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JEFFREY I. ZINK 无机化学研讨会...
摘要：光被广泛应用于化学、生物学和医学、荧光成像、光遗传学、光激活基因编辑、光控免疫疗法和光化学疗法等治疗癌症和病毒感染的方法中。所有基于光的方法在活体生物组织中面临的一个关键挑战是光子的穿透性差，这主要是由于散射和吸收。这种限制通常需要侵入性操作，例如对组织进行物理切片、插入光纤和内窥镜，以及手术切除上覆组织（例如开颅手术）。为了应对这些挑战，我们的实验室开发了一种超声介导的血管内光源，利用聚焦超声的深层组织穿透性。我们利用了机械发光纳米传感器 (MLNT)，它们是通过生物矿物启发的抑制溶解方法合成的机械发光材料的胶体纳米颗粒。这些 MLNT 可以通过静脉输送到血液循环中，并在超声焦点处局部发光。由于超声波具有深度穿透和快速时间动力学，我们已经证明这种方法可以在活体小鼠的不同器官中以毫秒精度在高深度产生按需和动态可编程的光发射模式。这种超声介导的血管内光源使我们能够在活体小鼠中进行非侵入式“声光遗传学”神经调节，以及激活同一只小鼠大脑不同脑区的全脑“扫描光遗传学”。在演讲结束时，我将介绍光子材料的进步如何促进下一代脑机接口的发展。
分子“邮政编码”将杀手T细胞吸引到脑肿瘤
在计算机上（在计算机中）：科学家使用计算机程序来预测药物如何根据其化学特性在体内移动。在实验室（体外）：他们在菜肴中的细胞上测试药物，以查看其在受控环境中的表现。在人类/动物中（体内）：有时，它们在活体中测试该药物以查看其工作原理。
缺氧条件下的微生物单细胞应用
摘要 微生物学领域传统上侧重于在群体水平上研究微生物。然而，包括微流体和成像技术在内的单细胞水平方法的应用揭示了群体内的异质性，使得这些方法对于以更高的分辨率了解细胞活动和相互作用至关重要。此外，单细胞分选为从微生物群体或复杂的微生物群落中分离感兴趣的细胞开辟了新途径。这些分离的细胞可以在下游的单细胞“组学”分析中进一步研究，提供生理和功能信息。然而，由于厌氧微生物对氧气敏感，将这些方法应用于原位条件下的研究仍然具有挑战性。在这里，我们回顾了现有的在单细胞水平上分析活体厌氧微生物的方法，包括活体成像、细胞分选和微流体（芯片实验室）应用，并解决了它们在缺氧操作中遇到的挑战。此外，我们还讨论了针对厌氧菌的非破坏性成像技术的开发，例如不依赖氧气的荧光探针和替代方法。
适体的应用改善了基于 CRISPR 的植物端粒实时成像
开发活体成像技术以提供染色质在活细胞中如何组织的信息对于解释生物过程的调节至关重要。在这里，我们展示了基于 CRISPR/Cas9 的活体成像技术的改进。在这种方法中，sgRNA 支架与 RNA 适体融合，包括 MS2 和 PP7。当死 Cas9 (dCas9) 与嵌合 sgRNA 共表达时，标记 MS2 和 PP7 适体的荧光外壳蛋白 (tdMCP-FP 和 tdPCP-FP) 被招募到目标序列中。与之前使用 dCas9:GFP 的工作相比，我们表明，使用基于适体的 CRISPR 成像构建体，瞬时转化的本氏烟的端粒标记质量得到了改善。标记受适体拷贝数的影响，受启动子类型的影响较小。相同的结构不适用于稳定转化植物和根中的重复标记。RNP 复合物与其靶 DNA 的持续相互作用可能会干扰细胞过程。
暴露于渗透或代谢应激的脑切片中扩散去极化的比较分析
摘要背景：复发性扩散性去极化 (SD) 发生在卒中和创伤性脑损伤中，被认为是损伤进展的标志。活体大脑中与 SD 相关的条件很复杂，这促使研究人员研究活体大脑切片制剂中的 SD，但实验室之间的方法差异使综合数据解释变得复杂。在这里，我们对活体大脑切片中 SD 的演变进行了比较评估，这些切片响应选定的 SD 触发器并在各种培养基中，在其他标准化实验条件下进行。方法：制备大鼠活体冠状脑切片 (350 μm) (n = 51)。使用低渗培养基 (Na + 含量从 130 降至 60 mM，HM) 或氧-葡萄糖剥夺 (OGD) 来引起渗透性或缺血性挑战。用人工脑脊液 (aCSF) 灌注的脑切片作为对照。在对照条件下通过压力注射 KCl 或电刺激诱发 SD。通过皮层内玻璃毛细管电极记录局部场电位 (LFP)，或在白光照射下进行内在光信号成像以表征 SD。使用 TTC 和苏木精-伊红染色评估组织损伤。结果：严重渗透应激或 OGD 会引发自发性 SD。与 aCSF 中触发的 SD 相反，这些自发去极化的特点是复极不完全且持续时间延长。此外，HM 或 OGD 下的皮质 SD 会传播到整个皮质，偶尔会侵入纹状体，而 aCSF 中的 SD 在停止之前覆盖的皮质区域要小得多，并且从未扩散到纹状体。HM 中的 SD 显示出最大的幅度和最快的传播速度。最后，HM 中的自发性 SD 以及尤其是在 OGD 下的自发性 SD 之后会出现组织损伤。结论：虽然 Na + /K + ATP 酶的失效被认为会损害 OGD 相关 SD 的组织恢复，但组织肿胀相关的过度兴奋和星形胶质细胞缓冲能力的耗尽被认为会促进渗透应激下的 SD 进化。与 OGD 相比，在低渗透条件下传播的 SD 不是终点，但它与不可逆的组织损伤有关。需要进一步研究以了解 HM 中自发发生的 SD 进化与 OGD 下的 SD 进化之间的机制相似性或差异性。关键词：脑切片、脑缺血、扩散性去极化、渗透应激、氧葡萄糖剥夺
身份识别技术的领导者
我们在指纹、面部和虹膜识别算法方面拥有超过四十年的独特专业知识。我们的研究人员使用人工智能 (AI) 和深度学习算法来增强生物识别和身份验证的性能，包括偏差消除和活体检测。这些算法经过我们的团队和公认机构的严格设计、测试和验证，以确保在现实生活中的准确性、公平性和效率。
罕见转移性脐尿管癌的体外药物疗效建模
背景：体外药物筛选是指在患者体内活体肿瘤细胞中对药物疗效进行体外评估。这些方法的目的是能够对患者特定的抗癌疗法和个性化治疗策略的疗效进行功能测试。这种方法可能被证明是有效的，特别是在罕见癌症的情况下，由于患者数量少，很难证明新疗法。在这里，我们报告了转移性脐尿管腺癌中不同体外药物筛选方法的比较，转移性脐尿管腺癌是一种罕见且侵袭性的非尿路上皮膀胱恶性肿瘤，源自成人残余胚胎脐尿管。方法：为了比较替代体外药物筛选技术的可行性和获得的结果，我们使用了三种不同的方法；2D 细胞培养的酶促细胞活力测定和 2D 和 3D 细胞培养的并行基于图像的细胞计数。从外科减瘤手术中获得的活检中分离出的活体肿瘤细胞用于筛选 1160 种药物，目的是评估脐尿管癌细胞的疗效模式。
rajeev singh raghuvans hi
盲目，平行，主动控制，多中心，非自卑的第三阶段研究，以评估中国锡诺瓦氏菌生物技术有限公司的活体疫苗疫苗的免疫原性和安全性与Variped®疫苗相比，MSD Pharmaceuticals Pvt。CRN_3110/2021，1.0版，日期为27-10-2021]。2。该公司必须以CT-17表格提交测试许可，以进口Varicella疫苗，Live
解锁 loxP 来追踪体内基因组编辑
摘要：CRISPR 相关蛋白（如 Cas9）的开发提高了基因组编辑的可及性和易用性。然而，需要额外的工具来量化和识别活体动物中成功的基因组编辑事件。我们开发了一种快速量化和监测活体动物中基因编辑活动的方法，该方法还有助于共聚焦显微镜和核苷酸水平分析。在这里，我们报告了一种新的 CRISPR“指纹识别”方法，用于激活小鼠中的荧光素酶和荧光蛋白作为基因编辑的功能。该系统基于我们之前的 cre 重组酶 (cre) 检测系统的经验，专为能够靶向 lox P 的 Cas 编辑器而设计，包括 SaCas9 和 ErCas12a 的 gRNA。这些 CRISPR 专门在 lox P 内切割，这种方法不同于以前靶向相邻终止序列的体内基因编辑活动检测技术。在这种传感器范例中，在肌肉或静脉内流体动力质粒注射后，在活体 cre 报告小鼠（FVB.129S6(B6)-Gt(ROSA)26Sortm1(Luc)Kael/J 和 Gt(ROSA)26Sortm4(ACTB-tdTomato,-EGFP)Luo/J，本文中将称为 LSL-luciferase 和 mT/mG）中非侵入性地监测 CRISPR 活性，证明了其在两种不同器官系统中的实用性。通过共聚焦显微镜在特定组织的细胞水平上检查了相同的基因组编辑事件，以确定成功基因组编辑细胞的身份和频率。此外，SaCas9 诱导的靶向编辑效率与 cre 相当，证明了在整个动物中具有高效的传递和活性。这项研究建立了基因组编辑工具和模型，以非侵入性方式追踪体内 CRISPR 编辑并识别目标细胞。这种方法还使之前生成的数千种 lox P 动物模型中的任何一种都具有类似的实用性。