5 AS分离bu e e e e e e e e e e o 进行了最终的色谱步骤。进行了最终的色谱步骤。
NucleOmag®质粒程序利用了修饰的碱性裂解方案,并结合了适当的缓冲条件下核酸对顺磁珠的可逆吸附。颗粒细菌被重悬于缓冲液A1中。质粒DNA通过裂解缓冲液A2从细胞中解放出来,然后使用缓冲液S3进行中和和沉淀。粗裂解物可以通过离心或使用NucleOmag®清除珠(用于裂解液清除的专门的顺磁珠)清除。用于将核酸与顺磁珠,结合缓冲液和核瘤®M珠结合的结合添加到清除的裂解物中。磁分离后,通过获得专利的排毒缓冲液ERB去除内毒素和蛋白质。用洗涤缓冲液和空气干燥除去盐或残留乙醇等进一步的污染物。纯质粒DNA用低盐洗脱缓冲液或水洗脱,并准备好用于任何常见的下游应用(包括转染)(仅研究)。核对®质粒试剂盒已设计用于自动磁杆系统。
NucleOmag®HMWDNA试剂盒设计用于从细胞,组织和植物材料中分离出高分子量DNA。此外,还显示了全血(EDTA),唾液,颊拭子以及细菌和酵母样品的兼容性。该程序基于在适当的缓冲液条件下核酸对顺磁珠的可逆吸附。样品裂解是使用裂解缓冲液HM1或HMB和蛋白酶K进行酶促的。用于将核酸与顺磁珠,结合缓冲液HM2和核瘤®B-珠的结合添加到转移和清除的裂解物中。磁分离后,使用洗涤缓冲液HM3,HM4和70%乙醇洗涤顺磁珠以去除污染物和盐分。使用冲洗缓冲液HM5去除以前的洗涤步骤的残留乙醇。接下来,高度纯化的DNA用洗脱缓冲液HM6洗脱,可直接用于下游应用。可以手动使用NucleOmag®HMWDNA试剂盒,也可以在标准的液体处理仪器和自动磁分离器上自动化。
图1。有效的宿主基因组DNA去除,而无需降低噬菌体DNA产量。 使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从四个富集的噬菌体培养物中分离总DNA。 在添加提供的裂解之前,进行了DNase I预处理。 布里液,将20单位的DNase I添加到1 ml富集的噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育20分钟。 DNAase I处理后,遵循该过程。 作为对照,使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从相同4个培养物的等分试样中分离DNA,而无需进行DNase I处理。 进行DNA分析,将10 µL的每50 µL洗脱加载到1x TAE琼脂糖凝胶上。 可以看出,噬菌体DNA被其外套蛋白安全地保护了DNase I治疗,而宿主基因组DNA则被DNase I有效降解。 因此,DNase I预处理导致最终噬菌体洗脱中的宿主GDNA污染较少,而不会影响总噬菌体DNA产量。 车道M是Norgen的Highranger 1 Kb DNA梯子(Cat。 11900)。有效的宿主基因组DNA去除,而无需降低噬菌体DNA产量。使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从四个富集的噬菌体培养物中分离总DNA。在添加提供的裂解之前,进行了DNase I预处理。布里液,将20单位的DNase I添加到1 ml富集的噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育20分钟。DNAase I处理后,遵循该过程。作为对照,使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从相同4个培养物的等分试样中分离DNA,而无需进行DNase I处理。进行DNA分析,将10 µL的每50 µL洗脱加载到1x TAE琼脂糖凝胶上。可以看出,噬菌体DNA被其外套蛋白安全地保护了DNase I治疗,而宿主基因组DNA则被DNase I有效降解。因此,DNase I预处理导致最终噬菌体洗脱中的宿主GDNA污染较少,而不会影响总噬菌体DNA产量。车道M是Norgen的Highranger 1 Kb DNA梯子(Cat。11900)。
NucleoMag ® 质粒程序利用改良的碱性裂解方案,并在适当的缓冲条件下将核酸可逆地吸附到顺磁珠上。沉淀的细菌在缓冲液 A1 中重新悬浮。通过裂解缓冲液 A2 从细胞中释放质粒 DNA,随后使用缓冲液 S3 中和并沉淀裂解物。粗裂解物可以通过离心或使用 NucleoMag ® 清除珠(专门用于裂解物清除的顺磁珠)来清除。为了将核酸与顺磁珠结合,将结合缓冲液 PAB 和 NucleoMag ® M-Beads 添加到清除的裂解物中。磁分离后,通过专利解毒缓冲液 ERB 去除内毒素和蛋白质。使用洗涤缓冲液 AQ 和风干去除其他污染物(如盐或残留乙醇)。纯质粒 DNA 用低盐洗脱缓冲液或水洗脱,可用于任何常见的下游应用,包括转染(仅供研究使用)。NucleoMag ® 质粒试剂盒专为在自动磁棒系统上使用而设计。
2 nd part (protein precipitation), done on: ___/___/___ Add 100 µl Protein Precipitation Solution to the cell lysate mixture.涡流有力。离心机为10分钟13000 rpm。如果颗粒不紧绷,请重复。将1000 µl 100%ETOH添加到新的1.5 ml管中。将上清液(=>包含您的DNA)倒入该管中。通过轻轻反转50次混合。离心机在13000 rpm处离心10分钟。小心地倒出上清液,请确保保持颗粒(这是您的DNA)。加入1000 µL 70%EtOH,然后将管子倒几次以洗涤颗粒。离心13000 rpm持续10分钟。小心地倒出上清液,请确保保持颗粒(这是您的DNA)。空调10分钟,使所有EtoH蒸发。一些液体可能会停留,但希望这是30%的水。不要过分,因为颗粒将很难洗脱。加入30 µL的1x TE或DDH20。在室温下孵育过夜过夜,以使所有DNA洗脱。存储。
NORGEN的纯化技术纯化基于使用Norgen专有树脂作为分离矩阵的自旋色谱柱色谱法。该过程为头发样品提供了简单简便的线粒体DNA隔离方案。首先,将DTT,蛋白酶K和裂解添加剂A添加到发轴上,并在55°C下孵育30分钟。完全溶解了头发轴一旦通过离心去除任何未消化的头发。然后收集清洁上清液,并添加异丙醇和裂解缓冲液B。然后将裂解物加载到自旋柱上。Norgen的自旋柱以取决于离子浓度的方式结合核酸,因此只有DNA才能与柱结合,而蛋白质和其他污染物则在流通中除去或保留在树脂顶部。然后使用提供的洗涤溶液A洗涤结合的DNA,并使用洗脱缓冲液B洗脱纯化的DNA。纯化的mtDNA(以及基因组DNA如果使用毛根)不含所有抑制剂,可用于包括PCR和测序在内的敏感下游应用中。