NORGEN的纯化技术纯化基于自旋色谱柱色谱法。噬菌体DNA优先纯化从其他细胞成分(例如蛋白质)中纯化,而无需使用苯酚,氯仿或氯化葡萄球菌。此过程的起始材料被阐明了噬菌体上清液,该噬菌体上清液已与液体培养物中的细菌碎片分离。最初,噬菌体颗粒通过提供的裂解缓冲液B通过热和化学裂解过程裂解(请参阅第4页的流程图)。异丙醇被添加到裂解物中,并将溶液加载到自旋柱上。Norgen的自旋柱以取决于离子浓度的方式结合核酸,因此只有DNA才能与柱结合,而大多数RNA和蛋白质在流潮中除去。然后用提供的洗涤溶液A洗涤结合的DNA,以去除剩余的杂质,并用洗脱缓冲液洗脱纯化的总DNA。纯化的总噬菌体DNA是最高的完整性,可用于许多下游应用。
NORGEN的纯化技术纯化基于自旋色谱柱色谱法。DNA优先从其他细胞成分(例如蛋白质)中纯化,而无需使用苯酚或氯仿。该过程涉及用液氮(或替代均质化设备)在砂浆中磨碎植物组织。裂解缓冲液L和RNase A,然后在65°C处进行短孵育,接下来,结合缓冲液I将添加到裂解物中,然后在冰上进行另一个短孵育。然后通过提供的过滤柱旋转裂解物,以清除任何碎屑。然后将乙醇添加到澄清的裂解物中,并将溶液加载到自旋柱上。Norgen的树脂以取决于离子浓度的方式结合核酸,因此只有DNA才能与色谱柱结合,而大多数RNA和蛋白质在流潮中除去。然后用提供的溶液WN洗涤结合的DNA并洗涤溶液A以去除剩余的杂质,并用洗脱缓冲液洗脱纯化的总DNA。纯化的DNA具有最高的完整性,可用于许多下游应用。
NucleOmag®HMWDNA试剂盒设计用于从细胞,组织和植物材料中分离出高分子量DNA。此外,还显示了全血(EDTA),唾液,颊拭子以及细菌和酵母样品的兼容性。该程序基于在适当的缓冲液条件下核酸对顺磁珠的可逆吸附。样品裂解是使用裂解缓冲液HM1或HMB和蛋白酶K进行酶促的。用于将核酸与顺磁珠,结合缓冲液HM2和核瘤®B-珠的结合添加到转移和清除的裂解物中。磁分离后,使用洗涤缓冲液HM3,HM4和70%乙醇洗涤顺磁珠以去除污染物和盐分。使用冲洗缓冲液HM5去除以前的洗涤步骤的残留乙醇。接下来,高度纯化的DNA用洗脱缓冲液HM6洗脱,可直接用于下游应用。可以手动使用NucleOmag®HMWDNA试剂盒,也可以在标准的液体处理仪器和自动磁分离器上自动化。
步骤:洗脱单面大小选定的片段。如何:指示操作员将PCR板从位置C转移到B。然后将40 µL分子级水从位置A(图2,粉红色)上的DWP的D列转移到B位置B上的PCR板的每个孔(图2,黄色)。混合15次确保对磁珠的正确重息,然后进行5分钟的RT孵育以进行洗脱。然后,Voyager将提示操作员将PCR板放回位置C的磁铁板上(图4),并将新的96井PCR放在位置B上。延迟3分钟后,用环磁铁捕获磁珠(图5),Voyager将35 µL的浮出水面带到位置B上的新PCR板上,在C位置C中在板中保留5 µL,以防止磁珠下listrover。在运行结束时,告诉用户从位置B中存储PCR板,然后从磁盘上取下板。
图1。有效的宿主基因组DNA去除,而无需降低噬菌体DNA产量。 使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从四个富集的噬菌体培养物中分离总DNA。 在添加提供的裂解之前,进行了DNase I预处理。 布里液,将20单位的DNase I添加到1 ml富集的噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育20分钟。 DNAase I处理后,遵循该过程。 作为对照,使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从相同4个培养物的等分试样中分离DNA,而无需进行DNase I处理。 进行DNA分析,将10 µL的每50 µL洗脱加载到1x TAE琼脂糖凝胶上。 可以看出,噬菌体DNA被其外套蛋白安全地保护了DNase I治疗,而宿主基因组DNA则被DNase I有效降解。 因此,DNase I预处理导致最终噬菌体洗脱中的宿主GDNA污染较少,而不会影响总噬菌体DNA产量。 车道M是Norgen的Highranger 1 Kb DNA梯子(Cat。 11900)。有效的宿主基因组DNA去除,而无需降低噬菌体DNA产量。使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从四个富集的噬菌体培养物中分离总DNA。在添加提供的裂解之前,进行了DNase I预处理。布里液,将20单位的DNase I添加到1 ml富集的噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育20分钟。DNAase I处理后,遵循该过程。作为对照,使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从相同4个培养物的等分试样中分离DNA,而无需进行DNase I处理。进行DNA分析,将10 µL的每50 µL洗脱加载到1x TAE琼脂糖凝胶上。可以看出,噬菌体DNA被其外套蛋白安全地保护了DNase I治疗,而宿主基因组DNA则被DNase I有效降解。因此,DNase I预处理导致最终噬菌体洗脱中的宿主GDNA污染较少,而不会影响总噬菌体DNA产量。车道M是Norgen的Highranger 1 Kb DNA梯子(Cat。11900)。
† 在 hyperCVAD 和 mini-hyperCVD 的 HD-MTX 周期(B 周期)期间,应暂停 TMP/SMX,从甲氨蝶呤治疗前几天开始(以允许 TMP/SMX 洗脱)直到甲氨蝶呤清除后。在 HD-MTX 治疗期间,可继续使用替代 PJP 预防药物(除 TMP/SMX 外)。由于 PJP 生长缓慢,因此暂时停止预防是适当的。
修改的方案向导®基因组DNA纯化试剂盒的基因组纯化试剂盒通过离心在10ml颗粒2ml中通过离心在13,000 rpm 1以13,000 rpm 1恢复5分钟,在540 µl EDTA中重悬于540 µl的EDTA中,在50 mm,PH 87 µL,pH 30 µl,在10 mg lysozeme中,lysozym/c在10 mL在13,000 rpm丢弃的13,000 rpm处离心3分钟,将沉淀物恢复为600 µl的“核酸溶液”(来自KIT),并在80°C下混合热量5分钟(允许下一步冷却至下一步)加入3 µL RNase(从KIT中)添加3 µL RNase(从KIT中)在37°C下添加200 µL,并加入200 µL(oft of kit)(oft of of kit),并加入200 µL(oft of of of kit)(oft of of Kit)。 ice for 5 min Centrifuge for 3 min at 13,000 rpm TRANSFER supernatant to a 1.5 mL tube Add 600 µL isopropanol at ambient temperature Mix by inverting the tube Centrifuge for 3 min at 13,000 rpm DISCARD the supernatant 2 Add 600 µL of 70% ethanol at ambient temperature Centrifuge for 3 min at 13,000 rpm 3 DISCARD ethanol Dry pellet at 37°C在50-100 µL的水或洗脱缓冲液中重悬于gDNA(套件):如果需要更多的DNA,则每个培养物多个管子以上一个管。这些可以在较小的体积中洗脱,并在洗脱步骤中合并。根据细菌菌株以达到所需的DNA量,提取1至4个颗粒可能是必需的。2 DNA颗粒可能并不总是可见。乙醇洗涤通常会显示出更长的3个离心机,如果白色颗粒保持松动,以促进收集干净的上清液。QC
我们的新丹南微生物组粪便DNA试剂盒比我们的原始微生物组粪便技术更有效,并且旨在将纯微生物DNA的高产量与粪便样品分离,用于微生物组和宏观分析。该套件具有新型的微生物DNA柱和优化的化学性质,以更有效地去除PCR抑制剂(例如多糖,血红素化合物和胆汁盐),使用新型的微生物组裂解缓冲液和微生物组降水缓冲液在这种过程中,在这种过程中,微型机构是有效地使用了散热器的,并且是由热量进行的。蛋白质和抑制剂通过降水使用新的专有抑制剂去除缓冲液消除,随后通过离心与珠子和未溶解的样品材料结合。将纯化的裂解物与结合缓冲液混合,然后应用于微生物DNA柱。与柱结合的DNA经历了两个洗涤步骤。在干燥步骤后,可以用DNA进行NG,PCR和其他下游应用,可以用洗脱缓冲液(5 mm Tris/HCl,pH 8.5)洗脱。
NORGEN的纯化技术纯化基于自旋色谱柱色谱法。优先从其他细胞成分(例如基因组DNA和RNA)中纯化质粒DNA。该过程涉及首先颗粒的隔夜细菌培养物具有质粒DNA(请参阅第3页的流程图)。然后,使用提供的重悬溶液AZ重悬细菌颗粒,并使用裂解缓冲液N进行细菌。然后添加缓冲液。然后添加缓冲液TN,从而导致溶液中存在的基因组DNA和蛋白质。然后通过离心阐明裂解物,以去除含有质粒DNA的裂解物中的沉淀蛋白和基因组DNA。然后将澄清的裂解物加载到自旋柱上。Norgen的柱以取决于离子浓度的方式结合DNA,因此,只有质粒DNA才能与柱结合,而大多数消化的RNA和蛋白质将在流动中除去或保留在柱床的顶部。然后用提供的洗涤溶液J洗涤结合的DNA,以去除剩余的杂质。最后,无内毒素纯化的质粒DNA用洗脱缓冲液洗脱。纯化的DNA是最高质量的,可用于许多下游应用,包括测序,克隆和转染。
剂量和给药给药:1,480 MBQ(40 MCI),每次通过50 mL/min的静脉输注,每次静止或应力分量的范围为1,110 MBQ至2,220 MBQ(30 MCI至60 MCI)。(2.2)使用型号1700输液系统时给药:每次休息或每次休息的实际体重(0.27 mci/kg至0.81 mci/kg),每次休息时间为10 MBQ/kg至30 mbq/kg,每次休息或应力分量通过静脉输液或20 ml/分钟或20 mL/分钟/分钟/分钟/分钟。(2.2)不超过2,220 MBQ(60 MCI)的最大剂量,或每次休息的最大体积100 mL或过程的应力分量。(2.2)其余剂量和应力剂量之间的最小间隔为10分钟,以允许足够的RB 82衰减。(2.2)输液完成后60秒至90秒开始图像采集;如果预计循环时间更长,请等待120秒。图像采集为5分钟。(2.3)用于辐射安全,输液系统,洗脱教学,洗脱测试,剂量输送和到期